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公开(公告)号：CN113956337B
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202111131982.4
申请日：2021-09-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了基因FoUPE3在防治香蕉枯萎病中的应用。本发明通过敲除并回补基因FoUPE3，获得了Foc4敲除突变体△FoUPE3和回补突变体△FoUPE3‑com。致病性测定表明，敲除突变体△FoUPE3的致病性显著降低，回补突变体△FoUPE3‑com的致病性则恢复到Foc4野生型水平。此外，敲除突变体△FoUPE3中5个镰刀菌酸合成关键基因的表达量显著下降，表明敲除FoUPE3基因影响了Foc4中镰刀菌酸的合成。本发明不仅有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，还为开发香蕉枯萎病菌的有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN114773440A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210542266.3
申请日：2022-05-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种蛋白FoUpe2在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入Foc4原生质体；利用同源重组方法将该基因从Foc4中敲除，获得敲除突变体ΔFoUpe2；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoUpe2原生质体；利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体ΔFoUpe2‑com。与Foc4相比，ΔFoUpe2对SDS胁迫的敏感性显著升高；致病性试验表明，FoUpe2的缺失使Foc4的致病力显著升高；将该基因回补后，其致病力得到恢复。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN113278055B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110556363.3
申请日：2021-05-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种分泌蛋白MoUPE2在调控稻瘟菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入稻瘟菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从稻瘟菌中敲除，获得敲除突变体ΔMoupe2；试验证明，相比稻瘟菌野生型，敲除突变体ΔMoupe2的分生孢子萌发和附着胞发育减缓，对细胞壁胁迫和渗透胁迫等更加敏感；致病性试验表明，MoUPE2的缺失显著降低了稻瘟菌的致病力；将该基因回补后，其致病力则恢复到野生型水平。本发明证实MoUPE2是稻瘟菌分生孢子萌发、附着胞发育，以及致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明稻瘟菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN109536432B
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN201811162769.8
申请日：2018-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法，包括以下步骤：S1.稻瘟菌分生孢子的培养：将稻瘟菌菌丝接种至PDA培养基中进行培养；向培养基中加入无菌水，捣碎菌丝，转至西红柿燕麦培养基中，涂抹均匀，28℃下光照培养2～4d；将培养基表面菌丝打断，再加入无菌水，洗去培养基表面菌丝，28℃下光照培养2～4d进行产孢；加入无菌水进行冲洗，收集分生孢子，过滤后得到浓缩的稻瘟菌分生孢子悬浮液；S2.采用超滤法制备稻瘟菌分生孢子分泌蛋白。本发明通过优化稻瘟菌分生孢子的培养和分泌蛋白的诱导提取步骤，避免了复杂的样品前处理过程；并应用shotgun技术，高通量分析鉴定了稻瘟菌分泌蛋白；本发明对于探究稻瘟菌的致病机理有重要意义。
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公开(公告)号：CN112094852B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202010935214.3
申请日：2018-09-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了MODIP基因在调控稻瘟菌生长发育与产孢中的应用。稻瘟菌MODIP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第127‑2547位所示，编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。稻瘟菌MODIP基因可用于调控稻瘟菌菌丝生长、分生孢子的产生以及对水稻的致病性。实验证明，稻瘟菌MODIP基因被潮霉素磷酸转移酶基因(hph)和荧光蛋白基因(SGFP)置换后，所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌丝生长速度和产孢量明显低于于野生型稻瘟菌；致病性实验表明，稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑；MODIP基因的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的MODIP基因及其应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111560384B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202010322384.4
申请日：2020-04-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoRnt在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFoRnt；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFoRnt原生质体，获得回补突变体ΔFoRnt‑com。试验证明，ΔFoRnt在孢子形态、菌丝形态、抗高渗透、氧化胁迫等方面与野生型相比没有显著性差异；但FoRnt的缺失导致了其致病力的显著降低；本发明证实FoRnt是香蕉枯萎病菌致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN114196681A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111086213.7
申请日：2021-09-16
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种FoCupin1基因在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体，获得敲除突变体ΔFoCupin1。该突变体与野生型相比，菌落生长速率、产孢量、细胞壁完整性、抗高渗透胁迫、抗氧化胁迫、玻璃纸穿透等方面没有显著差异。致病性测定表明，FoCupin1基因的缺失导致香蕉枯萎病菌致病性显著降低；将该基因回补后，其致病性则恢复到野生型水平。qRT‑PCR分析表明，敲除突变体中镰刀菌酸5个关键合成基因中有4个基因表达量与野生型相比显著降低。本发明有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN110183521B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201910433251.1
申请日：2019-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种稻瘟菌基因MoRMD1在调控稻瘟菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入稻瘟菌原生质体；利用同源重组方法将该基因MoRMD1从稻瘟菌中敲除，获得敲除突变体ΔMoRMD1；所得到的稻瘟菌敲除突变体在附着胞形成方面存在缺陷，并且MoRMD1对维持细胞壁的完整性有重要作用。致病性试验表明，MoRMD1的缺失显著降低了稻瘟菌的毒力，在水稻叶片上不能形成明显病斑。本发明证实MoRMD1是稻瘟菌附着胞形成、维持细胞壁完整性和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明稻瘟菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN110184199B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201910433431.X
申请日：2019-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种香蕉枯萎病菌1号小种原生质体的制备与再生方法。该方法包括Foc1分生孢子悬浮液的制备、Foc1菌丝体的收集、菌丝体细胞壁的酶解、Foc1原生质体的收集、Foc1原生质体的再生等步骤。本发明通过所述方法酶解菌丝细胞，所获原生质体的制备数最高达到6.0×108个/mL，所得原生质体大小均一，形态饱满，近似圆形。本发明采用含有200g/L葡萄糖的CM固体培养基作为再生培养基，提高了Foc1原生质体的再生率，最高为28.6％，明显高于现有的香蕉枯萎病菌原生质体的再生方法，为后续原生质体转化技术研究香蕉病菌致病分子机制提供了良好的基础。本发明方法制备过程简单、高效，便于操作。
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公开(公告)号：CN110669773B
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201910986131.4
申请日：2019-10-17
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoPDCD5在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFopdcd5；通过构建基因回补载体，将其导入ΔFopdcd5原生质体；利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中，获得回补突变体ΔFopdcd5‑com。致病性测定表明，敲除突变体ΔFopdcd5的致病性显著降低；回补突变体ΔFopdcd5‑com的致病性则恢复到野生型水平。本发明证实FoPDCD5是香蕉枯萎病菌分生孢子产生、应对氧化胁迫和致病性所必需的。有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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