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公开(公告)号：CN115885975A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211589326.3
申请日：2022-12-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种高效的鸡胚组织块冻存复苏的方法，属于生物技术领域。本发明在鸡胚中分离组织块，加入组织块冷冻保护液后进行冻存，复苏组织块后游离出鸡成纤维细胞；本发明为稀缺物种（如地方畜禽品种）的细胞建库以进行大规模组织块冻存以及种质资源保存提供依据。
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公开(公告)号：CN115747140A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211487333.2
申请日：2022-11-25
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 一种诱导鸡胚胎干细胞分化生成原始生殖细胞的方法，属于生物技术领域。其特征是，鸡胚胎干细胞分离培养后，采用诱导培养基，至诱导分化后，收集细胞。本发明提供的方法和诱导培养基可以将鸡胚胎干细胞诱导分化为原始生殖细胞，质量稳定，安全性高，为研究鸡胚原始生殖细胞的发生机制提供理论基础，为组织工程、药物开发和细胞治疗提供大量的细胞来源，为基因修饰、基因打靶、基因敲除、基因转染及生产转基因动物奠定实验基础。
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公开(公告)号：CN111778289A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010734335.1
申请日：2020-07-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/867
Abstract: 一种利用CRISPR-Cas9靶向敲除鸡Bmp4基因的方法，属于生物技术领域。本发明通过基因编辑技术沉默基因的表达为基因功能的研究提供了重要的技术手段，RISPR-Cas9系统属于基因编辑技术中的一种，具有敲除效率高、操作简单、成本低等优点。为此，本发明利用RISPR-Cas9技术构建Bmp4敲除载体，不仅能够从基因组上抑制Bmp4的表达，为更准确地研究Bmp4基因在鸡原始生殖细胞（Primordial germ cells,PGCs）形成过程中的功能提供实验素材，而且也有利于为将来构建基因敲除鸡模型奠定实验基础。
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公开(公告)号：CN111778283A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010723202.4
申请日：2020-07-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12Q1/6897
Abstract: 一种研究组蛋白乙酰化调节鸡LncRNA表达的方法，属于生物技术领域。通过对鸡LncPGCR的启动子克隆、核心调控区域选定、检测组蛋白乙酰化对鸡LncPGCR启动子活性的影响进行了探究，为进一步研究鸡LncPGCR的表达调控机制奠定基础。本发明的方法简单易行，思路清晰，操作可行性高，在普通研究室就能完成。实验者两个月就能完成。本发明将组蛋白乙酰化调节鸡LncRNA表达的研究扩展到家禽领域，并准确定位到鸡LncPGCR上，刷新了不同物种中组蛋白乙酰化调节LncRNA表达进而发挥功能的范畴。
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公开(公告)号：CN111763722A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010731512.0
申请日：2020-07-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/6888 , C12N15/89
Abstract: 一种基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的方法，属于生物技术领域。本发明的通过基因组测序鉴定PGCs介导后代生成的研究方法切实可靠，严谨准确，成效显著，为CEF转分化形成的PGC-like细胞介导产生的后代鸡的鉴定工作提供了一种新颖可行且高效的实验方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111965094A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010853561.1
申请日：2020-08-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种比较体外诱导的PGC-like细胞迁移效率的方法，属于生物技术领域。前期通过不同的诱导体系将ESCs或iPS细胞诱导分化形成PGC-like细胞，将获得的PGC-like细胞进行PKH26细胞膜表面标记，然后注射至孵化2.5天的受体鸡胚血管，封口后继续孵化至4.5天，分离鸡胚生殖嵴，进行冰冻切片后在荧光显微镜下观察红色荧光，并通过流式细胞术分析PKH26红色荧光的比例，从而比较不同体系诱导形成的PGC-like细胞的迁移能力。结果发现能够明确对比出体外不同体系诱导的PGC-like细胞的迁移能力的差异。本发明切实可靠，严谨准确，成效显著，为研究分析体外诱导的PGCs迁移归巢至生殖嵴的能力提供了一种新颖可行且高效的实验方法。
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公开(公告)号：CN111925981A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010868114.3
申请日：2020-08-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735 , C12Q1/6879 , C12Q1/6888
Abstract: 本发明提供了一种分离鸡雌雄原始生殖细胞的方法，旨在鸡胚孵化至4.5天时,取下生殖嵴，通过血液进行性别鉴定后分离出雌雄鸡胚的PGCs，将为早期干细胞的进一步应用奠定基础。本方法适用于家禽雌雄原始生殖细胞的分离，方法新颖科学，结果准确可靠。本发明可以准确的分离鸡雌雄原始生殖细胞，为PGCs在医学以及发育生物学、禽类嵌合体制备、转基因禽类的方面研究提供准确的原材料。此外，本发明中的细胞分离方法也可以应用于其他禽类研究中，具有很好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN111856033A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010724879.X
申请日：2020-07-24
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 一种研究鸡lncRNA互作蛋白的方法，属于生物技术领域。通过设计并合成了LncPGCR的sense和antisense链来进行RNA-pull down，筛选出互作蛋白。进一步结合RIP实验技术，对互作蛋白表达变化进行了探究，丰富了lncRNA与蛋白质互作的研究。本发明的方法简单易行，思路清晰，操作可行性高，在普通研究室就能完成。实验者两个月就能完成。本发明将lncRNA与蛋白质互作的研究扩展到家禽领域，并准确定位到LncPGCR上，刷新了不同物种中lncRNA通过与蛋白质互作发挥功能的范畴。
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公开(公告)号：CN111849873A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010748573.8
申请日：2020-07-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735 , C12Q1/02 , C12Q1/6888 , G01N33/68
Abstract: 一种诱导鸡的胚胎干细胞自噬的方法，属于生物技术领域。首先通过EdU检测添加了不同浓度雷帕霉素的细胞的增殖能力，其次荧光定量PCR检测自噬相关基因的表达量，最后蛋白免疫印迹检测LC3蛋白的表达量，结合雷帕霉素对细胞增殖效率的影响和诱导自噬发生的效果综合评价从而确定最佳诱导浓度和时间。探讨雷帕霉素对家禽生殖细胞的诱导条件将为自噬在胚胎干细胞向原始生殖细胞的诱导分化中的作用研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN111965094B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202010853561.1
申请日：2020-08-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种比较体外诱导的PGC‑like细胞迁移效率的方法，属于生物技术领域。前期通过不同的诱导体系将ESCs或iPS细胞诱导分化形成PGC‑like细胞，将获得的PGC‑like细胞进行PKH26细胞膜表面标记，然后注射至孵化2.5天的受体鸡胚血管，封口后继续孵化至4.5天，分离鸡胚生殖嵴，进行冰冻切片后在荧光显微镜下观察红色荧光，并通过流式细胞术分析PKH26红色荧光的比例，从而比较不同体系诱导形成的PGC‑like细胞的迁移能力。结果发现能够明确对比出体外不同体系诱导的PGC‑like细胞的迁移能力的差异。本发明切实可靠，严谨准确，成效显著，为研究分析体外诱导的PGCs迁移归巢至生殖嵴的能力提供了一种新颖可行且高效的实验方法。
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