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公开(公告)号：CN111560384A
公开(公告)日：2020-08-21
申请号：CN202010322384.4
申请日：2020-04-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoRnt在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFoRnt；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoRnt原生质体，获得回补突变体ΔFoRnt-com。试验证明，ΔFoRnt在孢子形态、菌丝形态、抗高渗透、氧化胁迫等方面与野生型相比没有显著性差异；但FoRnt的缺失导致了其致病力的显著降低；本发明证实FoRnt是香蕉枯萎病菌致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN111534527A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010315617.8
申请日：2020-04-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoPao在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFoPao；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoPao原生质体；利用随机插入方法，将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体ΔFoPao-com。致病性试验表明，基因FoPao的缺失显著增加了香蕉枯萎病菌的毒力；将该基因回补后，回补突变体的毒力与香蕉枯萎病菌野生型一致。本发明证实FoPao与香蕉枯萎病菌的致病性有关。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制。
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公开(公告)号：CN109136166A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201810759252.0
申请日：2018-07-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/04 , C07K14/415 , C07K1/30
CPC classification number: C12N5/04 , C07K14/415
Abstract: 本发明属于蛋白质组学技术领域，具体首次公开了一种适于双向电泳的水稻叶片质膜磷酸化蛋白的提取方法，包括水稻叶片粗质膜的提取、水稻叶片质膜的纯化及水稻叶片质膜磷酸化蛋白质的富集等步骤。本发明所述提取方法操作简单、提取效率高、成本低，所获的水稻叶片质膜纯度可达93%以上，从质膜蛋白质中富集的质膜磷酸化蛋白质得率为3.33～3.89%。该方法适合于质膜磷酸化蛋白提取困难、干扰杂质多的植物材料；同时所得质膜磷酸化蛋白杂质和干扰物较少，可满足双向电泳的要求，所获双向电泳图谱背景清晰、蛋白质点分布均匀、纵向拖尾和水平横纹现象较少，且具有良好的重复性；该方法适用于单子叶植物质膜磷酸化蛋白质组的制备与分析。
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公开(公告)号：CN118271410A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410570411.8
申请日：2024-05-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了效应蛋白MoUPE7在调控稻瘟菌致病力中的应用。本发明通过构建基因MoUPE7的敲除载体并将其导入稻瘟菌原生质体，对所得敲除突变体的分生孢子萌发情况和致病力等进行分析发现，敲除基因MoUPE7会使稻瘟菌分生孢子的萌发和附着胞形成延迟，对H2O2的敏感性增加以及对水稻致病力的显著降低。即抑制效应蛋白MoUPE7的表达可以降低稻瘟菌致病力，降低其对水稻产量和品质的影响，可将能够抑制效应蛋白MoUPE7表达的试剂用于稻瘟病的防治。本发明不仅丰富了稻瘟菌的致病机理，也有利于稻瘟病绿色防控产品的开发。
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公开(公告)号：CN118085044A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410075167.8
申请日：2024-01-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了蛋白FoUPE7在降低香蕉枯萎病菌致病力中的应用。本发明通过构建编码香蕉枯萎病菌蛋白FoUPE7的基因(FoUPE7)的敲除质粒和回补质粒，利用所述敲除质粒和回补质粒分别转化对应原生质体，筛选得到FoUPE7敲除突变体和回补突变体发现并进行致病力分析发现，敲除基因FoUPE7会显著降低香蕉枯萎病菌的致病力，而将基因回补回去后，香蕉枯萎病菌的致病力恢复且与野生型相当，表明蛋白FoUPE7为香蕉枯萎病菌致病力相关蛋白，调控香蕉枯萎病菌的致病力，可将其作为靶点用于香蕉枯萎病的防治。本发明为香蕉枯萎病菌的防治提供了新的靶点，有利于香蕉枯萎病防治制剂的开发。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111534527B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010315617.8
申请日：2020-04-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoPao在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFoPao；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoPao原生质体；利用随机插入方法，将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体ΔFoPao‑com。致病性试验表明，基因FoPao的缺失显著增加了香蕉枯萎病菌的毒力；将该基因回补后，回补突变体的毒力与香蕉枯萎病菌野生型一致。本发明证实FoPao与香蕉枯萎病菌的致病性有关。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制。
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公开(公告)号：CN113174390A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110247234.6
申请日：2021-03-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了香蕉枯萎病菌FoNpp1基因在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用。本发明通过构建基因敲除载体，将FoNpp1基因导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体；通过构建基因回补载体，利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体。敲除突变体在生长发育方面不存在缺陷，对高渗胁迫、氧化胁迫等不敏感。致病性测定结果表明，与香蕉枯萎病菌野生型相比，敲除突变体镰刀菌酸含量及对巴西蕉的致病力显著降低。表明FoNpp1基因是香蕉枯萎病菌的致病相关基因，FoNpp1是香蕉枯萎病菌致病性所必需的，在防控香蕉枯萎病中具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN110183521A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910433251.1
申请日：2019-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种稻瘟菌基因MoRMD1在调控稻瘟菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入稻瘟菌原生质体；利用同源重组方法将该基因MoRMD1从稻瘟菌中敲除，获得敲除突变体ΔMoRMD1；所得到的稻瘟菌敲除突变体在附着胞形成方面存在缺陷，并且MoRMD1对维持细胞壁的完整性有重要作用。致病性试验表明，MoRMD1的缺失显著降低了稻瘟菌的毒力，在水稻叶片上不能形成明显病斑。本发明证实MoRMD1是稻瘟菌附着胞形成、维持细胞壁完整性和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明稻瘟菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN109536432A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811162769.8
申请日：2018-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法，包括以下步骤：S1.稻瘟菌分生孢子的培养：将稻瘟菌菌丝接种至PDA培养基中进行培养；向培养基中加入无菌水，捣碎菌丝，转至西红柿燕麦培养基中，涂抹均匀，28℃下光照培养2～4d；将培养基表面菌丝打断，再加入无菌水，洗去培养基表面菌丝，28℃下光照培养2～4d进行产孢；加入无菌水进行冲洗，收集分生孢子，过滤后得到浓缩的稻瘟菌分生孢子悬浮液；S2.采用超滤法制备稻瘟菌分生孢子分泌蛋白。本发明通过优化稻瘟菌分生孢子的培养和分泌蛋白的诱导提取步骤，避免了复杂的样品前处理过程；并应用shotgun技术，高通量分析鉴定了稻瘟菌分泌蛋白；本发明对于探究稻瘟菌的致病机理有重要意义。
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公开(公告)号：CN101186917B
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN200710032051.2
申请日：2007-12-04
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌激发子CSB I基因及其克隆方法，所述基因编码的核苷酸序列，cDNA全长序列如SEQ ID NO：1，氨基酸序列如SEQ ID NO：2。根据已测的CSB I激发子的肽端编码序列设计引物，以稻瘟病菌ZC13生理小种总RNA为模板，采用RT-PCR方法，合成cDNA第一链，利用cDNA末端快速扩增技术克隆得到了稻瘟病菌ZC13生理小种CSB I激发子的推导cDNA序列。本发明能作为广泛、大量研究激发子诱导水稻产生抗病性的机制的基础，并供研究水稻转基因育种使用。
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