一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法

    公开(公告)号:CN112342214A

    公开(公告)日:2021-02-09

    申请号:CN202011253224.5

    申请日:2020-11-11

    Abstract: 本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法,通过设计CRISPR序列,制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接,再通过体外转录方法制备sgRNA,将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵,以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列,特异性强且敲除效率高,敲除流程简单快捷,为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。

    一种与斑点叉尾鮰快速生长相关的单倍型SNP分子标记及其检测方法和应用

    公开(公告)号:CN105969882B

    公开(公告)日:2019-12-03

    申请号:CN201610466570.9

    申请日:2016-06-23

    Abstract: 本发明专利属于水产动物分子标记辅助育种领域,具体涉及一种与斑点叉尾鮰快速生长相关的单倍型SNP分子标记及其检测方法和应用。所述的SNP分子标记从斑点叉尾鮰PRL基因克隆得到,该分子标记的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。本发明还公布了上述分子标记在斑点叉尾鮰生长性状分子检测中的应用。筛选基因型分别为AA、CC、TT、CC、AA的个体,即单倍型组合为H3/H3(ACTCA/ACTCA)的个体作为选育亲本。本发明的方法,操作简单、检测速度快,大大降低了斑点叉尾鮰亲本筛选的盲目性,可以快速获得生长速度快且遗传稳定的斑点叉尾鮰亲本。

    一种检测斑点叉尾鮰HSP4基因隐性致白化突变的方法

    公开(公告)号:CN108753988A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201810575835.8

    申请日:2018-06-06

    CPC classification number: C12Q1/6888 C12Q2600/124 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明提供了一种检测斑点叉尾鮰HSP4基因隐性致白化突变的方法。本发明方法采用一对特异引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,对斑点叉尾鮰HSP4基因进行PCR扩增,扩增产物进行凝胶电泳,依据电泳图谱中出现的条带数及大小判定基因分型的结果。白化个体有99bp的碱基缺失,只有一条较小的150bp条带;正常个体HSP4基因没有变化,只有一条较大的249bp条带;隐性致白化突变携带者个体该基因单链缺乏99bp,导致同时存在150bp和249bp一大一小两条带。本发明能够快速、准确地检测HSP4基因隐性致白化突变携带者的个体,在斑点叉尾鮰育种过程中具有重要应用价值。

    一种斑点叉尾鮰半同胞家系规模化构建方法

    公开(公告)号:CN107509667A

    公开(公告)日:2017-12-26

    申请号:CN201710826969.8

    申请日:2017-09-14

    CPC classification number: A01K61/10

    Abstract: 本发明公开了一种斑点叉尾鮰半同胞家系规模化构建方法,步骤包括:1)培育亲本;2)构建父系半同胞家系;3)交配产卵;4)孵化卵块,对已产卵雌鱼注射PIT电子标记;5)人工催产。雌鱼注射后放入产卵器中与雄鱼交配;6)产卵完成后,取出卵块进行后续孵化。同时取出已产卵的雌雄鱼,注射PIT电子标记,放入池塘继续养殖,用作后续年度的繁殖。本发明方法使斑点叉尾鮰半同胞家系构建成功率显著提高,缩短了家系构建周期。

    一种促进斑点叉尾鮰生长和改善肠道菌群的发酵饲料投喂方法

    公开(公告)号:CN116349625A

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202310384789.4

    申请日:2023-04-12

    Abstract: 本发明公开了一种促进斑点叉尾鮰生长和改善肠道菌群的发酵饲料投喂方法,养殖时,用膨化配合饲料和发酵饲料投喂斑点叉尾鮰;每隔一周,用所述发酵饲料替代所述膨化配合饲料的20%,混合后投喂一周,每日早晚两次投喂;采用本发明方法进行养殖,添加发酵饲料的实验组养殖斑点叉尾鮰体重均高于对照组,且间隔投喂组体重最高,显著高于对照组,因为持续添加发酵料反而使得斑点叉尾鮰肠道菌群的多样性和丰富度有所下降,尤其是放线菌门和蓝藻门的丰度,并会提高条件致病菌变形杆菌门的相对丰度,进而影响斑点叉尾鮰生长。

    与斑点叉尾鮰性别连锁的SNP分子标记及遗传性别鉴定方法

    公开(公告)号:CN111304338B

    公开(公告)日:2023-03-31

    申请号:CN202010177166.6

    申请日:2020-03-13

    Abstract: 本发明属于鱼类遗传育种技术领域,涉及SNP分子标记技术领域。本发明公开了一种与斑点叉尾鮰性别连锁的SNP分子标记及遗传性别鉴定方法,包括斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记的筛选、验证、雄性特异DNA序列的克隆、序列分析、特异引物设计以及遗传性别鉴定的PCR方法;根据获得的斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记引物及雄性特异DNA序列,创建了斑点叉尾鮰遗传性别的PCR鉴定方法。本发明首次筛选到斑点叉尾鮰性别连锁的SNP标记及雄性特异序列,建立了基于PCR和Sanger测序技术的斑点叉尾鮰遗传性别鉴定方法。本发明具有高效、准确和稳定的特点,在斑点叉尾鮰单性苗种培育等方面具有重要应用价值,同时在定位性别决定基因及性别决定机制研究中也具有重要应用前景。

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