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公开(公告)号:CN103074306A
公开(公告)日:2013-05-01
申请号:CN201310044271.2
申请日:2013-02-04
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus)rNDV-H52AH9,保藏号CGMCC No:6654。本发明以新城疫病毒致弱株AI4为载体,将H5和H9亚型禽流感病毒的HA基因通过口蹄疫病毒2A基因串联在一起后插入到含有AI4基因组全长的转录载体pNDV/AI4中,获得重组NDV基因组全长克隆pNDV/AI4-H52AH9。经反向遗传操作获得了重组病毒rNDV-H52AH9,该重组病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,且能同时稳定表达H5和H9亚型禽流感病毒的HA蛋白,为AI和ND的多联重组基因工程活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102776156A
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN201210240399.1
申请日:2012-07-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4及其构建方法。所述基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4,它的保藏号CGMCCNo:6149。本发明涉及应用反向遗传技术,利用含有鸽源新城疫病毒JS/07/04/Pi基因组全长的转录载体pTVT/071204,对其F基因进行致弱突变后获得转录载体ApTVT/071204,再将新城疫病毒rNDV/I4的NP、P和L基因片段替换ApTVT/071204上的对应部分,得到重组质粒ApTVT/ⅥbI4,该质粒与辅助质粒共转染BSR-T7/5细胞后成功拯救出重组病毒ⅥbI4。该病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN101182494B
公开(公告)日:2010-09-08
申请号:CN200710131863.2
申请日:2007-09-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 基因VII型新城疫病毒致弱株A-NDV-VII及其构建方法,涉及应用反向遗传技术,本发明利用已建立的鹅源新城疫病毒ZJ1株的反向遗传操作平台,将具有高繁殖性能的新城疫病毒分离株JS-5-05-Go的两个囊膜糖蛋白F和HN基因片段对ZJ1株基因组的对应部分进行替换,得到重组病毒NDV-VII,对重组病毒的F基因进行致弱突变后拯救出高度致弱的基因VII型新城疫病毒株A-NDV-VII。同时该病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN118530351A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410948000.8
申请日:2024-07-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种能够识别新型鸭呼肠孤病毒NDRV σB蛋白的单克隆抗体、制备方法及其应用。所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区;重链可变区包括如SEQ ID NO:11、12、13所示氨基酸序列的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3,轻链可变区包括如SEQ ID NO:14、15、16所示氨基酸序列的VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3;基于σB 6B9鼠单克隆抗体和σB兔多克隆抗体建立了用于σB蛋白定量的双抗夹心ELISA方法。该方法具有灵敏度高、线性范围广、成本低、操作方便、时间短等优势。该发明为NDRV亚单位疫苗的质量控制与免疫效力评价提供了新方法,也为NDRV疫苗的升级换代奠定基础。
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公开(公告)号:CN117431343A
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202311653639.5
申请日:2023-12-05
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测鹅星状病毒、小鹅瘟病毒、H5亚型禽流感病毒的引物和探针组合及其应用。所述检测鹅星状病毒、小鹅瘟病毒、H5亚型禽流感病毒的引物和探针组合包括特异性检测鹅星状病毒的上游引物SEQ ID NO.1、下游引物SEQ ID NO.2、探针SEQ ID NO.3;特异性检测小鹅瘟病毒的上游引物SEQ ID NO.4、下游引物SEQ ID NO.5、探针SEQ ID NO.6;特异性检测H5亚型禽流感病毒的上游引物SEQ ID NO.7、下游引物SEQ ID NO.8、探针SEQ ID NO.9。本发明的引物和探针组合可用于同步检测鹅星状病毒、小鹅瘟病毒、H5亚型禽流感病毒,结合荧光定量PCR技术,检测结果特异性好、灵敏度高、病毒载量检测结果准确。只需提取一次核酸即可检测3种鹅的常见感染病毒,使整个检测过程更加快速、高效。
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公开(公告)号:CN114574452B
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202111649942.9
申请日:2021-12-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开一种HN基因易位构建重组新城疫疫苗候选株VII‑HNF的方法及用途,利用已建立的基因VII型新城疫病毒致弱株AI4的反向遗传操作平台,将AI4基因组全长转录载体pNDV/AI4中的HN基因易位至F基因之前,得到F和HN基因易位编辑的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pNDV/rAI4‑HNF。经转染获得的重组病毒VII‑HNF在鸡胚上具有较高的繁殖滴度且毒力弱,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN112326963A
公开(公告)日:2021-02-05
申请号:CN202011236849.0
申请日:2020-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , C07K14/11 , C07K1/22 , C12N15/44 , C12N15/85
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及A型流感病毒PB2cap蛋白的真核表达及其应用。本发明公开了真核表达的A型流感病毒PB2cap蛋白在检测A型流感病毒RNA帽结合活性中的应用。本发明构建了基于真核表达载体pCAGGS的真核表达质粒pCAGGS‑PB2cap(aa:318‑483),并经瞬时转染将PB2cap进行真核表达,通过该表达蛋白与m7GTP在体外的结合能力来评估流感病毒的RNA帽结合活性,可为A型流感病毒PB2蛋白功能的差异研究提供新的检测指标。
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公开(公告)号:CN106498092B
公开(公告)日:2019-05-07
申请号:CN201610960388.9
申请日:2016-10-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生命科学与生物技术领域,涉及一种联合检测H5亚型禽流感病毒与新城疫强毒的一步法实时荧光定量PCR的试剂盒。该试剂盒包括引物、探针、及PCR试剂,所述引物及探针包括:(1)序列如SEQ ID NO:1‑3所示的检测H5亚型禽流感病毒的引物及探针:(2)序列如SEQ ID NO:4‑6所示的检测新城疫强毒的引物及探针。本发明所太守的试剂盒适用于H5亚型禽流感病毒和新城疫强毒的定量检测和流行病学实时监测。
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公开(公告)号:CN103525774A
公开(公告)日:2014-01-22
申请号:CN201310466147.5
申请日:2013-10-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 表达传染性喉气管炎病毒gB蛋白的重组新城疫病毒(NDV)疫苗株rAI4-gB及其构建方法,所述新城疫疫苗株rAI4-gB,它的保藏号CGMCC No:8053。其构建方法是利用已建立的基因VII型NDV致弱毒AI4株的反向遗传操作平台,将SEQ ID NO.7所示的序列插入AI4株基因组全长转录载体pNDV/AI4中,得到含有传染性喉气管炎病毒gB基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pNDV/AI4-gB。经转染获得的重组病毒rAI4-gB在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,连续传代仍能稳定表达gB蛋白,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN102776156B
公开(公告)日:2013-11-06
申请号:CN201210240399.1
申请日:2012-07-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4及其构建方法。所述基因Ⅵb亚型鸽源新城疫病毒致弱株ⅥbI4,它的保藏号CGMCCNo:6149。本发明涉及应用反向遗传技术,利用含有鸽源新城疫病毒JS/07/04/Pi基因组全长的转录载体pTVT/071204,对其F基因进行致弱突变后获得转录载体ApTVT/071204,再将新城疫病毒rNDV/I4的NP、P和L基因片段替换ApTVT/071204上的对应部分,得到重组质粒ApTVT/ⅥbI4,该质粒与辅助质粒共转染BSR-T7/5细胞后成功拯救出重组病毒ⅥbI4。该病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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