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公开(公告)号:CN107828706A
公开(公告)日:2018-03-23
申请号:CN201710972807.5
申请日:2017-10-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/62 , C12N15/66 , A61K39/225 , A61K39/215 , A61P1/00 , A61P1/04 , A61P31/14 , A61P1/12 , C12R1/46
CPC classification number: C12N15/74 , A61K39/12 , A61K2039/542 , A61K2039/70 , C07K14/005 , C07K2319/60 , C12N15/66 , C12N2770/20022 , C12N2770/20034 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开了一种eGFP标记的、抗猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻的重组屎肠球菌疫苗株及其应用。所述的疫苗株以从猪肠道结肠段分离获得的屎肠球菌作为疫苗抗原传递活载体,其中含有eGFP标记的组成型表达TGEV S蛋白D抗原位点和PEDV S蛋白中和表位区ps420蛋白的重组表达载体。由上述重组屎肠球菌疫苗株制备得到的抗猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻的二价口服疫苗可达到一次免疫预防两种疾病的目的,且具有绿色环保、高效安全、益生性好等特点。
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公开(公告)号:CN101367870A
公开(公告)日:2009-02-18
申请号:CN200810137277.3
申请日:2008-10-09
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 牛轮状病毒重组VP6蛋白抗原及其制备方法,它涉及一种牛轮状病毒重组蛋白抗原及其制备方法。它解决了目前对犊牛轮状病毒腹泻的诊断方法存在着费时、费力又不能快速诊断的弊端,以及过程繁琐、又需要昂贵的分子生物学试剂及相应的仪器设备的问题。牛轮状病毒重组VP6蛋白抗原由重组载体质粒转化的大肠杆菌表达。制备方法:一、VP6基因的PCR扩增;二、获得重组质粒;三、获得重组菌;四、重组VP6蛋白抗原的诱导表达;五、纯化。本发明为血清学方法诊断犊牛轮状病毒腹泻提供了诊断抗原,具有极强的特异性和准确性。使用本发明牛轮状病毒重组VP6蛋白抗原、采用荧光抗体试验和酶联免疫吸附等血清学试验具有诊断方法省时、省力、快速的优点,且不需要昂贵的试剂及设备。
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公开(公告)号:CN118127119A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410355708.2
申请日:2024-03-26
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了猪PRDX4蛋白在制备抑制口蹄疫病毒感染和复制的生物制剂中的应用,属于基因工程技术领域。本发明发现过表达宿主PRDX4基因,能够抑制口蹄疫病毒的感染和复制,即PRDX4可作为靶点用于筛选抑制口蹄疫病毒感染和复制的试剂。本发明还提供了一种稳定过表达PRDX4的BHK21细胞系,可用于制备无口蹄疫病毒感染的细胞或动物模型,同时提供了相应的制备方法:构建过表达PRDX4的pLPCX‑HA‑PRDX4质粒,与pVSVG和pCGP包装载体构成三质粒表达系统,共转染293T细胞,收集慢病毒转染BHK21细胞,获得稳定过表达PRDX4基因的BHK21细胞系,在临床、实验室研究上具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN110423845B
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN201910537825.X
申请日:2019-06-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒(BRV)、牛细小病毒(BPV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的多重纳米PCR引物组及其应用。所述的引物组中含有分别用于检测牛轮状病毒、牛细小病毒和牛病毒性腹泻病毒的DPO引物对。本发明将DPO引物结合纳米PCR技术建立了一种能够同时检测BRV、BPV和BVDV的多重DPO‑nanoPCR检测方法。与常规PCR方法比较,该方法省时省力,能够迅速、准确、特异地检测出病原,在保证特异的基础上,又具有高度的灵敏性。本发明的提出为BRV、BPV和BVDV早期感染和隐性感染的诊断提供了一种新方法,为BRV、BPV和BVDV临床混合感染的检测提供给了一种可靠的技术手段,为疫病排查、筛查净化及综合防制提供了技术支持。
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公开(公告)号:CN108148814B
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN201711353547.X
申请日:2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的双抗体夹心ELISA诊断试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体4D10。此外,本发明以纯化的兔抗BRV多抗为捕获抗体,以4D10单抗为检测抗体,建立了BRV双抗体夹心ELISA方法。敏感性实验表明,该方法对BRV的最低检出量为9.884×104TCID50/mL;特异性实验结果表明,该方法具有良好的特异性,与PoRV、PEDV、BPV及TGEV均无交叉反应;批间和批内重复性实验结果显示,该方法具有良好的重复性。使用建立的双抗体夹心ELISA方法对95份临床样品进行检测,与RT‑PCR方法相比,符合率为100%。可见本发明建立的双抗体夹心ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于BRV的快速检测。
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公开(公告)号:CN107271667B
公开(公告)日:2019-01-22
申请号:CN201710415171.4
申请日:2017-06-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分:组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I,所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生;组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II,所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生。本发明利用制备的两株8型BTV VP2单克隆抗体8B5D4以及8B3G11建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法,该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清,实验条件要求低,适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号:CN108276476A
公开(公告)日:2018-07-13
申请号:CN201711448093.4
申请日:2017-12-27
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K7/08 , C12N15/12 , A61K39/385 , A61K47/42
Abstract: 本发明公开了一种鸡骨髓源树突状细胞靶向肽SP及其用途。所述的鸡骨髓源树突状细胞靶向肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用噬菌体随机肽库和全细胞差异筛选技术筛选出鸡骨髓源DC优势结合多肽SP,与已发表的人源DC靶向肽相比,能较强地结合于鸡源DC,显示了良好的靶向性和特异性,因此该靶向肽SP可作为基因导向载体等药物的先导分子,为细胞特异性小分子治疗奠定基础,或与疫苗联合使用,提高禽类疫苗免疫效率,促进机体提早产生免疫力。
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公开(公告)号:CN107937607A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201711241581.8
申请日:2017-11-30
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组、含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物组由上游引物和下游引物组成。此外,本发明采用该DPO引物组结合实时荧光定量PCR方法,建立了一种特异、快速检测猪传染性胃肠炎病毒的DPO-real time RT-PCR检测方法,该方法简单、特异性强、灵敏度高,能够实现现有检测技术所无法完成的定量、快速、特异、敏感的结果判定。因此,本发明的提出为猪传染性胃肠炎病毒的快速准确检测提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN107619816A
公开(公告)日:2018-01-23
申请号:CN201710762830.1
申请日:2017-08-30
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向传递疫苗抗原的基因工程乳酸菌口服疫苗株及其在防治鸡大肠杆菌病中的用途。所述的疫苗株是通过将表达鸡致病性大肠杆菌ompC蛋白和fimA蛋白以及靶向M细胞和DC细胞的靶向肽的融合蛋白的表达载体转入乳酸菌中得到的,其中ompC蛋白和fimA蛋白之间通过柔性序列连接,所述的融合蛋白的连接顺序为ompC-fimA-M细胞靶向肽-DC细胞靶向肽。本发明以鸡致病性大肠杆菌fimA和ompC蛋白为免疫原并融合能够靶向M细胞和DC细胞的靶向肽,利用乳酸菌为抗原传递载体,构建了预防鸡大肠杆菌病的靶向传递疫苗抗原的基因工程乳酸菌亚单位口服疫苗,可有效地抑制鸡致病性大肠杆菌的感染,并且使用方便、安全,对环境友好。
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公开(公告)号:CN107586884A
公开(公告)日:2018-01-16
申请号:CN201711008696.2
申请日:2017-10-25
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的RT-PCR引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的引物组由上游引物和下游引物组成,所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明还提出了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的荧光定量RT-PCR试剂盒,含有所述的引物组以及Eva Green荧光染料反应液。本发明与现有技术相比,最大的优势在于能够区分猫传染性腹膜炎病毒感染以及猫冠状病毒感染,且检测灵敏度高,特异性好,能够实现现有检测技术所无法完成的定量、快速、特异、敏感的结果判定,具有广阔的应用前景。
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