公开(公告)号：CN1715418A

公开(公告)日：2006-01-04

申请号：CN200510085474.1

申请日：2005-07-21

Applicant: 北京林业大学 ,  韩烈保 ,  信金娜

Inventor： 韩列保 ,  信金娜 ,  刘君 ,  曾会明 ,  李雪 ,  何宇锋

IPC: C12N15/87 ,  C12N15/89 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明采用基因枪转化法对草地早熟禾胚性愈伤组织进行轰击，建立了一套完整、高效的遗传转化体系。适合于草地早熟禾的基因枪转化参数为：Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA；使用1μm金粉作为质粒DNA的载体；处理1(打枪高度6cm、轰击1次、无渗透处理)与处理5(打枪高度6cm、轰击2次、有渗透处理)进行轰击，转化效果最好。适合于转化愈伤筛选的抗生素浓度为100mg/L。运用此转化体系，成功将三种与干旱、盐胁迫有关的功能基因转入草地早熟禾愈伤组织中，获得了转基因植株。转化频率高达3.92％。

公开(公告)号：CN100386438C

公开(公告)日：2008-05-07

申请号：CN200510085474.1

申请日：2005-07-21

Applicant: 北京林业大学 ,  韩烈保 ,  信金娜

Inventor： 韩烈保 ,  信金娜 ,  刘君 ,  曾会明 ,  李雪 ,  何宇锋

IPC: C12N15/87 ,  C12N15/89 ,  C12N15/82

Abstract: 本专利采用基因枪转化法对草地早熟禾胚性愈伤组织进行轰击，建立了一套完整、高效的遗传转化体系。适合于草地早熟禾的基因枪转化参数为：Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA；使用1μm金粉作为质粒DNA的载体；处理1(打枪高度6cm、轰击1次、无渗透处理)与处理5(打枪高度6cm、轰击2次、有渗透处理)进行轰击，转化效果最好。适合于转化愈伤筛选的抗生素浓度为100mg/L。运用此转化体系，成功将三种与干旱、盐胁迫有关的功能基因转入草地早熟禾愈伤组织中，获得了转基因植株。转化频率高达3.92%。

公开(公告)号：CN1597968A

公开(公告)日：2005-03-23

申请号：CN200410057271.7

申请日：2004-08-30

Applicant: 北京林业大学 ,  韩烈保 ,  曾会明

Inventor： 韩烈保 ,  刘君 ,  何宇锋 ,  陈其军 ,  信金娜

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明通过构建出植物双基因载体，运用转基因技术来将载体转入草坪草中，实现提高草坪草的抗性能力。在构建过程中，不仅考虑了双基因载体在单子叶植物方面的转化，而且还考虑了在双基因植物方面的转化，因此构建了两种含有不同启动子的载体，使双基因载体可以在单、双子叶植物中都可转化。主要通过以下步骤来实现这一目的：1.从本实验室已有质粒上获得CMO和BADH基因；2.运用实验室已有的载体和获得的两个基因，构建出带有不同启动子的单基因载体；3.经过多次不同的酶切和连接，得到两种含不同启动子的双基因植物表达载体；4.用得到的双基因植物表达载体转入大肠杆菌和农杆菌，为将来单子叶植株和双子叶植株基因转化打下基础。