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公开(公告)号：CN105838791A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610252399.1
申请日：2016-04-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6869 , C12Q2537/165 , C12Q2535/122
Abstract: 本发明公开了一种挖掘鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化过程中关键lncRNA的分析方法，本方法首先从如皋黄鸡的新鲜受精蛋的胚盘、第19期(72h)的生殖脊和第18天的睾丸，分离出鸡ESCs、PGCs和SSCs,并根据CDH1基因设计特异性，以PCR扩增的方法进行性别鉴定，对运用抗体标记的ESCs、PGCs和SSCs进行分选,阳性细胞提取细胞总RNA，纯化后对RNA质量进行检测，检测合格后进行RNA?Seq测序。将测序结果中筛选出组装RNA的转录本。分离鸡ESCs，PGCs和SSCs，提取总RNA，反转录为cDNA。对候选的lncRNA进行Trans和Cis靶基因的预测分析，并通过DAVID数据库查找其GO功能项，再通过GO分析注释其功能，对其进行功能分析。绘制关键lncRNA及其靶基因与相关信号通路之间的关系互作网络图。
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公开(公告)号：CN111965094B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202010853561.1
申请日：2020-08-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种比较体外诱导的PGC‑like细胞迁移效率的方法，属于生物技术领域。前期通过不同的诱导体系将ESCs或iPS细胞诱导分化形成PGC‑like细胞，将获得的PGC‑like细胞进行PKH26细胞膜表面标记，然后注射至孵化2.5天的受体鸡胚血管，封口后继续孵化至4.5天，分离鸡胚生殖嵴，进行冰冻切片后在荧光显微镜下观察红色荧光，并通过流式细胞术分析PKH26红色荧光的比例，从而比较不同体系诱导形成的PGC‑like细胞的迁移能力。结果发现能够明确对比出体外不同体系诱导的PGC‑like细胞的迁移能力的差异。本发明切实可靠，严谨准确，成效显著，为研究分析体外诱导的PGCs迁移归巢至生殖嵴的能力提供了一种新颖可行且高效的实验方法。
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公开(公告)号：CN113061651A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110376568.3
申请日：2021-04-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6869 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明涉及一种LPS感染后检测并调控鸡RIPK2基因甲基化的方法，包括以下步骤：步骤1）、LPS感染鸡巨噬细胞HD11，检测RIPK2基因表达量变化；步骤2）、重亚硫酸氢盐处理LPS感染前后的基因组；步骤3）、鸡RIPK2基因启动子区CpG岛片段PCR扩增和测序分析；步骤4）、5‑氮杂胞苷和M.SssI分别处理转染鸡RIPK2启动子质粒的鸡HD11细胞；步骤5）、5‑氮杂胞苷和M.SssI分别处理鸡HD11细胞，检测RIPK2基因表达量；通过本发明，对缓解应激性病理损伤和提高家禽健康具有重要的实践意义。
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公开(公告)号：CN111850082A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010748580.8
申请日：2020-07-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种研究鸡生殖细胞自噬的方法，属于生物技术领域。在生殖细胞中添加雷帕霉素激活细胞自噬，转染不同MOI值的GFP-LC3慢病毒载体，在显微镜下观察细胞生长状态，排除MOI值过高导致细胞凋亡的分组。收集各组样品，EdU检测各组细胞的增殖效率，同时通过western-blot检测游离的GFP蛋白和自噬标志蛋白LC3-Ⅰ（16 ku）与LC3-Ⅱ（14 ku）之间的转化和比例及荧光显微镜定位LC3蛋白在细胞中的表达情况综合评判该MOI值在鸡生殖细胞中的适用性。本发明操作简单，切实可行，探讨GFP-LC3慢病毒载体在鸡生殖细胞中的转染条件是将为自噬在胚胎干细胞向原始生殖细胞的诱导分化中的作用研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN111849918A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010723146.4
申请日：2020-07-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12Q1/6888 , C12Q1/6869
Abstract: 一种鸡SSCs中受组蛋白甲基化调控的靶基因的方法，属于生物技术领域。该方法尝试将生物信息学和实验验证相结合，RNA-seq和CHIP-seq相结合，筛选出在鸡SSCs中受组蛋白甲基化调控的关键靶基因。采用本发明对组蛋白甲基化调控的靶基因进行的研究简单可靠，同时考虑到靶基因的保守性，为拓宽组蛋白甲基化在SSCs上的研究提供理论依据。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111534481A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010416986.6
申请日：2020-05-18
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/074
Abstract: 一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为鸡iPS细胞效率的方法，属于生物技术领域。前期研究发现通过OSNL体系可将鸡CEF诱导重编程为iPS，但效率较低，在此基础上，研究体细胞诱导重编程过程中糖酵解代谢发挥的作用并对诱导体系进行进一步的优化。本发明操作简单，切实可行，应用广泛。由于鸡诱导多能干细胞具有发育的全能性，在适当条件下可被诱导分化为多种细胞组织，因此可作为一种新的干细胞来源，也为珍稀动物的保种、转基因动物的生产等研究开辟了新思路。本发明将小分子化合物和细胞代谢联系在一起，将为禽类体细胞诱导重编程研究提供了更多的理论基础和技术支撑，也有利于为家禽细胞和胚胎工程研究提供更多的实验材料。
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公开(公告)号：CN110272919A
公开(公告)日：2019-09-24
申请号：CN201910593462.1
申请日：2019-07-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/66 , C12N5/10 , C12Q1/686
Abstract: 本发明提供一种寻找胚胎干细胞向原始生殖细胞分化过程中Wnt信号通路的靶基因的方法，涉及生物技术领域，本发明所述方法首先对Wnt信号通路的关键转录因子TCF7L2进行靶基因预测，对预测靶基因进行GO功能注释，筛选出其中共同参与生殖细胞发育及干细胞分化的保守性靶基因作为待选靶基因；通过体内外试验验证Wnt信号对待选靶基因转录水平的调控作用，检测待选靶基因的启动子中所述转录因子结合位点缺失时、Wnt信号对待选靶基因转录水平是否有调节作用，通过ChIP-qPCR验证β-Catenin/转录因子复合物与待选靶基因的结合作用，从而确定待选靶基因是否对Wnt信号具有靶向响应作用。本发明所述方法简单易行。
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公开(公告)号：CN104745527B
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：CN201510193606.6
申请日：2015-04-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种新的快速鸡胚盘的分离方法：首先将鸡胚钝端向上握在手中，用镊子尖头轻轻在受精蛋中部钻出一个小孔后，将镊子一端插入小孔，沿着赤道线方向，依次用镊子夹碎蛋壳，延赤道线分离蛋壳一圈后，轻轻的剥离钝端蛋壳，在此过程中应尽量保持鸡胚水平，防止卵黄随蛋清流出；剥离蛋壳后，用镊子将蛋清从卵黄中分离；使用镊子的侧面拨动卵黄，寻找胚盘；找到胚盘后，尽量将胚盘拨到正中央，用剪刀沿胚盘四周呈正方形剪开，此时，使用镊子夹住将含有胚盘的正方形卵黄膜一角，沿水平方向轻轻拉出来，将此卵黄膜放入37℃的PBS的培养皿中，轻轻晃动培养皿,使卵黄和卵黄膜从胚盘上脱离下来，从而获得了完整的胚盘。
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公开(公告)号：CN216375603U
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202122512998.1
申请日：2021-10-19
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本实用新型公开了生物研究用品设备技术领域的一种鸡胚显微注射用玻璃针盒，包括盒体和设置在盒体上部的盖子，盒体底部设有置针台，置针台与盒体底部形成U型槽放置托针台，托针台上方设置有压针块，置针台、托针台与压针块之间形成用于放置鸡胚显微注射用玻璃针的空间，压针块与托针台、置针台共同固定鸡胚显微注射用玻璃针，使其在存储和运输状态下能保持稳定，在遭受外部冲击时对鸡胚显微注射用玻璃针进行保护，本实用新型的玻璃针盒成本低廉，结构小巧便于携带，易于组装和操作并且可以根据实验需要进行改造，使其用于小鼠胚胎注射针和斑马鱼鱼卵注射针等显微注射针的存储和运输，具有广阔的推广和应用的价值。
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公开(公告)号：CN208151348U
公开(公告)日：2018-11-27
申请号：CN201820385249.2
申请日：2018-03-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本实用新型涉及一种简易的用于鸡胚显微注射的断针装置，属于生物技术领域。断针装置，包括电池组（1）、控制器（2）、马达（3）、砂轮（5），电池组（1）通过控制器（2）连接马达（3），马达（3）通过导线连接电池组（1），马达（3）通过联轴器（4）驱动连接砂轮（5）。本实用新型用于鸡胚显微注射针的断针，可以简便的根据需求对显微注射针进行断针，操作简便易行，结构合理简单，使用方便，成本低廉，易于推广应用。
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