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公开(公告)号：CN102060922A
公开(公告)日：2011-05-18
申请号：CN201010554288.9
申请日：2010-11-19
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种重组人雌激素α受体配体结合域蛋白，以及该重组蛋白的制备方法和应用。该重组蛋白包括人雌激素α受体蛋白的第270位氨基酸残基至第554-595位中任一氨基酸残基的片段，以及连接于该片段N端的6×His标签和C端的Strep tag II标签，其在稳定性和与雌激素化合物的结合活性方面均优于已经报道过的同类蛋白。且本发明的重组人雌激素α受体配体结合域蛋白带有双标签，便于纯化和后续应用。将该重组蛋白固定化于载体表面，制成雌激素受体亲和吸附剂，可用于环境雌激素污染物的选择性纯化和富集，为这类环境污染物的高通量检测提供了有力的手段。
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公开(公告)号：CN118795085A
公开(公告)日：2024-10-18
申请号：CN202411109578.0
申请日：2024-08-13
Applicant: 北京大学
IPC: G01N31/16
Abstract: 本发明公开了一种溶液中三价铬浓度的测定方法，涉及化学分析技术领域。本发明公开的溶液中三价铬浓度的测定方法包括如下步骤：S1，向待测溶液中加入氧化剂溶液，在加热条件下将三价铬氧化为六价铬，得到第一溶液；S2，采用库仑滴定法确定电解终点时间，并根据下式计算第一溶液中六价铬的浓度，通过第一溶液中六价铬的浓度即可得到待测溶液中三价铬的浓度；#imgabs0#通过对库仑滴定法中电解终点时间进行限定，可以在存在氧化剂的情况下对溶液中三价铬的浓度进行较为精确的测量，该方法操作简单，易于控制，可以进行实时监控。
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公开(公告)号：CN109680044B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910052680.4
申请日：2019-01-21
Applicant: 北京大学
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种基于选择性消除野生链背景干扰的基因突变检测方法。通过PCR对待测目标序列进行扩增，并通过Lambda核酸外切酶处理成单链DNA；设计并合成与野生型DNA序列目标区域互补的硫代DNA链以及与非目标区域互补的RNA封闭链，与单链DNA混合并升温退火后加入DNase I进行切割；DNase I在硫代DNA链的引导下选择性地切除野生型DNA链目标区域序列，突变型DNA链由于目标区域内存在错配不能被DNase I切除而得以保留，从而显著提升突变型DNA链的丰度，大幅度降低了目前已有技术检测低丰度基因突变的难度。本发明方法无需复杂昂贵的仪器，容易操作，成本低，1天之内即可给出结果，可为临床肿瘤早筛和术后复发监测提供及时、可靠的基因突变信息。
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公开(公告)号：CN110511984A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201910851694.2
申请日：2019-09-10
Applicant: 北京大学
IPC: C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种EGFR基因19号外显子缺失突变的快速荧光检测方法及应用。本发明方法利用Lambda核酸外切酶既可以快速水解DNA双链中5’末端为两个碱基的突出结构且标记有荧光基团的单链，又可以连续水解双链DNA中具有5’磷酸化末端DNA单链的性质，将突变碱基识别、PCR产物单链化和荧光信号放大过程合并完成，极大地简化了整个检测流程，减少了检测时间，相对检出限低至0.01％，灵敏度高，在临床诊断、靶向用药指导和术后伴随检测等方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN109593113A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201811212895.X
申请日：2018-10-18
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种分步分子印迹法，及通过该方法得到的分子印迹材料。本发明将分子印迹的过程分成两步进行，第一步选用的功能单体有两方面的作用，一是与模板分子有一定的相互作用，可以通过印迹过程形成印迹位点，二是聚合反应完成后，仍含有可进一步反应的活性基团，为第二步印迹提供条件。第二步选用的功能单体则首先需要能与一次印迹结束后的表面活性基团进行共价反应，其次可提供与模板分子表面区域之间新的相互作用。本发明引入两类反应条件不同的功能单体，从而使对模板分子的精细识别能力大大提高，亲和力也明显增强。
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公开(公告)号：CN101285836B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN200710090394.4
申请日：2007-04-10
Applicant: 北京大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/53
Abstract: 本发明提供了一种丙烯酰胺全抗原的制备方法，将N-丙烯酰氧琥珀酰亚胺在中性或弱碱性磷酸盐缓冲溶液中直接与载体蛋白分子表面的氨基进行胺解偶联反应，形成丙烯酰胺的全抗原。以该全抗原免疫动物获得特异性识别丙烯酰胺的多克隆抗体，由此而建立一种适于水溶液中及食品中丙烯酰胺含量测定的酶联免疫分析方法，并提供了相应的试剂盒。本发明制备丙烯酰胺全抗原的方法操作简便，无须加入其他反应试剂，在最大程度上保留了丙烯酰胺结构的完整性，并保证偶联位置与特征基团距离最远，使丙烯酰胺分子的特征结构得到充分暴露。所建立的丙烯酰胺的酶联免疫检测方法和试剂盒特异性强、灵敏度高、操作方便，适于实现成本低廉、快速简单的大量样品检测。
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公开(公告)号：CN102660640A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210112406.X
申请日：2012-04-16
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种对待测体系中的DNA目标序列进行特异性信号放大和检测的方法，利用单脱碱基双标记荧光探针的区分作用，结合内切酶IV和Lamdba外切酶的选择性切割作用，在温和条件下高灵敏度、高选择性、快速地检测DNA目标序列。本发明方法能够区分目标序列与单碱基差异干扰序列，适合应用于SNP分型以及低丰度突变的检测。
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公开(公告)号：CN102296116A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110259113.X
申请日：2011-09-02
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种对DNA目标序列进行信号放大和检测的方法，制备单脱碱基的双标记荧光探针，该探针一端标记荧光基团，另一端标记猝灭基团，除脱碱基位点外，其序列与DNA目标序列完全匹配；在一定检测温度下，该探针与目标序列特异性结合形成双链空位，利用内切酶IV识别并切割该双链空位，切割后的探针碎片从目标序列上解离下来，产生荧光信号，而解离释放出的目标序列可以继续与另一个探针结合，重复上述过程，从而实现目标序列的信号放大和检测。本发明方法可实现高选择性、高灵敏度的低丰度基因突变检测。
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公开(公告)号：CN102154489A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201110049749.1
申请日：2011-03-01
Applicant: 北京大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一类单标记寡聚核苷酸荧光探针及检测核酸酶的方法。该单标记寡聚核苷酸荧光探针具有茎环结构，环部由5-24个核苷酸残基组成，茎部根据待测核酸酶的活性分为水解模式与合成模式两种：水解模式的茎部为双链结构，且末端至少有3个连续G-C碱基对，C碱基端标记荧光基团，G碱基端产生猝灭作用，在核酸酶作用下茎部的一条链水解，释放出荧光信号；合成模式的茎部由一段双链和5’-(dC)4-8侧链组成，5’-端标记荧光基团，3’-端与核酸酶反应，聚合延伸产生4-8个连续的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸，猝灭5’-端的荧光基团，根据荧光信号的变化情况分析待测核酸酶活性。
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