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公开(公告)号：CN117757951B
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202311665628.9
申请日：2023-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于水产养殖领域中的鱼类性别鉴定领域，公开了团头鲂遗传性别特异分子标记、检测引物及应用。本发明基于高通量测序技术及雌雄基因组差减比较分析成功筛选到3个团头鲂雄性特异DNA片段，所述的3个特异性DNA片段分别为SEQ ID NO.1~3所示。针对3个特异性片段中任意一个，设计引物利用常规PCR扩增和普通琼脂糖电泳能够准确快速鉴定出团头鲂的遗传性别。与之前解剖检测或生殖突观察相比，该技术具有准确、简单、快速，对鱼体伤害少等优点，能够在团头鲂早期发育阶段确定个体性别，进而控制后备亲鱼群体的性比，降低养殖和维护成本，加快团头鲂性控育种进程，进一步推动团头鲂遗传改良与种质保护工作。
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公开(公告)号：CN117757951A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311665628.9
申请日：2023-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于水产养殖领域中的鱼类性别鉴定领域，公开了团头鲂遗传性别特异分子标记、检测引物及应用。本发明基于高通量测序技术及雌雄基因组差减比较分析成功筛选到3个团头鲂雄性特异DNA片段，所述的3个特异性DNA片段分别为SEQ ID NO.1~3所示。针对3个特异性片段中任意一个，设计引物利用常规PCR扩增和普通琼脂糖电泳能够准确快速鉴定出团头鲂的遗传性别。与之前解剖检测或生殖突观察相比，该技术具有准确、简单、快速，对鱼体伤害少等优点，能够在团头鲂早期发育阶段确定个体性别，进而控制后备亲鱼群体的性比，降低养殖和维护成本，加快团头鲂性控育种进程，进一步推动团头鲂遗传改良与种质保护工作。
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公开(公告)号：CN115943930A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211723915.6
申请日：2022-12-30
Applicant: 中国科学院水生生物研究所 , 华中农业大学
IPC: A01K67/027 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/873 , C12N15/89 , A01K61/10 , C12N15/12
Abstract: 本发明涉及鱼类遗传育种技术领域，尤其涉及一种无肌间刺银鲫的创制方法。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，向银鲫鱼卵注射含有runx2b‑A和runx2b‑B两个特异敲除靶位点的sgRNA与Cas9mRNA混合物，注射后的银鲫鱼卵经两次雌核生殖，在F1代出现所需无肌间刺银鲫。本发明方法实现了在F1代就能快速创制runx2b所有等位基因都被编辑的无肌间刺银鲫，为银鲫的基因编辑育种提供技术支撑，也为其它养殖鱼类精准设计育种提供了重要的参考价值。
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公开(公告)号：CN115261324A
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202210826196.4
申请日：2022-07-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/0793
Abstract: 本发明公开了一种鱼类嗅觉神经元的培养方法，该方法将获取的团头鲂嗅囊组织置于PBS缓冲液中剥离边缘黏膜、清洗；向嗅囊组织中加入AIM消毒液，密封后放入冰上消毒，离心后向沉淀组织中加入胰蛋白酶‑EDTA消化液消化，之后加入中和培养基、离心；加入胶原酶工作液，缓慢吹打，再加入中和培养基，离心收集细胞上清液；将收集的细胞液过滤、离心、收集细胞沉淀，然后用中和培养基清洗、离心，加入生长培养基重悬浮，得到细胞悬液；将细胞悬液接种在六孔板中，密封后置于细胞培养箱中进行培养，加入神经细胞培养基继续培养，得到鱼类嗅觉神经元。本发明操作简单，重复性好，为在体外实验节约实验成本和时间，减少实验的繁琐性。
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公开(公告)号：CN113528677A
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202110920777.X
申请日：2021-08-11
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了叶尔羌高原鳅微卫星分子标记及其引物和应用。属于分子生物学DNA标记技术和遗传学应用技术领域。叶尔羌高原鳅微卫星分子标记位点的核苷酸序列如SEQIDNO.1～10所示，用于扩增所述微卫星分子标记位点的引物如SEQIDNO.11～30所示。由于所提供的微卫星分子标记均来自转录组序列，因此出现无效等位基因的概率小；相对于二、三碱基微卫星分子标记，四碱基微卫星分子标记不容易出现因PCR扩增链滑脱而产生的影子带，能产生更稳定、更精确的基因分型结果。本发明提供的微卫星分子标记及其引物可用于叶尔羌高原鳅的群体遗传学分析、亲缘关系鉴定、分子标记辅助育种等领域。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113186302A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110624804.9
申请日：2021-06-04
Applicant: 华中农业大学 , 武汉市农业科学院 , 武汉先锋水产科技有限公司
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于水产养殖领域中的鱼类性别鉴定领域，具体涉及鲌鲂杂交种先锋2号的性别特异分子标记及应用。本发明通过高通量测序的方法成功筛选到鲌鲂杂交鱼雄性性别特异性DNA片段，所述的特异性DNA片段为SEQ ID NO.1所示。针对该特异性序列，设计引物利用常规PCR扩增和普通琼脂糖电泳对能够准确快速鉴定出鲌鲂杂交鱼及其父本黑尾近红鲌的性别，且公开了其引物序列、PCR反应体系和条件。与之前解剖检测或生殖突观察相比，该技术具有准确、简单、快速，对鱼体伤害少等优点，解决了鲌鲂杂交鱼及黑尾红鲌性别鉴定的难题，将有助于大规模培育鲌鲂杂交鱼全雌体系。
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公开(公告)号：CN105532642B
公开(公告)日：2018-04-10
申请号：CN201511003963.8
申请日：2015-12-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种团头鲂成鱼肌间骨染色的方法，其步骤：1、用无水乙醇固定团头鲂成鱼样本；2、用无水乙醇、蒸馏水对团头鲂成鱼标本复水；3、用TBST溶液浸泡团头鲂成鱼标本过夜处理；4、用蒸馏水浸泡团头鲂成鱼标本，洗去残余的TBST溶液；5、用新配的KOH溶液透明团头鲂成鱼标本；6、将标本转移至新的KOH溶液中，然后滴加茜素红染液染色，直至溶液变为深紫色；7、将标本转移至新的KOH溶液中，洗去团头鲂成鱼标本的染色液；8、将团头鲂成鱼标本转移至甘油中脱水保存。此方法易行，操作过程简单，无需复杂的仪器，获得身体透明、肌间骨染色为深紫色的团头鲂成鱼标本，标本可清楚观察团头鲂成鱼肌间骨的附着位置及形态。
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公开(公告)号：CN105532642A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201511003963.8
申请日：2015-12-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01N1/02
CPC classification number: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种团头鲂成鱼肌间骨染色的方法，其步骤：1、用无水乙醇固定团头鲂成鱼样本；2、用无水乙醇、蒸馏水对团头鲂成鱼标本复水；3、用TBST溶液浸泡团头鲂成鱼标本过夜处理；4、用蒸馏水浸泡团头鲂成鱼标本，洗去残余的TBST溶液；5、用新配的KOH溶液透明团头鲂成鱼标本；6、将标本转移至新的KOH溶液中，然后滴加茜素红染液染色，直至溶液变为深紫色；7、将标本转移至新的KOH溶液中，洗去团头鲂成鱼标本的染色液；8、将团头鲂成鱼标本转移至甘油中脱水保存。此方法易行，操作过程简单，无需复杂的仪器，获得身体透明、肌间骨染色为深紫色的团头鲂成鱼标本，标本可清楚观察团头鲂成鱼肌间骨的附着位置及形态。
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公开(公告)号：CN102487860B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110378926.0
申请日：2011-11-24
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明公开了一种筛选团头鲂具有杂交优势的群体组合的方法，其步骤是：a.收集团头鲂原产区的野生亲本并进行配组繁育；b.子代在同一池塘中混养，18个月后测量其生长相关性状；c.基于微卫星标记鉴定子代的亲本来源；d.基于亲子鉴定和生长性状数据分析具有杂交优势的群体组合，从中发现三个组合的子代的体重、体长和体高显著高于其他组合。将不同来源的野生亲本进行群体组合繁育，扩大了亲本的基因库，集合了更多的基因型，充分利用了杂交优势，子代具有更快的生长速度，使得团头鲂选育效果更明显。
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公开(公告)号：CN102487860A
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201110378926.0
申请日：2011-11-24
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明公开了一种筛选团头鲂具有杂交优势的群体组合的方法，其步骤是：a.收集团头鲂原产区的野生亲本并进行配组繁育；b.子代在同一池塘中混养，18个月后测量其生长相关性状；c.基于微卫星标记鉴定子代的亲本来源；d.基于亲子鉴定和生长性状数据分析具有杂交优势的群体组合，从中发现三个组合的子代的体重、体长和体高显著高于其他组合。将不同来源的野生亲本进行群体组合繁育，扩大了亲本的基因库，集合了更多的基因型，充分利用了杂交优势，子代具有更快的生长速度，使得团头鲂选育效果更明显。
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