-
公开(公告)号：CN104885938A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510271876.4
申请日：2015-05-25
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明具体提供一种快速获得日本结缕草组培苗的方法，包括如下步骤：1)灭菌种子浸种3天；2)浸种后的种子吹干，以水培养至萌发出1-2mm的芽；3)萌芽后的种子接种到固体MS培养基上，培养至幼苗地上部高3cm，此时幼苗叶鞘底部出现表面粗糙的节点；4)剥去种皮，去除节点上方的茎叶，将余下的植株以ZJ-SM培养基培养至茎端长出芽；5)去除茎端长出的芽，放回ZJ-SM培养基上继续培养至根端长出芽；6)将根端长出的芽切下放到固体1/2MS培养基上培养至长出根，得到完整的植株；7)将完整的植株炼苗后移植，得到组培苗。相比于愈伤组织再生体系的方法，本发明将4个月缩到了50天，大大缩短了日本结缕草的繁殖周期。
-
公开(公告)号：CN102776231A
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201110119725.9
申请日：2011-05-10
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/84
Abstract: 本发明提供了一种农杆菌介导的日本结缕草遗传转化方法，其是用悬浮于AAM-AS培养基中的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染日本结缕草的愈伤组织，将侵染后的愈伤组织置于N6D2-AS培养基中共培养2-3天，最后洗去根癌农杆菌，筛选并培养愈伤组织。本发明针对农杆菌介导日本结缕草遗传转化体系影响转化效率的三大重要影响因子，摸索出最佳菌液浓度(OD600值为0.3-0.4)，侵染时间(1.5-2h)及共培养时间(2-3天)。结合培养基的改良，最终转化效率达到50％以上；另外，本发明通过改进农杆菌清洗方法，使在筛选培养的过程中排除了农杆菌的污染，与以往的农杆菌介导转化方法相比，大大减少了工作量，节约了成本，避免了愈伤材料的浪费。
-
公开(公告)号：CN102668830A
公开(公告)日：2012-09-19
申请号：CN201110061502.1
申请日：2011-03-15
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01G1/00
Abstract: 本发明公开了一种天然草与人造草混合系统草坪建植方法，包括如下步骤：1)在坪床上铺设草坪坪床加固网，将其边缘固定于坪床上；2)将基质均匀铺设于所述的草坪坪床加固网上；3)将所述的草坪坪床加固网的丝簇从覆盖的基质中耙出，使丝簇竖立起来，再次将基质压实；4)将天然草种按照标准播种量进行均匀播种。根据本发明提供的方法构建草皮结合了天然草坪与人造草坪的优点，可以提高运动场草坪的使用寿命以及增强稳定性、排水性、耐磨损等作用，从而降低运动场草坪养护成本以及保护运动员安全。
-
公开(公告)号：CN101381723B
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN200810000775.3
申请日：2008-01-16
Abstract: 本发明涉及结缕草中胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆和功能鉴定，其主要步骤包括：以结缕草为植物材料，提取植物总DNA，利用生物软件设计一对特异引物，经过PCR扩增方法获得了Rd29A启动子序列，并以pBI121为基础，分别构建了pBIG(35S-GFP)和pBIRG(Rd29A-GFP)两个植物真核表达载体，采用基因枪法对洋葱表皮细胞进行转化，检测Rd29A启动子在受体细胞中调控GFP基因表达的活性。本发明能筛选出适用于草坪草转基因的诱导型启动子Rd29A，Rd29A启动子是一个受干旱、盐碱和低温等逆境诱导表达的特异性启动子，也是植物抗逆性基因工程中理想的逆境诱导型启动子，对于逆境条件下草坪草的生长发育有重要意义。
-
公开(公告)号：CN100510086C
公开(公告)日：2009-07-08
申请号：CN200710063137.1
申请日：2007-01-29
Abstract: 本发明高羊茅高效农杆菌介导转化体系的建立方法，包括以下步骤：通过高频再生体系获得胚性愈伤受体材料；供体菌株的培养；抑菌素浓度的确定；农杆菌转化条件的优化；转化愈伤的筛选培养和植株再生和抗性植株的分子检测。通过优化农杆菌转化时所涉及到的各项影响条件，包括菌液浓度、侵染时间、侵染条件、共培养时间、抑菌素的添加浓度等，提供了一种适用于高羊茅的农杆菌介导转化体系。克服了现有农杆菌介导技术难以应用于禾本科植物遗传转化的缺陷，建立起了以胚性愈伤为受体材料的高效高羊茅农杆菌介导转化体系。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100386438C
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：CN200510085474.1
申请日：2005-07-21
Abstract: 本专利采用基因枪转化法对草地早熟禾胚性愈伤组织进行轰击，建立了一套完整、高效的遗传转化体系。适合于草地早熟禾的基因枪转化参数为：Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA；使用1μm金粉作为质粒DNA的载体；处理1(打枪高度6cm、轰击1次、无渗透处理)与处理5(打枪高度6cm、轰击2次、有渗透处理)进行轰击，转化效果最好。适合于转化愈伤筛选的抗生素浓度为100mg/L。运用此转化体系，成功将三种与干旱、盐胁迫有关的功能基因转入草地早熟禾愈伤组织中，获得了转基因植株。转化频率高达3.92%。
-
公开(公告)号：CN101139604A
公开(公告)日：2008-03-12
申请号：CN200610126822.X
申请日：2006-09-06
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415
Abstract: 本发明从优良草坪草种结缕草中克隆了GA20氧化酶基因及构建了其植物表达载体。通过简并PCR和RACE的方法，从我国野生的结缕草中克隆出了GA20氧化酶基因，该基因全长1311bp，编码区长1109bp，编码区在96－1205bp之间，编码369个氨基酸。其与大麦、小麦和水稻等有65％的同源性。在GenBank上的登录号为：DQ645453。同时以pC1303为基础，分别构建了GA20氧化酶的正义和反义表达载体，该载体含GUS报告基因和潮霉素标记基因，可用于坪草的基因工程育种，以培育矮化型转基因草坪草。
-
公开(公告)号：CN101045935A
公开(公告)日：2007-10-03
申请号：CN200710064240.8
申请日：2007-03-07
Abstract: 本发明提供了结缕草高频基因枪转化方法，建立了一套完整、高效的遗传转化体系。本发明基因枪法转化的具体参数是：选用直径为1μm的金粉、每枪250μg金粉+0.5μg DNA、5cm的轰击距离、轰击3次的基因枪转化参数，选择诱导4个月、继代培养25d左右的胚性愈伤组织进行基因枪轰击，靶材料在轰击前4h至轰击后12h间，培养于含有0.2M的甘露醇及0.2M的山梨醇高渗培养基上。本发明还进一步将可综合提高植物抗旱、耐寒、耐盐性的DREB1A基因转入日本结缕草胚性愈伤组织中，获得了转基因植株。并且确立了结缕草转化子的潮霉素筛选方案。
-
公开(公告)号：CN100336444C
公开(公告)日：2007-09-12
申请号：CN200510085473.7
申请日：2005-07-21
IPC: A01H4/00
Abstract: 本专利对草地早熟禾Baron、Mardona、Midnight品种进行了组织培养研究，表明选择成熟种子作为外植体诱导愈伤组织，消毒时运用磁力搅拌消毒，蒸馏水洗净后直接接种为宜；选择易碎、干燥的胚性愈伤进行继代培养，在8个月内能够保持其再生能力；再生2个月的组培苗，移栽到花盆中能够100%成活，在田间生长健壮；运用正交设计与单因素实验设计的方法，建立了三种草地早熟禾品种的高频再生体系，胚性愈伤诱导率高达31.67%，愈伤组织分化率高达56.67%。运用其中Baron品种的再生体系进行基因枪转化，获得了转DREB1A、BADH-CMO、CMO基因的转化植株。
-
公开(公告)号：CN101024844A
公开(公告)日：2007-08-29
申请号：CN200710063586.6
申请日：2007-02-05
Abstract: 本发明提供了高羊茅高频基因枪转化的方法。本发明选择胚性愈伤组织作为转化受体进行基因枪转化，采用CaCl2+Sperm(亚精胺)包被质粒DNA，使用直径为1μm的金粉作为质粒DNA的载体、轰击高度6cm，轰击2次。并且本发明还提供了基于基因枪法制备转基因高羊茅的方法。本发明方法周期短，转化频率高达6％。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
84
records
(took 0.031 seconds)
