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公开(公告)号:CN113061625B
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202110446154.3
申请日:2021-04-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/864 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/23 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域,特别涉及一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用。所述的复制缺陷型犬细小病毒包装载体,包括载体ITR质粒和辅助质粒,其中,载体ITR质粒包含核心元件ITR‑P‑EGFP‑TS‑ITR,其核苷酸序列如SEQID NO.1所示,辅助质粒包含核心蛋白基因NS‑VP,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该包装载体进一步共同转染细胞,得到复制缺陷型CPV‑2重组病毒,该重组病毒既能将外源基因转导入宿主细胞中进行表达,又不会复制出子代病毒,具有很高的安全性。
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公开(公告)号:CN114031674A
公开(公告)日:2022-02-11
申请号:CN202111021841.7
申请日:2021-09-01
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/11 , C12N15/44 , C12N15/866 , C12N5/10 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供了一种热稳定性增强的H7N9禽流感病毒HA蛋白,所述热稳定性增强的H7N9禽流感病毒HA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。相比较野生型HA蛋白,本发明的H7N9禽流感病毒HA蛋白具有更强的热稳定性和免疫原性。本发明的H7N9禽流感病毒HA蛋白与SEPPIC MONTANIDETMISA 71 VG配合免疫SPF鸡后,相比较野生型HA蛋白,可刺激机体更快地产生更高水平的HI抗体,并提供针对异源H7N9禽流感病毒致死性攻击的完全临床保护,同时减少攻毒后鸡群的排毒量。
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公开(公告)号:CN113528578A
公开(公告)日:2021-10-22
申请号:CN202110572557.2
申请日:2021-05-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟O61R蛋白的重组杆状病毒,采用该重组杆状病毒在昆虫细胞中表达非洲猪瘟O61R蛋白,为生产非洲猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号:CN107338330A
公开(公告)日:2017-11-10
申请号:CN201710656101.8
申请日:2017-08-03
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种检测猪圆环病毒3型的实时荧光定量PCR引物、试剂盒和检测方法。所述的检测猪圆环病毒3型的实时荧光定量PCR引物其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~2所示。本发明还提供了一种包含上述引物的试剂盒以及猪圆环病毒3型的检测方法。上述引物、试剂盒以及检测方法特异性强、灵敏性高和重复性稳定,扩增产物的融解曲线波峰单一,无引物二聚体,与猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪蓝耳病毒基因组均无交叉反应;灵敏性为102拷贝/μL,比常规PCR高100倍;组间和组内重复试验的变异系数均小3.0%。为该疫病的分子流行病学和防控研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN106421771A
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201610580511.4
申请日:2016-07-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61P31/16 , C12N15/866 , C12N15/44
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5256 , A61K2039/53 , C07K14/005 , C12N15/86 , C12N2710/14043 , C12N2760/16122 , C12N2760/16134
Abstract: 本发明公开了一种以杆状病毒为载体的H7N9亚型禽流感基因工程疫苗及其制备方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明所述的H7N9亚型禽流感基因工程疫苗是以杆状病毒为载体,能够在脊椎动物体内表达禽流感病毒主要保护性抗原的重组杆状病毒。制备成经肌肉注射免疫的禽流感基因工程疫苗。该疫苗克服了灭活苗依赖鸡胚生产、生产周期长、存在其他抗原混合感染等方面的不足,为筛选H7N9亚型禽流感疫苗提供技术储备。
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公开(公告)号:CN105497887A
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201510934797.7
申请日:2015-12-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61P31/16
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5256 , A61K2039/53 , C12N15/86 , C12N2710/14021 , C12N2710/14043 , C12N2760/16134
Abstract: 本发明公开了一种提高禽流感灭活疫苗异源保护力的辅助制剂及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明所述的辅助制剂是以杆状病毒为载体,能够在脊椎动物体内表达禽流感病毒保守抗原表位的重组杆状病毒。禽流感病毒快速变异,而现有禽流感灭活疫苗对异源毒株保护力弱,本发明将禽流感病毒高度保守、具有交叉保护作用的抗原片段HA2 76-130、3M2e、NP55-69、NP380-393的编码基因插入杆状病毒基因组,制备成经肌肉注射免疫的禽流感灭活疫苗辅助制剂,与灭活苗联合使用。该辅助制剂克服了传统禽流感灭活疫苗对异源毒株交叉保护力方面的不足,从而实现对禽流感疫情有效的防控。
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公开(公告)号:CN105331601A
公开(公告)日:2016-02-17
申请号:CN201510790960.7
申请日:2015-11-17
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用,属于细菌遗传改造技术领域。本发明中通过在上游引物中添加USS序列ACCGCTTG,使的PCR产物含有这个USS序列,副猪嗜血杆菌会识别并带入菌体内部进行重组,无需构建突变常用的自杀质粒,本方法把抗性基因直接引入到PCR产物中,直接用PCR产物就能实现筛选,同时在引物中引入USS,细菌就会直接吞噬这个重组模版用于同源重组。本发明的基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法在构建副猪嗜血杆菌双组分系统突变体中应用。
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公开(公告)号:CN102839195A
公开(公告)日:2012-12-26
申请号:CN201210248620.8
申请日:2012-07-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/866 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种利用pFast Bac Dual杆状病毒表达PCV2Cap蛋白的方法,该方法包括以下步骤:扩增带有His标签的编码PCV 2 Cap蛋白的基因片段;将上述基因片段连接到pFast Bac Dual质粒上,获得重组转移质粒pFast Bac-p10-ORF2-pH-ORF2;将重组转移质粒转化大肠杆菌DH10Bac,经蓝白斑筛选后得到重组穿梭载体Bac-p10-ORF2-pH-ORF2;将重组穿梭载体转染昆虫细胞,获得重组杆状病毒Ac.Dual-Cap;将重组杆状病毒接毒于昆虫细胞,培养后收集昆虫细胞,将表达产物纯化后得到重组Cap蛋白。本发明方法解决了Cap蛋白在真核细胞中表达量低的难题。本发明方法重组的Cap蛋白设计有His标签,利于其后续的纯化,并且其生物活性优于原核表达系统所表达的Cap蛋白,可以应用于流行病学诊断方法的建立及PCV2亚单位疫苗的研发。
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