一种猪蓝耳病重组疫苗
    32.
    发明公开

    公开(公告)号:CN105002195A

    公开(公告)日:2015-10-28

    申请号:CN201510462709.8

    申请日:2015-08-01

    Abstract: 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗,将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联,构建了融合基因ORF3-ORF5,插入真菌特异性双T-DNA安全表达载体pCB130NG中,获得一种表达载体pCB130NG-ORF3-ORF5,利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体,经鉴定为阳性的菌丝体,培养获得T1代子实体,利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体,培养至T2代,获得稳定表达猪蓝耳病病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养,离心收集菌丝,烘干或冻干后,粉碎制备猪蓝耳病重组疫苗。利用本发明生产的猪蓝耳病疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低,且可以直接通过口服饲喂动物,具有广泛的社会效益和经济效益。

    一种高频诱导大豆丛生芽的高效转基因方法

    公开(公告)号:CN102124947A

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN201010584615.5

    申请日:2010-12-13

    Abstract: 本发明一种高频诱导大豆丛生芽的高效转基因方法,将无菌苗沿着下胚轴与子叶的生长点分生组织去掉两片子叶、初生叶以及多余的下胚轴,制备外植体,采用石英砂分析纯微小颗粒,与工程农杆菌液充分混匀,在漩涡震荡仪中上剧烈涡旋震荡外植体,均匀制造伤口,浸染周期缩短,降低了共培养时间,既减轻对植物外植体的毒害作用,同时又加大了农杆菌的侵染面积,农杆菌介导的子叶节转化相比在芽诱导培养基形成更多的丛生芽(MBT)组织/芽叶枕的组织块,它们在农杆菌感染约3周后可检测到转基因的芽原基,且再生频率高,从而大大提高了大豆的遗传转化效率。

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