猪塞内卡病毒全长感染性克隆的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN109810976A

    公开(公告)日:2019-05-28

    申请号:CN201910110764.9

    申请日:2019-02-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及猪塞内卡病毒全长感染性克隆的制备方法及应用,包括如下步骤:(1)SVV/GD05株基因组全序列的扩增;(2)pSVV-GD05病毒感染性克隆质粒的构建;(3)pSVV-GD05-iLOV重组质粒的构建;(4)亲本病毒(SVV-GD05)与重组病毒(SVV-GD05-iLOV)拯救。本发明利用一株分离自中国猪群的SVV毒株,构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pSVV-GD05,并能成功拯救出病毒。同时,将报告基因iLOV插入SVV感染性克隆病毒基因组中,成功拯救出能表达该报告基因的重组SVV病毒。本发明为深入开展SVV的基础和应用研究提供了有效的平台,具有重要的科学应用价值。

    一种检测非洲猪瘟病毒抗原胶体金免疫层析试纸及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109254155A

    公开(公告)日:2019-01-22

    申请号:CN201811112387.4

    申请日:2018-09-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测非洲猪瘟病毒抗原胶体金免疫层析试纸及制备方法和应用,属于病毒疫病诊断技术和动物检疫领域,包括PVC底板,在PVC底板上按顺序依次固定有样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水垫。其中胶体金垫内有胶体金标记的抗ASFV p30抗原的一个表位的单克隆抗体Mab1;硝酸纤维素膜表面划有检测线和质控线,检测线为针对ASFVp30抗原另一表位的单克隆抗体Mab2,质控线为羊抗小鼠IgG抗体。本发明建立的胶体金免疫层析试纸条具有方便、快速、灵敏和特异等优点,可用于感染ASFV细胞直接检测,适合ASFV感染诊断、流行病学调查和生猪国际贸易检疫检验。

    一种类弹性蛋白多肽与热应激蛋白90α融合蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN105175554A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201510700114.1

    申请日:2015-10-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术研究领域,具体涉及一种类弹性蛋白多肽与热应激蛋白90α融合蛋白及其制备方法和在传染性法氏囊病病毒浓缩与纯化中的应用。所述类弹性蛋白多肽(ELP)与热应激蛋白90α(Hsp90α)融合蛋白由ELP和Hsp90α的传染性法氏囊病病毒(IBDV)结合片段M167a组成。其制备方法包括融合表达载体的构建、融合蛋白的表达与纯化、IBDV结合片段的确定以及IBDV的浓缩与洗脱。与其他方法相比,用本发明的融合蛋白浓缩和纯化传染性法氏囊病病毒具有简单、快速和经济等优点,制备的传染性法氏囊病病毒可用于实验研究和疫苗制备。

    一种类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN104725515A

    公开(公告)日:2015-06-24

    申请号:CN201510124638.0

    申请日:2015-03-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术研究领域,具体涉及一种类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合蛋白及其制备方法和在重组腺病毒浓缩和纯化中的应用。所述类弹性蛋白多肽(ELP)与柯萨奇腺病毒受体(CAR)融合蛋白(ELP-CAR),由ELP、间隔区和CAR-D1区组成。其制备方法包括类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合表达载体的构建、融合蛋白的表达与纯化以及重组腺病毒的纯化与洗脱。与其他方法相比,用本发明的类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合蛋白浓缩和纯化重组腺病毒具有简单、快速和经济等优点,制备的重组腺病毒可以用于动物实验研究和基因工程疫苗。

    一种非洲猪瘟病毒抗体检测胶体金免疫层析试纸条制备方法

    公开(公告)号:CN103293306B

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201310197035.4

    申请日:2013-05-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及的一种非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测胶体金免疫层析试纸条制备方法属于生物工程和动物疫病诊断领域,包括ASFV重组抗原p54表达、纯化、抗体制备、胶体金免疫层试纸条制备及其检测ASFV抗体的灵敏性和特异性。与现有的其他血清学方法相比,用本发明建立的胶体金免疫层析试纸条具有方便、快速、灵敏和特异等优点,能在5分钟内获得明确的诊断结果,并能直接检测可疑猪血清(或抗凝血)的病毒抗体,特别适合现场ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪国际贸易检疫检验。

    一种检测非洲猪瘟病毒抗体的多抗原ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN103278627A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310193976.0

    申请日:2013-05-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明的一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的多抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒属于生物技术和动物传染病诊断研究领域,包括三种ASFV重组抗原表达与纯化、ASFV抗体阳性和阴性对照血清制备、最佳包被抗原组合及浓度确定、多抗原ELISA(MA-ELISA)反应参数优化、ASFV抗体阴性血清临界值确定以及MA-ELISA检测人工感染和田间血清样品的灵敏性、特异性、可重复性测定。通过大量已知血清样品检测证明,本发明的MA-ELISA检测血清ASFV抗体的灵敏性、特异性和可重复性显著高于世界动物卫生组织推荐的ELISA方法和国外同类试剂盒,可用于ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪进出口检疫检验。

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