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公开(公告)号:CN102839157A
公开(公告)日:2012-12-26
申请号:CN201210374492.1
申请日:2012-09-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供一种MDCK-hST3GalIV-β1-4GalT1细胞系及其构建方法,具体涉及将编码hST3GalIV基因序列的真核表达质粒和将编码β1-4GalT1基因序列的真核表达质粒转染至MDCK细胞,最终获得能稳定表达hST3GalIV和β1-4GalT1基因的MDCK细胞系MDCK-hST3GalIV-β1-4GalT1,该细胞系可用于禽流感病毒疫苗株的大规模细胞化培养和生产。
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公开(公告)号:CN102559607A
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201210000685.0
申请日:2012-01-04
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术和免疫学技术,公开了一株新城疫病毒弱毒株NDV/LX及它的全基因组序列。所述新城疫病毒弱毒疫苗株NDV/LX的保藏号为CGMCC NO:3843;全基因组序列如SEQIDNO.37所示。研究表明,NDV/LX具有良好的免疫原性,能在呼吸道和消化道很好的复制,诱导产生高滴度的特异抗体和粘膜免疫应答。以常用疫苗株LaSota和QV4为对照,系统研究了NDV/LX株感染SPF鸡后在呼吸道和肠道的分布、全身体液免疫和局部粘膜免疫以及免疫鸡对流行强毒的保护效力。
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公开(公告)号:CN102533676A
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201210000697.3
申请日:2012-01-04
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种表达基因VII型F和HN重组新城疫弱毒疫苗A-NDV-LX/I4,它的保藏号是CGMCCNO:3844。本发明构建的致弱病毒A-NDV-LX/I4免疫试验鸡两周后,鸡血清HI的平均效价为27;LaSota免疫组攻毒4天后,SPF鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为10%和30%;商品鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为40%和20%;V4免疫组攻毒4天后,SPF鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为30%和10%;商品鸡喉气管和泄殖腔的棉拭样品的病毒分离率分别为30%和20%,与常规疫苗相比,本发明重组弱毒疫苗能够提供更加坚实的免疫保护效率。
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公开(公告)号:CN114990078B
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202210754217.6
申请日:2022-06-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途。基于已建立的基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株反向遗传操作系统,将His标签(6×His)与I4基因组全长转录载体pNDVI4中的HN基因融合,成功构建带有His标签的重组新城疫病毒基因组全长cDNA感染性克隆pNDVI4‑HN‑His。经转染得到重组新城疫病毒rNDVI4‑HN‑His,可通过标签蛋白抗体用于重组病毒HN蛋白的纯化及其与宿主蛋白互作研究。
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公开(公告)号:CN112326963B
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN202011236849.0
申请日:2020-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , C07K14/11 , C07K1/22 , C12N15/44 , C12N15/85
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及A型流感病毒PB2cap蛋白的真核表达及其应用。本发明公开了真核表达的A型流感病毒PB2cap蛋白在检测A型流感病毒RNA帽结合活性中的应用。本发明构建了基于真核表达载体pCAGGS的真核表达质粒pCAGGS‑PB2cap(aa:318‑483),并经瞬时转染将PB2cap进行真核表达,通过该表达蛋白与m7GTP在体外的结合能力来评估流感病毒的RNA帽结合活性,可为A型流感病毒PB2蛋白功能的差异研究提供新的检测指标。
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公开(公告)号:CN116355904A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310147990.0
申请日:2023-02-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , A61K9/127 , A61K47/28 , A61K47/24 , A61K31/7105 , A61P31/16 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种广谱抗流感病毒的长链非编码RNA(LncRNA#61)及其应用。LncRNA#61显著抑制各亚型流感病毒的复制,包括人源H1N1病毒以及各种高致病性和低致病性的禽流感病毒。本发明构建了基于脂质纳米颗粒体内递送LncRNA#61的lncRNA脂质纳米颗粒,基于该lncRNA脂质纳米颗粒递送的LncRNA#61发挥了良好的体内抗病毒效果。此外,解析了LncRNA#61的抗病毒机制,鉴定了其抗病毒关键功能区,发现其通过降低病毒聚合酶活性和抑制聚合酶蛋白核聚集发挥抗病毒作用。
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公开(公告)号:CN116286884A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310147988.3
申请日:2023-02-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/44 , C12N15/866 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了HA蛋白糖基化修饰模式改变的重组禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用。构建了三种表达不同糖基化修饰模式的H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白,然后基于前期构建的表达NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒,将分别表达HA、NA和M1蛋白的重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞,收获在细胞内自行组装的HA蛋白上包含不同修饰模式的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。制备的病毒样颗粒疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体。其中,当VLP疫苗HA蛋白的第38、133和158位同时发生糖基化修饰时效果最佳:显著增加抗原产量、显著提升VLP疫苗诱导的体液免疫、显著减轻SPF鸡的排毒和肺损伤。
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公开(公告)号:CN113024666B
公开(公告)日:2022-05-10
申请号:CN202110331083.2
申请日:2021-03-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了2株具有广谱性识别A型流感病毒NP蛋白的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体分别命名为3D4(CCTCCNO:C202177)、4B9(CCTCCNO:C202176),3D4的重链及轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.3所示,4B9重链及轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.3所示。本发明公开的2株单克隆抗体分别针对NP蛋白的不同抗原表位,除了均能够与H1~H11等不同HA亚型的禽流感病毒发生反应,还均能够结合H1和H3亚型的猪流感与人流感病毒,在识别不同亚型、不同宿主来源的A型流感病毒中均呈现良好的广谱性。
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公开(公告)号:CN107384875A
公开(公告)日:2017-11-24
申请号:CN201710780038.9
申请日:2017-09-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N7/00 , C12N15/85 , C12N2760/16122 , C12N2760/18121
Abstract: 本发明涉及克服雏鸡新城疫母源抗体影响的嵌合新城疫病毒载体H7活疫苗候选株及其构建方法,所述新城疫疫苗株,它的保藏号CGMCC No.13798。其构建方法是利用能够在新城疫抗体存在下高效复制的嵌合病毒rAI4-TFHN的反向遗传操作平台,将禽流感H7N9亚型毒株的HA序列插入AI4-T4FHN株基因组全长转录载体中,得到含有禽流感病毒H7N9亚型HA基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pNDV/rAI4-T4FHN-H7。经转染获得的重组病毒AI4-T4FHN-H7在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,连续传代仍能稳定表达HA蛋白,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN107254450A
公开(公告)日:2017-10-17
申请号:CN201710596136.7
申请日:2017-07-20
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N7/00 , C12N15/85 , C12N2760/18121 , C12N2760/18152
Abstract: 本发明属于应用反向遗传和基因替换技术领域,具体涉及克服鸡新城疫母源抗体影响的嵌合新城疫病毒疫苗载体候选株及其构建方法。所述的候选株是禽副黏病毒I型AI4‑T4FHN,其保藏号CGMCC No:12987。本发明利用已建立的新城疫病毒基因VII型致弱毒AI4株的反向遗传操作平台,将禽副黏病毒2型的囊膜蛋白F和HN胞外区序列对AI4株基因组的对应部分进行替换,拯救得到重组病毒AI4‑T4FHN。禽副黏病毒2型与新城疫病毒交叉反应能力很弱且对鸡不致病。故该嵌合病毒在鸡胚上具有与母本病毒相似的高繁殖能力,同时能在新城疫高母源抗体水平的鸡体内有效复制,是1株新型疫苗载体。
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