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公开(公告)号：CN116375852A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310229857.X
申请日：2023-03-10
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及重组荧光纳米抗体及其在制备狂犬病病毒检测试剂中的应用，属于生物分子诊断技术领域，本发明利用酵母双杂交系统筛选出与狂犬病病毒G蛋白结合力较强的纳米抗体，在其C端连接增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和6个组氨酸(6×His)标签，将抗体融合蛋白基因克隆到原核表达载体pMal‑p5x上，通过原核表达工程菌Shuffle T7‑B进行表达。把通过原核表达、纯化获得的具有荧光蛋白标记的纳米抗体，代替荧光素标记抗体应用于狂犬病病毒的直接免疫荧光检测(DFA)。
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公开(公告)号：CN113061625B
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202110446154.3
申请日：2021-04-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/864 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/23 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域，特别涉及一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用。所述的复制缺陷型犬细小病毒包装载体，包括载体ITR质粒和辅助质粒，其中，载体ITR质粒包含核心元件ITR‑P‑EGFP‑TS‑ITR，其核苷酸序列如SEQID NO.1所示，辅助质粒包含核心蛋白基因NS‑VP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该包装载体进一步共同转染细胞，得到复制缺陷型CPV‑2重组病毒，该重组病毒既能将外源基因转导入宿主细胞中进行表达，又不会复制出子代病毒，具有很高的安全性。
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公开(公告)号：CN118440190A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410540768.1
申请日：2024-04-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种人源化狂犬病病毒纳米抗体、重组纳米抗体蛋白及在制备狂犬病防治产品中的应用。本发明筛选得到与狂犬病病毒糖蛋白结合力较强、具有血脑屏障穿越能力的人源化狂犬病病毒纳米抗体，然后分别在其C端连接EGFP和血脑屏障穿透肽T7或PepH3，将抗体融合蛋白基因克隆到原核表达载体pMal‑p5x上，通过原核表达工程菌Shuffle T7进行表达和纯化，得到够从静脉进入中枢神经系统进行病毒中和治疗的重组纳米抗体蛋白。
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公开(公告)号：CN116375852B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202310229857.X
申请日：2023-03-10
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及重组荧光纳米抗体及其在制备狂犬病病毒检测试剂中的应用，属于生物分子诊断技术领域，本发明利用酵母双杂交系统筛选出与狂犬病病毒G蛋白结合力较强的纳米抗体，在其C端连接增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和6个组氨酸(6×His)标签，将抗体融合蛋白基因克隆到原核表达载体pMal‑p5x上，通过原核表达工程菌Shuffle T7‑B进行表达。把通过原核表达、纯化获得的具有荧光蛋白标记的纳米抗体，代替荧光素标记抗体应用于狂犬病病毒的直接免疫荧光检测(DFA)。
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公开(公告)号：CN110042087A
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201910206785.0
申请日：2019-03-19
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/65 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及抗体检测技术领域，尤其涉及一种重组狂犬病病毒rHEP-△G-EGFP及其应用。所述重组狂犬病病毒rHEP-△G-EGFP为糖蛋白基因缺失型重组毒株，所述糖蛋白基因缺失型重组毒株具有如下特性：a)含有细胞来源的标准强毒株糖蛋白；b)能够感染细胞且在细胞中表达绿色荧光蛋白；c)无法在细胞和动物体中自我复制和扩散。利用该重组狂犬病病毒rHEP-△G-EGFP建立的狂犬病病毒中和抗体水平检测方法具备以下优点：一、该病毒不能在细胞和活体中传代繁殖，因此更安全；二、该检测方法以直接荧光显微镜下观察，更加经济便捷；三、该检测方法的测定结果相对于利用弱毒株的方法更加可靠。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118666970A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410565914.6
申请日：2024-05-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/005 , C12N15/81 , C12N15/47 , A61K39/205 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域，特别涉及一种酵母表面展示的重组狂犬病病毒糖蛋白抗原、动物狂犬病口服疫苗及应用。本发明利用酵母表面展示技术，将狂犬病病毒糖蛋白的胞外抗原区连接至酿酒酵母Aga2蛋白的C端，中间加GS柔性肽连接，并在狂犬病病毒糖蛋白抗原区的C端融合不同组合形式的肠道M细胞的靶向配体OmpHβ1α1螺旋区域和Co1，将设计好并经过密码子优化后的的基因序列插入pYD1质粒上，通过酿酒酵母EBY100株进行诱导表达，在其表面展示狂犬病病毒糖蛋白的胞外抗原区。诱导表达后的重组酵母菌可作为口服疫苗免疫小鼠。
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公开(公告)号：CN118345198A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410563347.0
申请日：2024-05-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及一种同时检测狂犬病病毒完整及缺损型基因组的qPCR引物组及应用。所述的同时检测狂犬病病毒完整及缺损型基因组的qPCR引物组包含RABV基因组定量引物、DVGs定量引物和反转录引物RABVG‑DVG‑RT，其核苷酸序列如SEQ ID No.1～3所示，本发明提供的qPCR引物组、试剂盒和方法可以同时对狂犬病病毒复制产生的病毒基因组和缺损型基因组进行定量分析，结果准确、可靠，可为狂犬病病毒的科学研究以及疫苗生产提供一种监测病毒复制产物的技术手段。
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公开(公告)号：CN118344444A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410565886.8
申请日：2024-05-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/145 , C12N15/47 , C12N15/81 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/58 , C12R1/865
Abstract: 本发明涉及生物诊断技术领域，特别涉及一种酵母表面展示的重组狂犬病病毒糖蛋白胞外抗原及在制备病毒中和抗体检测产品中的应用。本发明利用酵母表面展示技术将狂犬病病毒糖蛋白的胞外抗原区连接至酿酒酵母Aga2蛋白的C端，在Aga2蛋白N端连接的酵母转化酶信号肽Ins得到酵母表面展示的重组狂犬病病毒糖蛋白胞外抗原，该重组RABV糖蛋白胞外抗原可以在酵母表达系统中成功表达并展示到其表面。利用成功表达该重组RABV糖蛋白胞外抗原的酵母菌建立的检测RABV中和抗体的YSD‑cELISA检测方法无需抗原包被在ELISA板，利用离心或过滤等方式即可实现RABV中和抗体的免疫检测，检测方法简单、经济。
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公开(公告)号：CN113061625A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110446154.3
申请日：2021-04-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/864 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/23 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域，特别涉及一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用。所述的复制缺陷型犬细小病毒包装载体，包括载体ITR质粒和辅助质粒，其中，载体ITR质粒包含核心元件ITR‑P‑EGFP‑TS‑ITR，其核苷酸序列如SEQID NO.1所示，辅助质粒包含核心蛋白基因NS‑VP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该包装载体进一步共同转染细胞，得到复制缺陷型CPV‑2重组病毒，该重组病毒既能将外源基因转导入宿主细胞中进行表达，又不会复制出子代病毒，具有很高的安全性。
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公开(公告)号：CN109182280A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201810972626.7
申请日：2018-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及动物基因工程疫苗领域，尤其涉及一种狂犬病病毒重组毒株及其制备方法。该方法包括以下步骤：S1：以狂犬病病毒株rHEP-Flury为骨架，分别将狂犬病毒G蛋白膜外抗原区基因片段及大肠杆菌热敏肠毒素B亚单位基因插入rHEP-Flury的G基因和L基因之间的假基因区；S2：拯救筛选获得重组狂犬病病毒株rHEP-Get-LTB。该狂犬病病毒重组毒株rHEP-Get-LTB具有良好的复制能力以及安全性，通过Get和LTB基因的插入增强了疫苗株的免疫原性和黏膜免疫反应水平，口服免疫后可诱导较高水平的中和抗体，显著优于亲本株rHEP-Flury，可以作为动物狂犬病口服疫苗的候选株。
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