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公开(公告)号:CN110050942A
公开(公告)日:2019-07-26
申请号:CN201910203377.X
申请日:2019-03-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用酿酒酵母生物降解棒曲霉素的方法,涉及生物技术领域。将酿酒酵母在培养基中培养至细胞浓度约为1.1~1.3×106CFU/mL,加入棒曲霉素后静置发酵,从而进行棒曲霉素的降解,96~120h后可以完全降解4.0~5.0mg/L棒曲霉素,在上述工艺条件下,棒曲霉素刺激酿酒酵母产生的可溶性胞内酶对该降解过程起决定作用。本发明使用酿酒酵母降解棒曲霉素,具有效率高、操作简单、安全环保等优点,对控制食品中棒曲霉素污染提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN104450940B
公开(公告)日:2017-07-07
申请号:CN201410833123.3
申请日:2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测单核细胞增生李斯特氏菌的核苷酸序列及检测方法与检测试剂盒,其中核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,检测方法为首先提取待测样品的基因组DNA;然后以该基因组DNA为模板,与特异性引物Lm16、PCR缓冲液、MgCl2溶液、脱氧三磷酸核苷混合物和Taq‑DNA聚合酶混合配置PCR反应体系,进行PCR反应;最后检测PCR产物是否为大小为1623bp的单一扩增产物。试剂盒包括特异性引物、PCR缓冲液、MgCl2溶液、脱氧三磷酸核苷混合物和Taq‑DNA聚合酶。本发明提供的试剂盒能够有效地检测出食品中的单核细胞增生李斯特菌氏菌,且细菌的检测灵敏度高,特异性好,抗干扰能力强。
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公开(公告)号:CN103820404B
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201410053650.2
申请日:2014-02-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活与热稳定性同时提高的脂肪氧合酶突变体及制备方法,利用定向进化技术对鱼腥藻脂肪氧合酶分子进行定向改造,经多轮易错PCR和DNA Shuffling,获得了酶活与热稳定性同时提高的脂肪氧合酶突变体,酶活力为21420 U/mL,比野生型提高了2.17倍,其在50℃的半衰期t1/2提高了1.9倍。利用此策略可以显著提高脂肪氧合酶的酶活和热稳定性,解决了脂肪氧合酶活低和热稳定性较差的问题,为其工业化生产提供了基础。改造后的脂肪氧合酶更适用于工业生产和应用。
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公开(公告)号:CN103820404A
公开(公告)日:2014-05-28
申请号:CN201410053650.2
申请日:2014-02-18
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12N9/0069 , C12N15/1027 , C12N15/1031 , C12N15/70 , C12Y113/11012
Abstract: 本发明公开了一种酶活与热稳定性同时提高的脂肪氧合酶突变体及制备方法,利用定向进化技术对鱼腥藻脂肪氧合酶分子进行定向改造,经多轮易错PCR和DNAShuffling,获得了酶活与热稳定性同时提高的脂肪氧合酶突变体,酶活力为21420U/mL,比野生型提高了2.17倍,其在50℃的半衰期t1/2提高了1.9倍。利用此策略可以显著提高脂肪氧合酶的酶活和热稳定性,解决了脂肪氧合酶活低和热稳定性较差的问题,为其工业化生产提供了基础。改造后的脂肪氧合酶更适用于工业生产和应用。
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公开(公告)号:CN103610213A
公开(公告)日:2014-03-05
申请号:CN201310610685.7
申请日:2013-11-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: A23L3/3571
CPC classification number: A23L3/3571 , A23Y2220/03
Abstract: 本发明涉及食品级嗜酸乳杆菌发酵产天然防腐剂的制备方法及产品,属于食品生物技术领域。将番茄汁、啤酒、脱脂乳、纯净水按照5~10:15~25:5~20:65~80的比例配制成发酵培养基,121℃灭菌7min,即为发酵培养基。嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)NX2-6种子培养基扩大培养后,2~4%接种,37℃静置培养36h,发酵液离心收集上清液,-20℃预冻24h后真空冷冻干燥,获得天然生物防腐剂。该产物对食品中主要致病菌和腐败菌,均有显著抑制作用。该天然防腐剂抑菌谱广、安全性高,因此可用于食品、医药、饲料等行业。
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公开(公告)号:CN103300083A
公开(公告)日:2013-09-18
申请号:CN201310180887.2
申请日:2013-05-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及利用重组脂肪氧合酶提高面包焙烤特性的方法,属于食品加工技术领域。该方法包括如下步骤:将重组脂肪氧合酶以10‐50U/g面粉的比例添加到小麦粉中;小麦粉、酵母粉、糖、水加入到搅拌机中进行搅拌,加入食盐搅拌至面团可拉伸成均匀的薄膜;将得到的面团依次进行预发酵、分割称重、成型、二次发酵;焙烤得到成品。本发明的重组脂肪氧合酶能有效提高面团的操作性能,强化面筋网络,显著改善面包的比容、硬度、质地、面包芯颜色等烘焙品质,可成为替代溴酸钾的新型生物面粉品质改良剂。同时,提高面食制品的安全性。
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公开(公告)号:CN102094054B
公开(公告)日:2013-04-10
申请号:CN201010576515.8
申请日:2010-12-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种枯草芽孢杆菌抗菌脂肽的生产方法及其在仔猪饲料中的应用,属于饲料添加剂和生物技术领域。枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)fmbJ种子培养基扩大培养后,2~5%接种,28~35℃,5000L发酵罐液体深层发酵30~48h,然后提取,喷雾干燥生产抗菌脂肽产品。这种抗菌脂肽按照4000IU/kg添加至仔猪基础日料中,提高了饲料利用率,并对促进仔猪生长发育、预防仔猪腹泻和提高仔猪免疫力均有较好的效果。本发明菌株枯草芽孢杆菌为安全的微生物,其抗菌产物安全性高。另外与目前仔猪饲料中使用的黄霉素相比,具有更好的效果,对取代饲料抗生素添加和保障食品安全具有重要意义。
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公开(公告)号:CN102559622A
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201210027230.8
申请日:2012-02-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于食品工业生物技术领域,涉及一种利用枯草杆菌高效生产重组脂肪氧合酶的方法。该方法包括如下步骤:(1)构建鱼腥藻脂肪氧合酶重组枯草杆菌基因工程菌;(2)将所述的鱼腥藻脂肪氧合酶重组枯草杆菌基因工程菌接种于装液量为58-63mL/250mL的加入15-18g/L乳糖的LB培养基中,27-30℃、180rpm条件下培养85-90h,离心收集上清液。在该最佳条件下,重组脂肪氧合酶活达到167.32U/mL,为其大规模的生产提供一定的指导。
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公开(公告)号:CN102533838A
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201210027253.9
申请日:2012-02-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于食品工业生物技术领域,涉及一种高效分泌表达重组脂肪氧合酶的枯草杆菌表达载体及其应用。本发明以枯草杆菌载体pHB201骨架,先通过酶切方法改造pHB201酶切位点,获得pHB-hc载体,在此计基础上通过PCR的方法枯草杆菌168基因组中克隆获得组成型强启动子P43,组成型启动子PamyE,Sec途径的分子伴侣PrsA以及中性蛋白酶信号肽SnprB,构建获得了枯草杆菌分泌型表达载体pHBSR。将从鱼腥藻基因组DNA中扩增获得脂肪氧合酶基因,插入到自主构建的表达载体pHBSR后,电转化如枯草杆菌宿主WB800,实现了重组脂肪氧合酶的分泌表达,发酵液中最大酶活达到76U/ml。
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