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公开(公告)号：CN115420890B
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202210990020.2
申请日：2022-08-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/533 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明属于荧光微球编码技术领域，具体涉及一种功能化的荧光蛋白多色编码微球的制备方法。以荧光蛋白代替有机荧光染料和纳米材料，通过化学偶联将荧光蛋白组装到微球表面，以蛋白质类型、浓度及微球粒径为编码元素，获得超大编码容量的单色和多色荧光微球；荧光微球表面通过生物素修饰将链霉亲和素固定到微球表面，结合生物素标记捕获探针实现多靶标分子高通量的快速分析。本发明制备工艺简洁，编码容量大，性能稳定，且通用性强，对环境友好。本发明的微球可应用于疾病诊断、食品安全、环保、蛋白质组学、基因组学和药物筛选等方面。
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公开(公告)号：CN118406623A
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202410563562.0
申请日：2024-05-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了Mce4D基因作为关键毒力因子在调控牛分枝杆菌毒力中的应用，所述Mce4D基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过牛分枝杆菌卡介苗随机插入突变体库筛选并获得到了一株突变株，通过鉴定，证实发生突变的基因为Mce4D基因，对该突变株的毒力表型进行鉴定，发现突变株的侵袭能力、胞内存活能力和耐环境压力能力相比野生株显著降低，由此推断Mce4D基因在调控牛分枝杆菌毒力方面发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN117777268A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202311682845.9
申请日：2023-12-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P31/04 , A61P31/06
Abstract: 本发明公布了一种基于CRISPR‑Cas9基因编辑技术的牛rbmx2基因敲除细胞系的构建方法，本发明采用CRISPR‑Cas9技术敲除EBL细胞中的rbmx2基因序列，建立rbmx2基因敲除的EBL细胞系，证实rbmx2基因是牛分枝杆菌感染依赖因子，确定rbmx2基因敲除的EBL细胞系能抵抗牛分枝杆菌感染，可用于在人畜抵抗牛分枝杆菌感染中的功能验证。
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公开(公告)号：CN114752594B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202210549786.7
申请日：2022-05-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/689 , C12Q1/6893 , C12Q1/6851 , C12R1/42 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开一种多重实时荧光定量PCR引物和探针组合，它由两组分别针对沙门氏菌InvA基因、隐孢子虫18SrRNA基因设计的引物和探针组成，本发明还公开了含有该引物和探针组合的试剂盒以及检测方法。本发明实现了沙门氏菌和隐孢子虫的双重实时荧光定量PCR检测，此方法快速、准确、特异性和灵敏性高，可以同时实现对沙门氏菌和隐孢子虫的定性和准确定量检测。
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公开(公告)号：CN117683142A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311665648.6
申请日：2023-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了融合蛋白LSDV090‑133及其在检测牛结节性皮肤病病毒（LSDV）感染抗体和鉴别疫苗免疫抗体中的应用。本发明利用噬菌体展示文库筛选针对牛结节性皮肤病病毒感染血清和山羊痘弱毒疫苗免疫血清的特异性多肽，经生物信息学分析，选取牛结节性皮肤病病毒感染血清特有的3条多肽，通过柔性肽串联至pET28a载体，送公司进行基因合成，原核表达得到LSDV090‑133融合蛋白，分子量约为20 kDa。经验证，该蛋白与LSDV感染牛阳性血清有很强的反应原性，其灰度值明显强于与山羊痘弱毒疫苗免疫60dpi后的免疫血清，是一种潜在的鉴别诊断新靶标，能用于鉴别诊断LSDV感染和山羊痘弱毒疫苗免疫的抗体反应，为牛结节性皮肤病的血清学诊断和防控提供参考工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114657273B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202210484565.6
申请日：2022-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测多种牛乳腺炎病原的引物对和探针组合，所述引物对和探针分别针对金黄色葡萄球菌rpoB基因、链球菌tuf基因、牛支原体oppD/F基因、产色葡萄球菌sodA基因、大肠杆菌79号基因，序列如SEQ ID NO:1‑15所示。本发明公开的引物对和探针组合能够对临床奶样或其它样本中的金黄色葡萄球菌、链球菌(无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌)、牛支原体、产色葡萄球菌、大肠杆菌同时进行检测，不仅能提高检测效率，而且还具有较高的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN116947981A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310837378.6
申请日：2023-07-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/065 , C12N15/39 , C12N5/20 , C07K16/08 , C12N15/70 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种LSDV和GTPV的通用型诊断抗原及其单克隆抗体，该抗原编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还公开了一种利用该抗原和单克隆抗体建立的牛结节性皮肤病诊断试剂盒，属于免疫学领域。本发明的抗原是经蛋白免疫印迹试验结合质谱测序从LSDV基因组中筛选到的一种通用型诊断靶标，具有免疫原性，利用其制备的单克隆抗体可实现对山羊痘病毒属的LSDV和GTPV感染或免疫血清抗体检测，具有灵敏性和特异性高，检测快速便捷等优点。本发明为LSDV的血清学检测和疫苗免疫评价提供了高价值工具。
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公开(公告)号：CN114891832B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202210587879.9
申请日：2022-05-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/12 , C12N7/01 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了过表达牛TUSC5a和TUSC5b基因重组慢病毒的构建方法及其应用，过表达重组慢病毒作为具有侵染性的工具或作为人工制剂可调控脂肪沉积，TUSC5a的表达显著促进脂肪合成与积累，TUSC5b的表达显著抑制脂肪合成与积累。其构建方法包括(1)TUSC5a、TUSC5b序列克隆的步骤；(2)使用内切酶将携带HIS标签的TUSC5a和TUSC5b序列分别与慢病毒载体双酶切，胶回收后产物经连接酶连接，得到过表达重组慢病毒的步骤；(3)过表达重组慢病毒验证的步骤；(4)过表达重组慢病毒包装的步骤。本发明对正确认识TUSC5对脂肪沉积的调控网络深入到剪接异构体水平，包装好的两种TUSC5剪接异构体慢病毒可作为人工调控肉牛脂肪沉积能力的工具，实现对脂肪沉积能力的剂量调控。
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公开(公告)号：CN111996140B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202010824185.3
申请日：2020-08-17
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于农业微生物应用技术领域，涉及水牛瘤胃源解淀粉芽胞杆菌的筛选及其应用。本发明与饲料添加剂制剂制备领域和反刍动物瘤胃消化开发利用领域相关。涉及一种对饲料中纤维素有降解作用的解淀粉芽胞杆菌的菌株分离鉴定、安全性评定及对青贮饲料纤维降解能力的鉴定以及作为促进饲料青贮发酵添加剂的开发和应用。本发明的菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SN‑C菌株，保藏编号为CCTCC NO：M2020137。所述菌株具有生长速度快，能显著提高玉米青贮饲料中纤维素降解率，与对照组相比能降低3.10％的纤维素和1.75％半纤维素含量，抗逆性强,安全，可制备促进青贮发酵添加剂。
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公开(公告)号：CN111996139B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202010823853.0
申请日：2020-08-17
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于农业微生物应用技术领域。具体涉及一种提高肉犊牛生产效益的复合微生态制剂及应用。本发明与兽用微生物添加剂领域相关。分离得到一株可降解反刍动物粗饲料中纤维素和木质素活性强的副地衣芽胞杆菌SN‑6菌株(保藏号为CCTCC NO：M2020136)和另一株降解纤维素、淀粉、蛋白质活性强的解淀粉芽胞杆菌SN‑C(保藏号为CCTCC NO：M2020137)菌株。这两株菌株具有生长速度快、抗逆性强和安全性高的特点，将两株菌复合制成的微生态制剂能极显著促进肉牛生长，可作为畜禽饲用微生态添加剂。
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