实时荧光绝对定量检测家禽cGAS蛋白的试剂盒、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN112458182A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011361517.5

    申请日:2020-11-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种实时荧光绝对定量检测家禽cGAS蛋白的试剂盒、检测方法及应用,属于生物分析检测技术领域。本发明提供一种实时荧光绝对定量检测家禽cGAS蛋白的试剂盒,包含:上游引物、下游引物,以及Taq Man探针,检测家禽cGAS蛋白的方法,包括:将标准品模板和待测样品DNA模板分别置于各自的反应体系中,并同时置入PCR仪进行扩增,扩增完毕后由PCR仪自动得出检测结果;检测结束后,根据噪音情况设定和调整基线及阈值并利用随机软件进行分析,建立标准曲线,根据荧光曲线和Ct值判断结果。本发明检测方法及试剂盒具有高灵敏度及相对的高特异性,而且可以精确定量检测标本中家禽cGAS蛋白的mRNA表达量。

    小鹅瘟病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101591713B

    公开(公告)日:2011-11-02

    申请号:CN200910027228.9

    申请日:2009-05-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测小鹅瘟病毒的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶8M/μL、10mM dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、10μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B(50mM MgCl2)和反应液C(100X的荧光染料SYBR Green I)。通过对组织样品中DNA、鹅泄殖腔棉拭子样品中DNA提取、小鹅瘟病毒的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出小鹅瘟病毒。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,适于现场快速检测。

    鹅瘟病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101591713A

    公开(公告)日:2009-12-02

    申请号:CN200910027228.9

    申请日:2009-05-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测小鹅瘟病毒的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶8M/μL、10mM dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、10μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B(50mM MgCl2)和反应液C(100X的荧光染料SYBR Green I)。通过对组织样品中DNA、鹅泄殖腔棉拭子样品中DNA提取、小鹅瘟病毒的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出小鹅瘟病毒。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,适于现场快速检测。

    一种淋巴组织特异性基因表达调控序列

    公开(公告)号:CN101100670A

    公开(公告)日:2008-01-09

    申请号:CN200710024386.X

    申请日:2007-06-18

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 一种淋巴组织特异性基因表达调控序列及其构建方法,本发明涉及基因表达调控和基因工程领域,提供了用于淋巴细胞中特异性高表达的基因调控DNA序列。具有马立克氏病病毒编码的vIL8基因淋巴组织特异性基因表达正调控的启动子-470-+10的DNA序列。人们可用该基因序列构建相应的表达载体,驱动目的基因在靶器官组织中的特异性表达,用这些调控DNA序列在特定组织,调控一些抑制肿瘤的基因,包括有调理作用或诱导凋亡、抑制细胞生长信号传导,从而达到抑制、消灭肿瘤的目的,用这些调控DNA序列进行免疫增强和调节的药物研究与开发。

    一种重组禽腺病毒的制备方法

    公开(公告)号:CN1231598C

    公开(公告)日:2005-12-14

    申请号:CN03131899.1

    申请日:2003-06-13

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产疫苗药物的技术领域。以中国分离的I群禽腺病毒为材料,通过PCR方法将该病毒基因组的两个末端L片段和r片段、ITR片段扩增出来,克隆进pHC粘粒载体中,并以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因为报告基因,插入设计好的r片段和ITR片段之间,构建转移质粒载体pFAV-eGFP,然后转染已被野生病毒感染了的鸡胚肾细胞,进行同源重组,筛选重组病毒,获得表达增强型绿色荧光蛋白的重组禽腺病毒。从而确定位于基因组右末端r片段和ITR片段之间的位点为病毒复制非必需区,并以此为载体开发研制相关基因工程产品。

    重组γ-干扰素预防和治疗奶牛隐性乳房炎

    公开(公告)号:CN1181887C

    公开(公告)日:2004-12-29

    申请号:CN02138397.9

    申请日:2002-10-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域。应用一步法逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对奶牛γ-干扰素(BovIFN-γ)基因的cDNA序列进行扩增,从奶牛脾淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段。将BovIFN-γ基因克隆到大肠杆菌表达载体PGEX-6P-1谷光甘肽-S-转移酶的下游,经IPTG诱导后,表达融合蛋白;或将BovIFN-γ基因克隆到酵母高效表达载体,通过转化酵母细胞,获得阳性克隆,并大量表达基因产物;通过亲和层析纯化,大量制备表达产物,通过细胞病变抑制试验证实,表达产物有极好的抑制VSV病毒的活性。或将BovIFN-γ基因插入到pcDNA3,通过大量制备质粒DNA,以质粒DNA直接注射奶牛乳腔,使其BovIFN-γ基因在乳腺中大量表达,从而达到预防或治疗奶牛隐性乳房炎的目的。

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