一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的RT-PCR引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN107586884B

    公开(公告)日:2020-08-18

    申请号:CN201711008696.2

    申请日:2017-10-25

    Abstract: 本发明公开了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的RT‑PCR引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的引物组由上游引物和下游引物组成,所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明还提出了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的荧光定量RT‑PCR试剂盒,含有所述的引物组以及Eva Green荧光染料反应液。本发明与现有技术相比,最大的优势在于能够区分猫传染性腹膜炎病毒感染以及猫冠状病毒感染,且检测灵敏度高,特异性好,能够实现现有检测技术所无法完成的定量、快速、特异、敏感的结果判定,具有广阔的应用前景。

    一种鲤浮肿病毒体外分离培养方法

    公开(公告)号:CN114874998A

    公开(公告)日:2022-08-09

    申请号:CN202210810758.6

    申请日:2022-07-11

    Inventor: 施雯 刘敏 任宣宇

    Abstract: 本发明涉及一种鲤浮肿病毒体外分离培养方法,属于兽用生物制品技术领域,解决了目前鲤浮肿病毒不能体外培养的问题。本发明采用未感染任何病原体的健康松浦镜鲤幼鱼的头肾组织进行酶解处理,对其进行原代细胞培养,将过滤除菌的鲤浮肿病毒阳性的鳃组织匀浆液接种于鲤头肾原代细胞上,对培养后的病毒进行PCR鉴定;测序结果比对,与已公布的鲤浮肿病毒核苷酸序列同源性均为98%以上,说明鲤浮肿病毒能够在鲤头肾原代细胞上分离培养并稳定增殖。本发明的方法实现了鲤浮肿病毒体外细胞传代培养,对该病毒的基础生物学特性研究及疫苗的研发奠定了基础,本发明的方法的实验材料获取广泛,易于实验室操作,能够适用于鲤浮肿病毒体外培养及增殖。

    稳定表达猪轮状病毒VP4蛋白的乳酸菌基因工程亚单位疫苗株及其制备方法

    公开(公告)号:CN107988130A

    公开(公告)日:2018-05-04

    申请号:CN201711395821.X

    申请日:2017-12-21

    Abstract: 本发明公开了一种稳定表达猪轮状病毒VP4蛋白的乳酸菌基因工程亚单位疫苗株及其制备方法。所述疫苗株是在尿嘧啶磷酸核糖转移酶(uracil phosphoribosyl transferase,UPP)基因缺失的干酪乳杆菌的基础上,通过同源重组将猪轮状病毒VP4基因插入干酪乳杆菌的丙酮酸水合酶基因的终止密码子和终止子之间后得到,所述疫苗株不带有抗生素选择标记。实验证明,本发明构建的稳定表达猪轮状病毒VP4蛋白的乳酸菌基因工程亚单位疫苗株,经口服途径免疫动物既能诱导局部黏膜免疫应答,产生黏膜抗体IgA,又能够诱导机体产生体液免疫应答,产生血清抗体IgG,显示了良好的免疫原性,且本发明所构建的非抗生素抗性标记的基因工程乳酸菌疫苗株符合兽用疫苗绿色、环保的发展理念。

    一种鲤浮肿病毒体外分离培养方法

    公开(公告)号:CN114874998B

    公开(公告)日:2022-10-21

    申请号:CN202210810758.6

    申请日:2022-07-11

    Inventor: 施雯 刘敏 任宣宇

    Abstract: 本发明涉及一种鲤浮肿病毒体外分离培养方法,属于兽用生物制品技术领域,解决了目前鲤浮肿病毒不能体外培养的问题。本发明采用未感染任何病原体的健康松浦镜鲤幼鱼的头肾组织进行酶解处理,对其进行原代细胞培养,将过滤除菌的鲤浮肿病毒阳性的鳃组织匀浆液接种于鲤头肾原代细胞上,对培养后的病毒进行PCR鉴定;测序结果比对,与已公布的鲤浮肿病毒核苷酸序列同源性均为98%以上,说明鲤浮肿病毒能够在鲤头肾原代细胞上分离培养并稳定增殖。本发明的方法实现了鲤浮肿病毒体外细胞传代培养,对该病毒的基础生物学特性研究及疫苗的研发奠定了基础,本发明的方法的实验材料获取广泛,易于实验室操作,能够适用于鲤浮肿病毒体外培养及增殖。

    一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的RT-PCR引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN107586884A

    公开(公告)日:2018-01-16

    申请号:CN201711008696.2

    申请日:2017-10-25

    Abstract: 本发明公开了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的RT-PCR引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的引物组由上游引物和下游引物组成,所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明还提出了一种用于猫传染性腹膜炎病毒检测的荧光定量RT-PCR试剂盒,含有所述的引物组以及Eva Green荧光染料反应液。本发明与现有技术相比,最大的优势在于能够区分猫传染性腹膜炎病毒感染以及猫冠状病毒感染,且检测灵敏度高,特异性好,能够实现现有检测技术所无法完成的定量、快速、特异、敏感的结果判定,具有广阔的应用前景。

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