公开(公告)号：CN106167809A

公开(公告)日：2016-11-30

申请号：CN201610396756.1

申请日：2016-06-06

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张风丽 ,  王惟佳 ,  金结平 ,  李志勇

IPC: C12N15/75 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明提供了一种海洋萎缩芽孢杆菌外源DNA的转入方法，包括如下步骤：对供体菌株、辅助菌株和受体菌株分别进行培养，并分别检测供体菌株培养液、辅助菌株培养液和受体菌株培养液的OD600；将前步骤中培养后的供体菌株、辅助菌株和受体菌株等量混匀，进行三亲本杂交，并筛选出杂交成功的菌株，记为三亲本杂交菌株；筛选出带有质粒菌株的萎缩芽孢杆菌C89/pRP1028；提取质粒pRP1028；将质粒pRP1028转化到大肠杆菌中，并提取大肠杆菌的质粒，进行测序验证。本发明具有如下的有益效果：对特殊培养和难于转化菌株的外源基因的转化带有借鉴意义。

公开(公告)号：CN106167809B

公开(公告)日：2019-11-01

申请号：CN201610396756.1

申请日：2016-06-06

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张风丽 ,  王惟佳 ,  金结平 ,  李志勇

IPC: C12N15/75 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明提供了一种海洋萎缩芽孢杆菌外源DNA的转入方法，包括如下步骤：对供体菌株、辅助菌株和受体菌株分别进行培养，并分别检测供体菌株培养液、辅助菌株培养液和受体菌株培养液的OD600；将前步骤中培养后的供体菌株、辅助菌株和受体菌株等量混匀，进行三亲本杂交，并筛选出杂交成功的菌株，记为三亲本杂交菌株；筛选出带有质粒菌株的萎缩芽孢杆菌C89/pRP1028；提取质粒pRP1028；将质粒pRP1028转化到大肠杆菌中，并提取大肠杆菌的质粒，进行测序验证。本发明具有如下的有益效果：对特殊培养和难于转化菌株的外源基因的转化带有借鉴意义。