海绵共附生优势细菌组成及宿主特异菌的分子鉴定方法

    公开(公告)号:CN1316041C

    公开(公告)日:2007-05-16

    申请号:CN200510029321.5

    申请日:2005-09-01

    Inventor: 李志勇 何丽明

    Abstract: 一种海绵共附生优势细菌组成及宿主特异菌的分子鉴定方法,研磨破碎海绵后经溶菌酶与蛋白酶K处理释放DNA,采用酚-氯仿方法制备海绵共附生微生物宏基因组总DNA样品,以其为模板,以细菌通用引物进行PCR扩增得到小于500bp的16S rDNA片段,经变性梯度凝胶电泳将混合片段分开得到16S rDNA-DGGE基因指纹图谱,割胶回收DNA条带,再次PCR扩增及变性梯度凝胶电泳确认条带位置,纯化后克隆、测序,对照基因库进行同源性与系统发育分析,通过一种海绵的DGGE指纹图谱上所有条带的分析对海绵共附生的优势细菌组成进行分子鉴定,通过找到不同海绵的DGGE指纹图谱上的差异性条带完成宿主特异菌的分子鉴定。

    海绵共生微生物混合培养及可培养种群监测方法

    公开(公告)号:CN1766081A

    公开(公告)日:2006-05-03

    申请号:CN200510029319.8

    申请日:2005-09-01

    Inventor: 李志勇 何丽明

    Abstract: 一种海绵共生微生物混合培养及可培养种群监测方法。无菌水洗净海绵表面附生微生物后以人工海水浸泡、震荡释放海绵体内共生微生物制备种子液;用乙醇提取制备海绵浸出汁,添加进海水培养基中制成复合培养基;接种进行混合微生物培养。提取混合培养的微生物总DNA,采用细菌通用引物PCR扩增得到小于500bp的16S rDNA片段,进行变性梯度凝胶电泳得到基因指纹图谱;通过不同培养时间混合微生物样品指纹图条带的回收、克隆测序、同源性与系统发育分析鉴定微生物种群中的细菌种类,实现体外混合培养海绵共生微生物种群的监测。本发明可提高海绵共生微生物体外分离与培养的效率,也为制备多菌诱导产生的活性物质提供原料和技术支撑。

    生物碱类化合物及其制备方法和用途

    公开(公告)号:CN109053720B

    公开(公告)日:2020-11-06

    申请号:CN201810892539.0

    申请日:2018-08-07

    Abstract: 本发明提供了一种生物碱类化合物,包括结构如式I所示的化合物及其衍生物;式I。其分子式为C20H22N4O2S,分子量382。该化合物的制备方法包括以下步骤:将海洋萎缩芽孢杆菌经平板培养、种子培养和摇瓶发酵,分离纯化后制备即得所述生物碱类化合物。该化合物的衍生物被证明具有抗赤潮藻、淡水有害藻等活性,可用于制备相关药剂。

    一种硼替佐米诱导海洋真菌合成次级代谢产物的方法

    公开(公告)号:CN105463028B

    公开(公告)日:2019-10-08

    申请号:CN201510895006.4

    申请日:2015-12-07

    Abstract: 本发明公开了一种硼替佐米诱导海洋真菌合成次生代谢产物的方法;所述方法具体为在海洋真菌发酵过程中添加硼替佐米,即可;其中,所述发酵包括将所述海洋真菌接种于种子培养基中培养获得种子液的步骤和将所述种子液接种于发酵培养基中进行发酵得到次生代谢产物的步骤。与现有技术相比,本发明具有如下的有益效果:与实验室常规培养海洋真菌的条件相比,通过向培养基中添加硼替佐米,明显提高了海绵共生斑污拟盘多毛孢真菌代谢产物的合成水平。

    生物碱类化合物及其制备方法和用途

    公开(公告)号:CN109053720A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201810892539.0

    申请日:2018-08-07

    Abstract: 本发明提供了一种生物碱类化合物,包括结构如式I所示的化合物及其衍生物;式I。其分子式为C20H22N4O2S,分子量382。该化合物的制备方法包括以下步骤:将海洋萎缩芽孢杆菌经平板培养、种子培养和摇瓶发酵,分离纯化后制备即得所述生物碱类化合物。该化合物的衍生物被证明具有抗赤潮藻、淡水有害藻等活性,可用于制备相关药剂。

    海洋萎缩芽孢杆菌外源DNA的转入方法

    公开(公告)号:CN106167809A

    公开(公告)日:2016-11-30

    申请号:CN201610396756.1

    申请日:2016-06-06

    Abstract: 本发明提供了一种海洋萎缩芽孢杆菌外源DNA的转入方法,包括如下步骤:对供体菌株、辅助菌株和受体菌株分别进行培养,并分别检测供体菌株培养液、辅助菌株培养液和受体菌株培养液的OD600;将前步骤中培养后的供体菌株、辅助菌株和受体菌株等量混匀,进行三亲本杂交,并筛选出杂交成功的菌株,记为三亲本杂交菌株;筛选出带有质粒菌株的萎缩芽孢杆菌C89/pRP1028;提取质粒pRP1028;将质粒pRP1028转化到大肠杆菌中,并提取大肠杆菌的质粒,进行测序验证。本发明具有如下的有益效果:对特殊培养和难于转化菌株的外源基因的转化带有借鉴意义。

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