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公开(公告)号：CN109097316A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201811024408.7
申请日：2018-09-04
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明通过过表达degU基因提高抗真菌肽bacillomycin D产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以CGMCC No.0943枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株，以大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭克隆载体pMAD为骨架构建一个基因过表达载体pCBS-LPDegUR，利用同源重组原理，通过双交换过程在淀粉酶位点敲入枯草芽孢杆菌fmbJ基因组DegU基因的方法构建了一株高产bacillomycin D菌株fmbJdegU。经过高效液相色谱分析，确定过表达DegU基因的菌株产bacillomycin D的能力大幅度提高。
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公开(公告)号：CN104046625B
公开(公告)日：2017-10-27
申请号：CN201410236055.2
申请日：2014-05-29
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明属于食品安全检测技术领域，提供一种检测海德尔堡沙门氏菌的PCR引物对、特异性靶基因、利用该引物对和靶基因进行检测的方法以及该引物对和特异性靶基因的应用。本发明提供的PCR引物对是根据海德尔堡沙门氏菌特异性靶基因设计而成，该靶基因稳定高、特异性强，经合理优化PCR反应体系，凝胶电泳检测手段，可快速、准确地鉴定出海德尔堡沙门氏菌。本发明检测方法步骤如下(1)提取样品DNA，PCR扩增(2)凝胶电泳检测扩增产物(3)比较电泳后条带，如在788bp位置有条带，则证明样品中含有海德尔堡沙门氏菌。通过实验比较分析，本方法具有单一性强，检测结果可靠，结果判定简单的特点，可广泛应用于食品卫生领域。
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公开(公告)号：CN106754768A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611019626.2
申请日：2016-11-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体及其构建方法，其中脂肪氧合酶突变体具有如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6中任一种所示的氨基酸序列；构建方法为首先确定鱼腥藻脂肪氧合酶突变位点，然后以重组质粒为模板，在突变位点处利用NNK代替原有密码子设计简并引物，进行全质粒PCR反应，构建3个定点饱和突变库，然后通过转化大肠杆菌和抗性筛选得到3个饱和突变库；最后对3个饱和突变库进行抗性筛选和诱导突变，通过进一步纯化得到纯的脂肪氧合酶突变体。本发明的脂肪氧合酶突变体的热稳定性获得了提高，具有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。
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![一种新型抗菌脂肽[△C1]Plipastatin及其产生菌和应用](/CN/2016/1/1/images/201610009626.jpg)
公开(公告)号：CN105505847A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610009626.8
申请日：2016-01-07
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C07K14/32 , C12N15/75 , C12N2800/101
Abstract: 本发明公开了一种新型抗菌脂肽[△C1]Plipastatin及其产生菌和应用。本发明利用枯草芽孢杆菌PB2-LC1生产的抗菌物质[△C1]Plipastatin：来自枯草芽孢杆菌(B.subtilis)PB2-LC1，是一系列线性抗菌脂肽类化合物的总称，共有7种组分，经过LC-FTICR-MS鉴定分子量，分别为：980、994、1008、1022、1036、1050和1064Da。该抗菌脂肽类化合物对大肠杆菌、藤黄微球菌、点青霉和桃软腐病菌都有抑制作用，能够防治多种植物病害。
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公开(公告)号：CN103409457B
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201310197112.6
申请日：2013-05-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型枯草杆菌表达系统及产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌。一种新型枯草杆菌表达系统，包括基因工程菌株BS-T710与表达载体pBT-23a。一株产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌BS-T710-gadB，是将来基因gadB插入至所述的表达载体pBT-23a，获得重组表达载体pBT-23a-gad，利用化学转化法，将pBT-23a-gad转化入所述的基因工程菌株BS-T710，获得所述的产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌BS-T710-gadB。该系统可用于高效表达外源基因，并且只需使用一种诱导物。重组工程菌BS‐T710‐gadB细胞，能够将MSG高效地转化为γ‐GABA。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103610213B
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201310610685.7
申请日：2013-11-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: A23L3/3571
Abstract: 本发明涉及食品级嗜酸乳杆菌发酵产天然防腐剂的制备方法及产品，属于食品生物技术领域。将番茄汁、啤酒、脱脂乳、纯净水按照5~10:15~25:5~20:65~80的比例配制成发酵培养基，121℃灭菌7min，即为发酵培养基。嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus) NX2-6种子培养基扩大培养后，2~4%接种，37℃静置培养36h，发酵液离心收集上清液，-20℃预冻24h后真空冷冻干燥，获得天然生物防腐剂。该产物对食品中主要致病菌和腐败菌，均有显著抑制作用。该天然防腐剂抑菌谱广、安全性高，因此可用于食品、医药、饲料等行业。
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公开(公告)号：CN104672919A
公开(公告)日：2015-06-03
申请号：CN201510066436.5
申请日：2015-02-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于食品工业生物技术领域，涉及一种利用热稳定性重组漆酶制备乳清蛋白膜的方法。该乳清蛋白膜是通过在纯水中加入乳清蛋白、甘油、重组热稳定性漆酶及阿魏酸形成成膜液，超声脱气后，在80～90℃水浴加热15～25min，50-55℃干燥36-48h制得。本发明以乳清蛋白为基料，以甘油为增塑剂，通过添加重组热稳定性的漆酶作为交联剂所制备的乳清蛋白膜绿色可食用，拉伸强度、透光性、吸水度、可塑性均表现出良好的性质。
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公开(公告)号：CN104591407A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510026991.5
申请日：2015-01-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C02F3/34 , C12N9/02 , C12N15/70 , C12R1/385 , C02F101/38
CPC classification number: C02F3/342 , C02F2101/308 , C02F2301/00 , C12N9/0004
Abstract: 本发明公开了一种利用重组脂肪氧合酶降解三苯甲烷类染料的方法。重组脂肪氧合酶rLOX-27853在降解三苯甲烷类染料中的应用，所述的重组脂肪氧合酶rLOX-27853氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种利用重组脂肪氧合酶rLOX-27853降解三苯甲烷类染料的方法，向含有亚油酸钠和三苯甲烷类染料的介质中加入所述的重组脂肪氧合酶rLOX-27853对其进行降解。本发明人从铜绿假单胞菌ATCC27853菌株基因组中，克隆获得一种新型的原核脂肪氧合酶基因LOX‐27853，并利用发酵培养的方法实现了在大肠杆菌表达宿主菌的异源高效表达，可高效地催化三苯甲烷类染料苯胺蓝、孔雀石绿、亮绿的降解。
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公开(公告)号：CN104561295A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410835984.5
申请日：2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/689
Abstract: 本发明公开了一种检测阪崎克罗诺杆菌目的核苷酸序列及检测试剂盒与检测方法，其中目的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，试剂盒包括：PCR buffer，MgCl2溶液，dNTP，CS21-L引物，CS21-R引物和TaqDNA聚合酶；检测方法为首先提取待测样品的基因组DNA，然后以提取的基因组DNA为模板，以CS21-L和CS21-R引物对CS21进行PCR反应，最后检测PCR产物中是否存在大小为152bp的单一扩增产物。该方法具有检测时间短，抗干扰能力强，成本低，特异性好，灵敏度高的优点，对我国的食品安全具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103351471B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201310295626.5
申请日：2013-07-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于食品工业生物技术领域，涉及一种乳清蛋白膜及其制备方法。该乳清蛋白膜是通过在纯水中加入乳清蛋白、甘油制得成膜液，成膜液于45-50℃水浴加热0.5-2h，冷却至室温后，加入重组脂肪氧合酶及亚油酸，超声脱气后,倒入铺有塑封膜的玻璃培养皿中，室温（20-25℃）反应2-3h，50-55℃干燥36-48h揭膜。本发明以乳清蛋白为基料，以甘油为增塑剂，通过添加重组鱼腥藻脂肪氧合酶作为交联剂所制备的乳清蛋白膜，绿色可食用，拉伸强度、透光性、吸水度、可塑性均表现出良好的性质。
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