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公开(公告)号：CN116063555A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202210989144.9
申请日：2022-08-17
Applicant: 广东优酶生物制造研究院有限公司 , 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种RML脂肪酶嵌合体及其应用，所述RML脂肪酶嵌合体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述RML脂肪酶嵌合体在具有脂肪酶活力的同时也具有磷脂酶活力，且相较于野生型RML脂肪酶，对磷脂底物的水解活性提高了161倍，更符合磷脂加工中对酶性能的需求，可用于油脂脱胶、磷脂改性、生产溶血磷脂，应用于生物、食品、医药、美容、农业、工业等领域。
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公开(公告)号：CN114891767B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202210557888.3
申请日：2022-05-19
Applicant: 华南理工大学 , 广东优酶生物制造研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种角质酶‑酯酶融合蛋白及其应用，所述角质酶‑酯酶融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示，本发明的角质酶‑酯酶融合蛋白在降解PET时，相较于HRC单酶、以及HRC/PCEST双游离酶，可以显著提高降解效率和终产物对苯二甲酸的得率。且本发明的角质酶‑酯酶融合蛋白具有极高的温度、pH、金属离子、有机溶剂、表面活性剂耐受性，有较好的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN114525266A
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202210160732.1
申请日：2022-02-22
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于南极细菌的磷脂酶D突变体及其应用，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8。本发明所构建的突变体S148C‑T206C和D225C‑A328C相比于野生型酶蛋白，在保持其最适反应温度条件不变的情况下，将其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的1.4和2.0倍。S148C‑T206C和D225C‑A328C叠加突变后，其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的3.2倍，且酶活力提高到原来的1.4倍。本发明获得的MsPLD突变体可适用于磷脂改性，生产磷脂酸及各类天然稀有磷脂和非天然磷脂化合物，应用于生物、食品、医药、日化等领域。
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公开(公告)号：CN112662644B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202110067082.1
申请日：2021-01-19
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域，公开了一种甘油磷酸二酯磷酸二酯酶(GDPD)突变体及其应用，所述突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上突变所得，即亲本序列中第60位的天冬氨酸和第67位的丝氨酸中的至少一个突变为除与自身同一生化特性类别氨基酸以外的其他任意一种氨基酸。本发明获得的GDPD突变体可用于催化溶血磷脂获得高纯度溶血磷脂酸，相较于野生型，突变体能够达到水解溶血磷脂只生成单一溶血磷脂酸的目的，降低了溶血磷脂酸制备过程中的纯化难度，进一步提升了该酶在药物、食品、化妆品等领域的利用价值。
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公开(公告)号：CN113755470A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111163758.3
申请日：2021-09-30
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程领域，公开了一种脂肪酶最适反应pH的调控方法，所述脂肪酶是与Gibberella zeae来源的脂肪酶GZEL一级序列相似度为50％以上，且在末端具有HxxYxxxxxxC保守基序的脂肪酶，针对该保守基序内距离半胱氨酸残基1‑5个残基位点的氨基酸进行突变。本发明可实现对应脂肪酶最适反应pH在酸性、中性、碱性环境进行任意切换。本发明还提供了具体突变的氨基酸残基信息。本发明突变位点的选择，在确保酶蛋白最适反应温度及酶活力不变的情况下，仅对其最适反应pH造成改变，所改造的脂肪酶进一步扩大了反应pH条件的适用性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113481183A
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202110679849.6
申请日：2021-06-18
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于酶工程领域，公开了一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用，脂肪酶嵌合体氨基酸序列如SEQ NO.1所示，编码脂肪酶嵌合体的基因核苷酸序列如SEQ NO.2所示。构建方法如下：(1)pcr扩增出GMGL的N端前160个氨基酸肽段；(2)无缝克隆方式将步骤(1)的氨基酸肽段替换到CoMGL对应肽段得到重组质粒；(3)将测序成功的重组质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞内进行异源表达与纯化，得到脂肪酶嵌合体160。改造后的嵌合体160在最适条件的比酶活为741.8U/mg，是野生型CoMGL的4.9倍，是野生型GMGL的2.7倍；最适反应温度为70℃，具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN112899256A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110129291.4
申请日：2021-01-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于南极细菌的耐低温磷脂酶D及其制备方法和应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；该耐低温磷脂酶D基因序列如SEQ IDNO:2所示。本发明获得一株耐低温磷脂酶D的大肠杆菌重组表达菌株，利用该菌株，可实现重组蛋白大量可溶性表达，易于后期纯化及蛋白获得。本发明的表达产物具备有良好的低温储藏稳定性和良好的酶活力，同时对有机溶剂和表面活性剂有一定的耐受性。本发明获得磷脂酶D可适用于磷脂改性，生产磷脂酸及各类天然稀有磷脂和非天然磷脂化合物，应用于生物、食品、医药、化妆品、农业、工业等领域。
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公开(公告)号：CN104830920B
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201510167583.1
申请日：2015-04-09
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P7/64
Abstract: 本发明公开了一种甘油二酯的生产方法，包括以下步骤：(1)采用脂肪酶对油脂在容器I中进行甘油解反应；(2)将步骤(1)反应物分离甘油和脂肪酶后的油相输送到容器II中，容器II内油脂的温度为60～150℃，油脂在容器II中的停留时间为1～12hr，然后降温至甘油解反应的温度，返回至容器I中，添加甘油和脂肪酶，继续步骤(1)的甘油解反应；(3)重复上述反应，使得油脂发生1～10次循环，得到富含甘油二酯的反应产物。本发明通过升温或者化学催化的方法对反应产物中的甘油二酯进行构型转化，从而得到甘油二酯含量更高的反应产物。该方法提高了甘油二酯转化率，而且易于操作。
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公开(公告)号：CN107916257A
公开(公告)日：2018-04-17
申请号：CN201810017359.8
申请日：2018-01-09
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了T1脂肪酶突变体和应用，所述突变体是对序列SEQ ID NO：1中氨基酸取代位置至少发生如下任意一种突变：(1)采用“原始氨基酸-位置-替换的氨基酸”表示脂肪酶突变体中单点突变的氨基酸L359S、I362E或V364N；(2)采用氨基酸序列片段置换方式发生突变，将野生型T1的288-291位氨基酸残基Asn-Ala-Phe-Ser置换成Glu-Phe-Thr-Lys。突变体水解甘油酯的活性有不同程度的提高，分别是野生型T1的6、6、4、6、3、5倍，而突变体的最适反应温度及pH并没有明显变化。本发明所得突变体，更适合生物化工行业的应用，尤其适应用于难熔油脂的改性。
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公开(公告)号：CN104312734B
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201410559952.7
申请日：2014-10-20
Applicant: 华南理工大学
IPC: C11C3/10
Abstract: 本发明涉及一种通用的分子重构型调和油及其生产方法，包含以下步骤：(1)将A类油脂和B类油脂按1:1～10的比例混合；所述A类油脂为棕榈仁油和椰子油中的一种或两种的混合物；所述B类油脂为不饱和脂肪酸含量大于80％的植物油；(2)经过酯交换反应；(3)步骤(2)反应产物经过分提处理，分提温度为3～18℃，收获液体油部分，即为分子重构型调和油。本发明生产的调和油的方法，具有以下优点：(1)本发明的液体调和油产率高，抗冻性能好；(2)本发明方法能提高液体油脂中饱和脂肪酸的含量；(3)按照本方法所生产的酯交换调和油具有抑制肥胖发生的作用。
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