公开(公告)号：CN116375852B

公开(公告)日：2024-02-02

申请号：CN202310229857.X

申请日：2023-03-10

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗永文 ,  徐孟磊 ,  刘思泽 ,  郑艳虹 ,  蔡成辉 ,  毕水莲 ,  郭霄峰

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/569 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及重组荧光纳米抗体及其在制备狂犬病病毒检测试剂中的应用，属于生物分子诊断技术领域，本发明利用酵母双杂交系统筛选出与狂犬病病毒G蛋白结合力较强的纳米抗体，在其C端连接增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和6个组氨酸(6×His)标签，将抗体融合蛋白基因克隆到原核表达载体pMal‑p5x上，通过原核表达工程菌Shuffle T7‑B进行表达。把通过原核表达、纯化获得的具有荧光蛋白标记的纳米抗体，代替荧光素标记抗体应用于狂犬病病毒的直接免疫荧光检测(DFA)。

公开(公告)号：CN116375852A

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202310229857.X

申请日：2023-03-10

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗永文 ,  徐孟磊 ,  刘思泽 ,  郑艳虹 ,  蔡成辉 ,  毕水莲 ,  郭霄峰

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/569 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及重组荧光纳米抗体及其在制备狂犬病病毒检测试剂中的应用，属于生物分子诊断技术领域，本发明利用酵母双杂交系统筛选出与狂犬病病毒G蛋白结合力较强的纳米抗体，在其C端连接增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和6个组氨酸(6×His)标签，将抗体融合蛋白基因克隆到原核表达载体pMal‑p5x上，通过原核表达工程菌Shuffle T7‑B进行表达。把通过原核表达、纯化获得的具有荧光蛋白标记的纳米抗体，代替荧光素标记抗体应用于狂犬病病毒的直接免疫荧光检测(DFA)。

公开(公告)号：CN113061625B

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202110446154.3

申请日：2021-04-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗永文 ,  吕华达 ,  毕水莲 ,  徐孟磊 ,  樊惠英

IPC: C12N15/864 ,  C12N15/66 ,  C12N7/01 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域，特别涉及一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用。所述的复制缺陷型犬细小病毒包装载体，包括载体ITR质粒和辅助质粒，其中，载体ITR质粒包含核心元件ITR‑P‑EGFP‑TS‑ITR，其核苷酸序列如SEQID NO.1所示，辅助质粒包含核心蛋白基因NS‑VP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该包装载体进一步共同转染细胞，得到复制缺陷型CPV‑2重组病毒，该重组病毒既能将外源基因转导入宿主细胞中进行表达，又不会复制出子代病毒，具有很高的安全性。

公开(公告)号：CN113061625A

公开(公告)日：2021-07-02

申请号：CN202110446154.3

申请日：2021-04-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗永文 ,  吕华达 ,  毕水莲 ,  徐孟磊 ,  樊惠英

IPC: C12N15/864 ,  C12N15/66 ,  C12N7/01 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域，特别涉及一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用。所述的复制缺陷型犬细小病毒包装载体，包括载体ITR质粒和辅助质粒，其中，载体ITR质粒包含核心元件ITR‑P‑EGFP‑TS‑ITR，其核苷酸序列如SEQID NO.1所示，辅助质粒包含核心蛋白基因NS‑VP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该包装载体进一步共同转染细胞，得到复制缺陷型CPV‑2重组病毒，该重组病毒既能将外源基因转导入宿主细胞中进行表达，又不会复制出子代病毒，具有很高的安全性。