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公开(公告)号：CN119080945A
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202410492507.7
申请日：2024-04-23
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于养禽场H7N9亚型禽流感病毒常态化监测的重组蛋白及其制备方法和应用，本发明将DIVA检测多肽与大肠杆菌硫氧还蛋白（TrxA）进行融合，在原核表达系统中表达重组融合蛋白。此外，利用纯化得到的多肽融合蛋白作为抗原建立了ELISA方法。该方法仅能够与H7N9亚型禽流感病毒感染鸡血清反应。在大肠杆菌中表达、纯化重组蛋白的费用显著低于化学合成多肽，适于在养禽场开展常态化的疫病监测。本发明提供的重组融合蛋白及其检测方法为养禽场开展常态化的H7N9亚型AIV检测提供了廉价、高效的诊断抗原与技术。
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公开(公告)号：CN116585463A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310213348.8
申请日：2023-03-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K39/145 , A61K9/51 , A61K47/46 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种红细胞膜包覆的禽流感病毒样颗粒纳米疫苗及其制备方法与应用，该纳米疫苗通过红细胞膜包覆重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒，所述H7N9亚型禽流感病毒样颗粒同时含有HA蛋白、NA蛋白和M1蛋白。本发明的技术方案通过红细胞膜的包裹使流感病毒样颗粒疫苗可有效躲避生物屏障，进行全身的血液循环，实现纳米疫苗在脾脏中的蓄积，从而提高病毒样颗粒疫苗的生物相容性、在体内的循环时间，并降低机体免疫清除率，显著提升疫苗的体液免疫和细胞免疫效果。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法，也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112079905B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN202011000033.8
申请日：2020-09-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒样颗粒抗原、疫苗及其制备方法和应用，将一株基于串联表达H7N9亚型禽流感病毒HA、NA、M1基因的重组杆状病毒转染昆虫细胞自行组装形成禽流感病毒样颗粒抗原；将本发明所制备的病毒样颗粒抗原用于制备疫苗。本发明制备的疫苗免疫鸡群后能够产生较高滴度的HI抗体、中和抗体和IgY抗体，能够提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒100%的临床保护，并能有效抑制排毒。本发明不依赖于鸡胚，生产成本低、周期短；仅以低剂量一次免疫就可诱导较强的保护能力。本发明为VLP疫苗的工业化生产提供了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112079904B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN202011000015.X
申请日：2020-09-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用，基于重组杆状病毒昆虫细胞培养系统，分别构建了表达H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白、NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒。将三株重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞，可收获到在细胞内自行组装的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。经超滤管与不同梯度浓度蔗糖浓缩纯化后，与佐剂混和乳化制备疫苗。制备的疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体，具有免疫原性强、安全性好、遗传稳定性高等优点。以致死剂量的H7N9亚型高致病性禽流感病毒攻击后，能够提供完全的临床保护且显著抑制鸡的排毒。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法，也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114230642A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111263546.2
申请日：2021-10-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/11 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种区分H7N9亚型禽流感病毒感染与免疫动物的多肽及检测方法，所述多肽序列为KNVPEIPKGRG。本发明用生物信息学方法筛选了一条跨越H7N9亚型AIV HA蛋白裂解位点的多肽，并以该多肽为基础建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。该方法能够清晰地区分H7N9病毒感染与疫苗免疫动物，达到DIVA的目的。本发明提供的多肽可作为家禽或人H7N9亚型AIV的DIVA监测的新靶标，所建立的诊断方法在疫病防控与公共卫生领域有较好的应用潜力。
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公开(公告)号：CN113943751A
公开(公告)日：2022-01-18
申请号：CN202111237226.X
申请日：2021-10-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/65 , C12N5/10 , C12N15/44 , C12Q1/02
Abstract: 本发明提供了一种用于H7N9亚型禽流感血清杀伤效应测定的靶细胞及鉴定方法，其包括如下步骤：PCR扩增目标基因片段、目的基因包装到载体中、转染、慢病毒分离和检测、测定HA蛋白表达情况、测定血清杀伤活性。本发明有着如下有益效果：本发明构建的细胞株高效均一地表达HA蛋白，在普通二级实验室即可操作，为测定H7N9血清杀伤效应提供稳定、可靠的靶细胞来源；本发明提供的细胞系带有ZSgreen荧光报告基因，无需额外的标记，且能区分靶细胞与效应细胞；本发明建立的检测H7N9禽流感免疫血清Fc效应的方法，为全面认识H7N9疫苗的免疫保护机理提供有力工具；除了针对特定的病菌外，本发明还可以对其他家禽疫苗抗体Fc免疫效应的测定提供了技术参考。
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公开(公告)号：CN111825763A
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN202010681212.6
申请日：2020-07-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C07K14/11 , C12N5/20 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种识别流感病毒HA茎部的单克隆抗体、抗原表位、编码基因及其应用。本发明提供一株流感病毒HA茎部特异性单克隆抗体，包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的核苷酸与氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1-2所示；轻链可变区的核苷酸与氨基酸序列分别如SEQ ID NO.6-7所示。该单克隆抗体特异性识别HA蛋白茎部以第431位W、433位Y、437位L为核心基序的抗原表位。该单克隆抗体由H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白作为抗原免疫小鼠得到，亲和力高、敏感性强，与group 1和group 2的流感病毒具有良好的交叉反应性，在流感病毒的广谱免疫学检测方面具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN108888761A
公开(公告)日：2018-11-27
申请号：CN201810489385.0
申请日：2018-05-21
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K39/145 , A61K39/39 , C12N15/866 , C12N15/41 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗及其制备方法与应用。该疫苗包括：重组杆状病毒rBac-JX148HA，该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白，其免疫佐剂为SEPPIC佐剂；其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明疫苗免疫鸡后，能诱导较高的抗体滴度、提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒的完全临床保护、有效抑制排毒。该疫苗安全性高，克服了传统的鸡胚生产疫苗具有鸡胚供应不稳定、外源病毒污染、废弃物产量大等缺陷，在H7N9亚型禽流感的防控上具有较好的应用前景，且符合兽用疫苗利用悬浮细胞培养技术进行大规模生产的趋势。
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