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公开(公告)号:CN113679832A
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN202110999325.5
申请日:2021-08-28
Applicant: 苏州大学
IPC: A61K39/245 , A61K9/19 , A61P31/22
Abstract: 本发明涉及一种利用冷冻干燥制备杆状病毒载鲤疱疹病毒II型DNA疫苗的方法。将重组病毒BmNPV‑FA‑D4ORF接种家蚕,然后将发病家蚕匀浆、冷冻干燥,制作冻干粉,为鲤疱疹病毒II型DNA疫苗;所述冷冻干燥为‑80℃预冻过夜,然后进行低压阶梯升温干燥。本发明限定冷冻方法,在现有重组病毒BmNPV‑FA‑D4ORF接种家蚕,然后将发病家蚕匀浆的基础上,进一步提高了应用效果。
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公开(公告)号:CN108660157B
公开(公告)日:2020-12-04
申请号:CN201810535576.6
申请日:2018-05-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言,本发明的方法包括下列步骤:1)获得家蚕质型多角体病毒基因组;2)设计并合成引物;3)获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA;4)对cDNA进行PCR扩增;5)将扩增产物进行酶切,然后克隆到质粒载体中,获得重组质粒;6)将重组质粒进行酶切、线性化;以及7)将线性化质粒等摩尔混合,使用脂质体进行包裹并转染表达T7 RNA聚合酶的宿主细胞,进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用,为体外获取家蚕质型多角体病毒提供新方法,而且也可以为构建重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供理论指导和技术支撑。
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公开(公告)号:CN110628957A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201911095128.X
申请日:2019-11-11
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种用于中华绒螯蟹白斑综合征病毒PCR检测的引物对及试剂盒。本发明提供了一种用于中华绒螯蟹白斑综合征病毒PCR检测的引物对,本发明的引物对根据如SEQ ID NO.3所示的中华绒螯蟹白斑综合征病毒特异性序列进行设计,实现了中华绒螯蟹白斑病毒的PCR检测。本发明实现了中华绒螯蟹白斑病毒的快速检测,从模板DNA制备、PCR反应、阳性对照体系均有预混液,实现了检测操作过程的标准化、简单化,且可大大减少了操作过程中所引起的污染,减少人为操作所引起的误差。本发明可广泛应于养殖生产中中华绒螯蟹白斑病毒的检测和评估其在养殖生产中的潜在危害。与宏基因组、宏转录组批量检测相比,本发明的技术方案具有速度快、费用低、针对性强,应用性好。
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公开(公告)号:CN108728490A
公开(公告)日:2018-11-02
申请号:CN201810534457.9
申请日:2018-05-29
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/866 , C12N15/38 , C12N5/10 , C12N15/62 , A61K39/245 , A61P31/22
Abstract: 本发明涉及一种基于杆状病毒载体的鲤疱疹病毒II型DNA疫苗及其构建方法与应用。将鲤疱疹病毒II型ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1-186、993-1197、603-783、85-186 nt区域序列的密码子经优化后,化学合成ORF72-ORF66-ORF81-ORF82融合序列,尔后,用启动子控制,克隆进杆状病毒转移载体pFSATBacTMDual构建重组质粒pFSATBacTMDual-FA-D4ORF,该质粒转化DH10/Bac感受态细胞后获Bacmid-FA-D4ORF,Bacmid-FA-D4ORF DNA转染家蚕培养细胞获BmNPV-FA-D4ORF,即基于杆状病毒载体的鲤疱疹病毒II型DNA疫苗。该DNA疫苗可以通过注射或口服或浸泡的方法对异育银鲫进行免疫,减少异育银鲫发生鳃出血病。
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公开(公告)号:CN118303396A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410401274.5
申请日:2024-04-03
IPC: A01N33/12 , A01N59/02 , A01N59/08 , A01N59/26 , A01P1/00 , A01P3/00 , A61P31/02 , A61K33/14 , A61K33/04 , A61K33/42 , A61K31/14 , A61P31/04 , A61P31/10 , A61P33/02 , A23K10/30 , A23L5/20 , A23K50/90
Abstract: 本发明涉及一种新蚕药,公开了一种蚕用过硫酸氢钾复合粉及其制备方法与在蚕病防治中的应用,该新蚕药由单过硫酸氢钾三合盐、氯化钠、氨基磺酸、苯扎溴铵、六偏磷酸钠制备成二元包装的可溶性粉剂,具有消杀家蚕病原体和桑树病菌的功能,消毒效果好,且腐蚀性和刺激性小的优点。本发明的新蚕药既是消毒剂,适用用于蚕室蚕具、养蚕环境消毒,也是外用药,适用于蚕体蚕座、桑叶叶面消毒,还具有农药的功能,用于防治桑树疫病的绿色安全蚕用消毒药。在保证消毒效果的前提下对于延长蚕室蚕具的使用年限,保证房屋的电路、家用及蚕用电器的安全,维护蚕农的健康,减少抗生素的使用有重要作用。
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公开(公告)号:CN117025672A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202310944134.8
申请日:2023-07-28
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/85 , D01F4/02 , A01K67/04 , C07K14/435
Abstract: 本发明公开了一种基于基因打靶家蚕制备蜘蛛家蚕复合丝纤维的方法,具体为基于基因打靶家蚕制备蜘蛛大壶状腺丝蛋白与家蚕丝蛋白复合丝纤维的方法。将pUC‑target‑Heavy‑g和表达Cas12a核酸酶的质粒piggyCPF1注射至家蚕初产卵中,通过荧光初筛、分子生物学鉴定和继代筛选,获得蜘蛛大壶状腺丝蛋白基因序列表达盒替代家蚕丝素重链基因表达盒的基因打靶家蚕。该基因打靶家蚕常规饲养,将熟蚕移至簇具,营茧,采茧,经过缫丝获含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的复合蚕丝。利用本发明可获取含有金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的蚕丝,用于制作各种纺织丝绸制品,满足制备各种生物材料对丝蛋白的多样性的需求,也可以用获得的基因打靶家蚕通过常规杂交育种的手段,选育新家蚕品种。
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公开(公告)号:CN114128723B
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202111322681.X
申请日:2021-11-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种新型抗病毒纳米材料及其应用。具体的,抗病毒纳米材料为纳米二氧化硅(nSiO2)。通过本发明设计的多组实验,(1)nSiO2和病毒粒子共孵育再感染细胞;(2)nSiO2先处理细胞,再感染病毒;(3)病毒先感染细胞,再nSiO2处理细胞,结果证实nSiO2处理细胞后,能够抑制病毒对细胞的感染,而病毒粒子和nSiO2共孵育后再感染细胞则病毒感染效果很弱。
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公开(公告)号:CN114957485A
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202210482497.X
申请日:2022-05-05
Applicant: 苏州大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/866 , A01K67/033
Abstract: 本发明公开了一种含多种蜘蛛腺丝蛋白的高强度蚕丝及其制备方法,得到的蚕丝含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白MaSp‑g和MaSp‑c。现有技术通过家蚕转基因的方法将蜘蛛丝蛋白基因导入家蚕基因组,须经过较复杂的程序进行转基因家蚕的筛选鉴定,进一步通过杂交筛选获得转基因纯系,历时近2年,且多为表达一种蜘蛛丝蛋白基因;本发明可以在较短的时间获取重组病毒,并通过该病毒接种5龄家蚕能在一周左右获得含有多种蜘蛛丝蛋白的嵌合蚕丝,其断裂强度达到1116.55MPa,丝长达到纯蚕丝丝长的65%,既解决了现有技术仅能用于实用性差的多化性品种的问题,又克服了现有技术复合丝长较纯蚕丝丝长明显下降的缺陷。
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公开(公告)号:CN114181969A
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202111499178.1
申请日:2021-12-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及固定化蛋白领域,具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白,从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化;多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后,用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点,可以通过离心使多角体蛋白沉淀,而融合外源蛋白留存在上清中,从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白;融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5标签可以方便地获得更接近天然的外源蛋白。
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公开(公告)号:CN106834352B
公开(公告)日:2020-06-16
申请号:CN201710109641.4
申请日:2017-02-27
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/866 , C12N7/04 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12N15/62
Abstract: 本发明涉及抗原蛋白表达技术,具体涉及基于杆状病毒表达系统制备包裹鲤疱疹病毒II型抗原的多角体的方法,通过设计重组家蚕核型多角体病毒BmNPV‑VP3‑cyHV‑polh,ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1‑186、993‑1197、603‑783、85‑186区域序列与家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP3基因1‑279区域的编码序列串联融合序列由杆状病毒P10启动子控制;家蚕质型多角体蛋白基因由杆状病毒的多角体蛋白基因启动子控制。用该病毒接种家蚕或家蚕培养细胞,重组病毒表达的鲤疱疹病毒II型的抗原蛋白可包裹进家蚕质型多角体内。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化;纯化的多角体在碱性条件下裂解后,可以通过离心使多角体蛋白沉淀,而鲤疱疹病毒II型抗原留存在上清中,从而可以快速、方便地获得鲤疱疹病毒II型抗原。
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