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公开(公告)号：CN117643284A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202310843939.3
申请日：2023-07-11
Applicant: 吉林大学重庆研究院
IPC: A01K67/0276 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/53 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供一种KIAA1191基因不表达的异种移植供体猪及其制备方法，KIAA1191基因能引起异种免疫排斥风险，还利用CRISPR/Cas9系统敲除KIAA1191基因，验证了KIAA1191基因不表达可有效降低供体猪的器官、组织和/或细胞与接受者IgG和IgM的结合能力，提高供体猪的器官、组织和/或细胞抵抗接受者补体介导的细胞毒性的能力，可以延长供体猪的器官、组织和/或猪细胞接受者生存时间。
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公开(公告)号：CN117384900A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311088349.0
申请日：2023-08-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61P31/22 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供一对敲除猴SLC35B2基因的sgRNA及应用，靶向SLC35B2基因的第三、四外显子区域，具有较高的靶向效率和敲除效率，敲除基于CRISPR/Cas9系统进行，sgRNA序列包括sgRNA1和sgRNA2，敲除后SLC35B2基因表达被抑制；sgRNA1的DNA序列的正义链如SEQ ID NO：1，其对应互补链的DNA序列如SEQ ID NO：2；sgRNA2的DNA序列的正义链如SEQ ID NO：3，其对应互补链的DNA序列如SEQ ID NO：4，SLC35B2基因敲除细胞系能够在一定程度上抑制PRV在细胞中的增殖，对于抗PRV药物靶点筛选研究具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117099743A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202310843950.X
申请日：2023-07-11
Applicant: 吉林大学
IPC: A01K67/027 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/877 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供一种SNX6基因不表达的异种移植供体猪及其制备方法，SNX6基因能引起异种免疫排斥风险，还利用CRISPR/Cas9系统敲除SNX6基因，验证了SNX6基因不表达可有效降低供体猪的器官、组织和/或细胞与接受者IgG和IgM的结合能力，提高供体猪的器官、组织和/或细胞抵抗接受者补体介导的细胞毒性的能力，可以延长供体猪的器官、组织和/或猪细胞接受者生存时间。
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公开(公告)号：CN108642055B
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN201810470831.3
申请日：2018-05-17
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供一条能有效编辑猪miR‑17‑92基因簇的sgRNA，以能特异识别猪miR‑17‑92基因簇的sgRNA为前提，利用CRISPR/Cas9和RNAi技术，成功将shRNA定点整合到猪肾细胞PK‑15‑EGFP‑KI细胞，并筛选出敲低了EGFP基因表达的阳性细胞克隆；利用上述sgRNA将shRNA定点整合到猪胎儿成纤维细胞，成功筛选出shRNA定点整合的阳性细胞系，并检测到shRNA的稳定转录和定点整合事件，该细胞系的制备过程中，shRNA在猪miR‑17‑92基因簇的启动子的作用下稳定转录和有效表达，没有引入任何的外源的启动子基因及正负筛选标记基因，增加了转基因猪的安全性，对去除转基因猪的生物安全隐患具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111647605A
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN202010662810.9
申请日：2020-07-10
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6818 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种检测非洲猪瘟病毒的crRNA以及试剂盒，属于病毒检测技术领域。本发明中所述crRNA为引导CRISPR-Cas12a特异性结合非洲猪瘟靶标DNA的crRNA；本发明所述的试剂盒包括所述的靶标DNA、crRNA、CRISPR-Cas12a、优化后的检测缓冲液，ssDNA探针和RNA酶抑制剂；CRISPR-Cas12a在crRNA的引导下识别靶标分子非洲猪瘟DNA后，CRISPR-Cas12a、crRNA和靶标DNA分子结合成复合物切割检测体系内的ssDNA荧光探针，产生大量荧光可被检测。本发明所述试剂盒检测特异性好，灵敏度高，操作简单，耗时短。
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公开(公告)号：CN106916820B
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201710341126.9
申请日：2017-05-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一条能有效编辑猪ROSA26基因的sgRNA及其应用，以猪基因组中的一个能特异识别猪ROSA26基因的sgRNA为前提，利用CRISPR/Cas9介导基因敲入技术，成功地构建了EGFP定点整合的猪胎儿成纤维细胞的细胞系，结果显示该细胞系能稳定且高效的表达EGFP基因，且该细胞系的制备过程中没有引入任何的外源的启动子基因及正负筛选标记基因。这大大的增加的转基因猪的安全性，对去除转基因猪农产品的生物、食品安全隐患具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103497932B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201310481480.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12Q1/68 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种对猪圆环病毒2型（PCV2）高敏感的细胞系，同时还公开了该细胞系的制备方法，采用PCV2感染PK-15细胞后3-羟-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMG-CoAreductase，HMGCR）的表达有显著变化，且沉默HMGCR基因后，PCV2的TCID50达108.5/mL。用RNA干扰技术获得HMGCR基因沉默细胞系，并经过筛选，最终可获得对PCV2高度敏感的细胞系。用本发明制备的HMGCR基因沉默细胞培养猪圆环病毒2型，可获得较高滴度的病毒，有利于猪圆环病毒2型致病机理研究、病毒培养、全病毒灭活苗开发及工业化生产。
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公开(公告)号：CN101984062B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201010182404.9
申请日：2010-05-26
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种维持干细胞自我更新的6个猪源关键基因的体外转录质粒构建，其特征在于具体制备方法如下：首先设计基因体外转录空载体Vitro-TransPMD-18T，然后获得EGFP和维持干细胞自我更新的猪源的6个关键基因的cDNA，并按相应的酶切位点进行酶切连接，最后用体外转录试剂盒对7个体外转录质粒进行体外转录，得到相应的mRNA，然后将Vitro-Trans-EGFP转染进猪胚胎成纤维细胞：其6个基因体外转录出的mRNA转染进猪胚胎成纤维细胞后能够使其转变成猪的多能干细胞；6个基因体外转录出的mRNA能够高效翻译。
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