公开(公告)号：CN113750220B

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202010492150.4

申请日：2020-06-02

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  左诗曼 ,  孙璐琛 ,  杨南飞 ,  郑薇

IPC: A61K38/19 ,  A61K35/28 ,  A61P35/02 ,  C12N5/0775 ,  A61K31/4152

Abstract: 本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种脐带来源间充质干细胞联合TPO及其类似物在制备治疗慢性髓性白血病中的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC‑MSCs)，在联合TPO类似物Eltrombopag后可高效诱导慢性髓性白血病细胞分化，该种能力是通过MSCs分泌TPO并诱导白血病细胞表达TPO受体(MPL)来实现的；相较于化疗，间充质干细胞移植的毒副作用更低，且具有低免疫原性，满足临床需求，且Eltrombopag为临床批准药物。该种方法为髓性白血病的干细胞移植治疗提供了新的思路，可应用于髓性白血病的分化治疗。

公开(公告)号：CN113116923B

公开(公告)日：2022-11-29

申请号：CN202010029582.1

申请日：2020-01-10

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  束雨新 ,  贝云成 ,  杨南飞

IPC: A61K33/16 ,  A61K31/22 ,  A61K9/51 ,  A61K47/42 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明提供了一种双效组合纳米体系及其在增强肿瘤相关巨噬细胞抗肿瘤免疫中的应用。该双效组合纳米体系不同于只具备载氧能力的全氟化碳类纳米颗粒，其在递送氧气的同时还可以释放包裹的PCB别构激活剂/别构激活剂前体。通过干预肿瘤相关巨噬细胞中丙酮酸羧化酶(PCB)的表达(递送氧气)及活性(PCB别构激活剂/别构激活剂前体)，可以增强肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)吞噬肿瘤细胞的能力并降低TAMs的T细胞抑制功能，从而激活抗肿瘤免疫，抑制肿瘤生长。

公开(公告)号：CN114586735A

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202011413314.6

申请日：2020-12-04

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  杨南飞

IPC: A01K67/02 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/10 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及两种Pparg基因定点突变小鼠模型的构建和应用。本发明运用CRISPR/Cas9基因编辑技术，对Pparg基因的编码第166位苏氨酸的位置进行人工突变，并以此成功制作了两种定点突变小鼠品系。本发明亦基于获得的Pparg基因定点突变小鼠品系，通过多种细胞、生化、分子生物学的研究手段，分析了这两种品系的多种生理与病理状态、确定了其用于相关研究的应用价值。同时，Pparg基因定点突变小鼠可用于相关药物的筛选、药物设计、药理/毒理学、药效学、药物代谢动力学以及治疗靶标发掘的应用。

公开(公告)号：CN111471648A

公开(公告)日：2020-07-31

申请号：CN202010282962.6

申请日：2020-04-10

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  孙璐琛 ,  杨南飞 ,  郑薇 ,  左诗曼

IPC: C12N5/0775 ,  A61K35/28 ,  A61P35/02

Abstract: 本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种脐带来源间充质干细胞应用于急慢性髓系白血病分化疗法的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)，在经过特定的化学小分子-1，25D3(1，2-二羟基维生素D3，1，25-Dihydroxyvitamin D3)预处理活化后得到的间充质干细胞(Active MSCs)；所述Active MSCs可高效诱导AML细胞分化，该种能力是通过分泌白介素6(IL-6)及吲哚-2，3双加氧酶(IDO)来实现的；所述间充质干细胞为异体间充质干细胞，在经过VDR激动剂1，25D3处理活化后能够使其IL-6和IDO的表达及分泌能力显著提高至少3倍，抗AML能力显著增强。相较于化疗，间充质干细胞移植的毒副作用更低，且具备低免疫原性，满足临床需求，且1，25D3为临床批准药物，预处理后干细胞上清无药物残留。该种方法为髓系白血病的干细胞移植治疗提供了新的思路，可应用于髓系白血病的分化治疗。

公开(公告)号：CN106754723A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611095758.3

申请日：2016-12-02

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  牛志远

IPC: C12N5/10 ,  A61K35/17 ,  A61K35/15 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种基因改造过的对恶性实体瘤具有治疗作用的免疫细胞及其应用。本发明提供的免疫细胞是特定的通过基因改造使之过表达脂代谢相关基因的免疫细胞；所述免疫细胞抑制肿瘤生长的能力是通过在肿瘤微环境中降低免疫细胞本身脂滴的积累，降低促肿瘤基因/蛋白表达，增强免疫细胞的吞噬能力、抗原呈递能力及肿瘤杀伤能力来实现的；所述免疫细胞为离体NKT细胞、DC细胞、巨噬细胞、单核细胞、粒细胞或T细胞。相关代谢调控基因的过表达使免疫细胞抗肿瘤能力显著增强，相较目前受到强烈关注的嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(CAR‑T)，毒副作用低且不会引起细胞因子风暴，满足临床需求。

公开(公告)号：CN101691393A

公开(公告)日：2010-04-07

申请号：CN200910035979.5

申请日：2009-10-15

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  卢彦 ,  徐加发

IPC: C07J73/00 ,  C09K11/06 ,  G01N33/533 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种香豆素标记雷公藤内酯醇及其制备方法和应用。用4-溴甲基-7-甲氧基香豆素标记雷公藤内酯醇，其分子量为648，最大激发波长320nm，最大发射波长398nm，全波长光的照射下可发出黄色光，具有免疫抑制活性。制备时，先将雷公藤内酯醇14位羟基活化，后在丙酮溶剂中与4-溴甲基-7-甲氧基香豆素和碳酸钾反应，生成具有荧光特性的雷公藤内酯醇衍生物。将其加入活细胞中，可见细胞质有蓝色荧光，为雷公藤内酯醇的细胞定位于示踪提供了直观的证据。

公开(公告)号：CN1966087A

公开(公告)日：2007-05-23

申请号：CN200610146648.5

申请日：2006-11-10

Applicant: 南京大学

Inventor： 张煜 ,  徐涵文 ,  沈萍萍

IPC: A61K49/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种以研究肝癌发生发展机制及抗肿瘤药物开发为目的的小鼠原发性肝癌模型的建立方法。从HepS腹水癌小鼠腹腔内抽取腹水，分离细胞并制成细胞悬液，打开小鼠腹腔，用微量注射器抽取细胞悬液注射入小鼠肝脏，用75％酒精棉签按压针孔至肝脏表面不再渗血，用α－氰基丙烯酸盐乙酯粘合剂封闭针孔，再以生理盐水冲洗肝脏表面，分层关腹。结果显示模型小鼠肝癌发生率为100％，自然消退率为零。该模型是一种可以用于研究原发性肝癌发生发展的机制、同时也适用于抗肿瘤药物开发、肝癌的实验性治疗及诊断研究的理想的原发性肝癌模型。

公开(公告)号：CN113754754B

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202010492246.0

申请日：2020-06-02

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  杨南飞 ,  郑薇 ,  樊继强 ,  王婧悦

IPC: C07K14/705 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22 ,  C07K1/36 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明属于生物技术领域的蛋白质复性方法，针对核受体蛋白的结构特性，以锌离子辅助的梯度透析复性方法，实现对全长核受体蛋白的完全复性，恢复其生物学活性。本发明根据核受体蛋白复性过程中的不同状态，优化透析复性液的组分梯度，使得在不同的复性阶段，以较合适的盐离子强度，稳定剂及中间态抑制剂浓度帮助核受体蛋白进行折叠。此外，针对核受体蛋白DNA结合区(DNA binding domain，DBD)高疏水性的结构特点，引入10μM的硫酸锌，帮助复性过程中DBD区域形成正确的锌指结构，减小因热力学不稳定而导致的蛋白质折叠失败。相比以往的针对核受体蛋白的复性方法，该种方法可实现全长蛋白质(非蛋白截短体)的完全复性，操作方法简单，得率可达30％以上。复性获得的核受体蛋白具备天然活性，可用于后续生物学功能分析及结构生物学相关应用。

公开(公告)号：CN114586735B

公开(公告)日：2024-02-09

申请号：CN202011413314.6

申请日：2020-12-04

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  杨南飞

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/02 ,  C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及两种Pparg基因定点突变小鼠模型的构建和应用。本发明运用CRISPR/Cas9基因编辑技术，对Pparg基因的编码第166位苏氨酸的位置进行人工突变，并以此成功制作了两种定点突变小鼠品系。本发明亦基于获得的Pparg基因定点突变小鼠品系，通过多种细胞、生化、分子生物学的研究手段，分析了这两种品系的多种生理与病理状态、确定了其用于相关研究的应用价值。同时，Pparg基因定点突变小鼠可用于相关药物的筛选、药物设计、药理/毒理学、药效学、药物代谢动力学以及治疗靶标发掘的应用。

公开(公告)号：CN116731967B

公开(公告)日：2023-11-17

申请号：CN202311033278.4

申请日：2023-08-16

Applicant: 南京大学 ,  南京元迈细胞生物科技有限公司

Inventor： 沈萍萍 ,  陈一军 ,  章文龙 ,  王锐

IPC: C12N5/0786

Abstract: 本发明公开了一种从多能干细胞通过诱导分化制备巨噬细胞的方法、试剂盒及其应用，所述方法包括：首先使多能干细胞分化为拟胚体，然后使所述拟胚体与一种或多种选自以下的细胞因子接触，从而得到所述巨噬细胞：胎肝激酶配体(Flt3L)、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子（GM‑CSF）、巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)、血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞因子(SCF)、胰岛素样生长因子1（IGF‑1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白介素3(IL‑3)。本发明方法耗时短、分化效率高、产品纯度高、可重复性强、有利于大规模自动化生产。