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公开(公告)号:CN117778629A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202410052803.5
申请日:2024-01-12
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种利用三重RT‑qPCR检测蜱传脑炎、乙型脑炎和山羊关节炎脑炎的方法及试剂盒,属于分子生物学和核酸检测领域。该方法通过设置针对蜱传脑炎的C基因、乙型脑炎病毒的NS2A基因和山羊关节炎脑炎病毒基因组的gag基因的三组引物对和探针,通过RT‑qPCR方式测定达到荧光值的Ct值,依据判定规则确定是否感染病毒以及种类,该检测方法具有检测灵敏度高,特异性好、操作简便、快速的特点,适合在实际检测中推广应用。
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公开(公告)号:CN113135997B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202110336260.6
申请日:2021-03-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12P21/02 , A23B4/20 , A23C3/08 , C12R1/865
Abstract: 本发明提供了一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,属于功能多肽筛选技术领域。为了克服现有技术的不足,本发明提供一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,该杂合肽融合了猪源抗菌肽cecropin P1的活性区域和牛源抗菌肽的活性区域的优势获得新型的杂合肽,通过人工合成杂合肽基因并将目的基因连接在质粒pYES2‑ɑ上获得新型杂合肽重组酵母菌株,使用半乳糖诱导其表达,上清液进一步纯化后即可用于食品保鲜,尤其对于新鲜猪肉保鲜和牛奶保鲜具有很好的效果。
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公开(公告)号:CN114181953A
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202111572371.3
申请日:2021-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法及其应用,属于分子生物学领域。为了克服黄病毒NS2A研究过程中缺乏针对NS2A的特异性抗体的技术不足,本发明提供一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法,并公开了其应用。本发明通过在NS1与NS2A之间插入HA标签,通过HA标签来指示NS2A,同时为避免影响NS2A荧光信号的观察,对NS2A第30个氨基酸进行点突变,以干扰NS2A的茎环结构,消除病毒复制过程的‑1核糖体移码。本发明所述的携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆对于黄病毒的研究具有重要的价值。
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公开(公告)号:CN110396502A
公开(公告)日:2019-11-01
申请号:CN201910736306.6
申请日:2019-08-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/65
Abstract: 本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系的构建方法,该方法包含:获得原代猪扁桃体细胞,并进行培养;以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体,以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体,共同转染进入293T细胞中,获得慢病毒颗粒;将慢病毒颗粒感染经培养后的原代猪扁桃体细胞系;经过感染后,将猪扁桃体细胞在含血清的DMEM/F12培养液中添加嘌呤霉素进行细胞筛选,获得阳性细胞;将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养,得到扁桃体上皮细胞传代细胞系。本发明的方法以猪扁桃体细胞作为宿主细胞,通过感染的方法得到JEV易感的猪扁桃体细胞系,该细胞系对JEV敏感,可以用于相关研究。
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