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公开(公告)号：CN105463022A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201510697644.5
申请日：2015-10-23
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/866 , C07K14/435 , A01K67/04
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕丝腺生物反应器合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2的方法。先构建家蚕合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2的载体pBac[3xP3-DsRed]-MaSp2质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用piggyBac转座子的转座特性使红色荧光蛋白基因和黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，蚕蛾自交使黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2基因纯合，育成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白2，用于蜘蛛丝的开发利用，同时也可以用于提高蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN105400815A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510698099.1
申请日：2015-10-23
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕丝腺生物反应器合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的方法。先构建家蚕合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的载体pBac[3xP3-DsRed]-MaSp1质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用piggyBac转座子的转座特性使红色荧光蛋白基因和黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，蚕蛾自交使黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1基因纯合，育成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1，用于蜘蛛丝的开发利用，同时也可以用于提高蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN104593413A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201410853601.7
申请日：2014-12-31
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/14 , A01K67/04 , C07K14/765
Abstract: 本发明公开了一种利用家蚕后部丝腺合成分泌人血清白蛋白的方法。先构建家蚕合成分泌人血清白蛋白的载体pBHSA质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，用piggyBac转座子使红色荧光蛋白基因和人血清白蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，制成转基因家蚕，自交使人血清白蛋白基因纯合，育成分泌人血清白蛋白的转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕后部丝腺细胞特异地合成分泌人血清白蛋白，改善人血清白蛋白生产工艺，简化提纯方法，降低生产成本，为提高人血清白蛋白的生产效率、降低生产成本奠定基础，保证人血清白蛋白制品的生物安全性。
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公开(公告)号：CN102286529A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110123583.3
申请日：2011-05-13
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这2种质粒分别与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠piggyBac转座子的转座特性，使绿色荧光蛋白基因和狂犬病病毒糖蛋白基因导入到家蚕的基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制家蚕中部丝腺生物反应器、后部丝腺生物反应器、以及丝腺生物反应器三种生物反应器，育成家蚕中部丝腺细胞、后部丝腺细胞或两部分丝腺细胞能够特异性合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的转基因家蚕新品种。
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公开(公告)号：CN102242147A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201110123586.7
申请日：2011-05-13
Applicant: 浙江同点生物科技有限公司 , 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒核蛋白的方法。先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒核蛋白RVNP的载体pBSer1RVNP-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这种质粒与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕突变品种丝胶蚕已解除滞育的受精卵内，依靠piggyBac转座子的转座特性，使绿色荧光蛋白基因和狂犬病病毒核蛋白基因导入到丝胶蚕的基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制成一种能够在家蚕中部丝腺细胞特异性合成分泌狂犬病病毒核蛋白的转基因家蚕。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102226202A
公开(公告)日：2011-10-26
申请号：CN201110123584.8
申请日：2011-05-13
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法。是先构建家蚕合成分泌溶菌酶的载体pBSer1hLYZ-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这种质粒与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠piggyBac转座子的转座特性，使绿色荧光蛋白基因和溶菌酶基因导入到家蚕基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制成一种能够在家蚕中部丝腺细胞特异性合成分泌溶菌酶的转基因家蚕，并进一步将这种转基因家蚕与丝胶蚕杂交，将杂交后代再与丝胶蚕回交3-5代，最后再自交使溶菌酶基因纯合，育成分泌溶菌酶的转基因家蚕新品种，为提高溶菌酶的生产效率、降低生产成本奠定基础。
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公开(公告)号：CN111518832A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010392628.6
申请日：2020-05-11
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种蜘蛛梨状腺丝蛋白基因序列的应用及其改良家蚕丝性能的方法。蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的碱基为由花园银蛛梨状腺丝重复片段单元、络新妇蛛梨状腺丝重复片段单元构成的重复序列，具有改良家蚕丝性能等应用；构建家蚕合成分泌蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的载体，再利用显微注射将带有蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用转座子使荧光蛋白基因和蜘蛛梨状腺丝蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，育成分泌蜘蛛梨状腺丝蛋白的转基因家蚕。本发明发现了一种蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的用途，并开发了一种新型家蚕蜘蛛仿生丝的改良家蚕丝性能的生产方法，显著提高了蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN111500591A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010392626.7
申请日：2020-05-11
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种蜘蛛聚状腺丝蛋白基因序列的应用及其改良家蚕丝性能的方法。蜘蛛聚状腺丝蛋白基因为由络新妇蛛聚状腺丝1倍碱基重复单元以1-8倍连续重复构成的基因序列，具有改良家蚕丝性能等应用；先构建家蚕合成分泌聚状腺丝蛋白的载体pBac-ASG质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，用转座子使荧光蛋白基因和聚状腺丝蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，育成分泌蜘蛛聚状腺丝蛋白的转基因家蚕；本发明发现了一种蜘蛛聚状腺丝蛋白基因的用途，并开发了一种新型家蚕蜘蛛仿生丝的改良家蚕丝性能的生产方法，降低生产成本，显著提高了蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN105969802B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201610290881.4
申请日：2016-05-04
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕后部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其构建方法和应用。获得包含丝素轻链基因启动子、18s rRNA基因启动子、His 6序列、DDDDK、丝素轻链蛋白信号肽基因、丝素轻链基因polyA、家蚕肌动蛋白基因A3启动子、EGFP基因和SV40的3’序列，然后再构建质粒，第一表达框包括A3启动子、EGFP基因和SV40的3’序列，第二表达框包括丝素轻链基因启动子、18s rRNA基因启动子、丝素轻链蛋白信号肽、His 6序列、DDDDK和丝素轻链基因polyA，且含有ApaI和NheI两个酶切位点。本发明质粒减少了构建转基因家蚕donor质粒的构建工作量，提高了家蚕生物反应器工作效率，提高了外源蛋白的表达量。
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