一种靶向甲型流感病毒保守线性B细胞表位的广谱单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN115724952B

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202210820236.4

    申请日:2022-07-13

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种靶向甲型流感病毒保守线性B细胞表位的广谱单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体命名为5F10,是由杂交瘤细胞株CCTCC NO:C2022152产生。该单克隆抗体能够特异识别并广谱结合不同株甲型流感病毒的NP蛋白,与禽、猪、人源的多种亚型的甲型流感病毒均具有良好反应性。该单克隆抗体靶向NP蛋白第81~85位氨基酸的线性B细胞抗原表位,且该抗原表位在甲型流感病毒中高度保守。该单克隆抗体可以很好地应用于免疫荧光、Western blot、免疫沉淀、免疫组化等试验,为NP蛋白结构、功能的实验研究和临床样本中甲型流感病毒的检测诊断提供了有力工具,具有广阔的应用前景和较高的使用价值。

    带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途

    公开(公告)号:CN114990078A

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210754217.6

    申请日:2022-06-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途。基于已建立的基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株反向遗传操作系统,将His标签(6×His)与I4基因组全长转录载体pNDVI4中的HN基因融合,成功构建带有His标签的重组新城疫病毒基因组全长cDNA感染性克隆pNDVI4‑HN‑His。经转染得到重组新城疫病毒rNDVI4‑HN‑His,可通过标签蛋白抗体用于重组病毒HN蛋白的纯化及其与宿主蛋白互作研究。

    表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒灭活疫苗及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN108888761B

    公开(公告)日:2021-11-09

    申请号:CN201810489385.0

    申请日:2018-05-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗及其制备方法与应用。该疫苗包括:重组杆状病毒rBac‑JX148HA,该重组杆状病毒能够表达H7N9禽流感病毒主要免疫抗原HA蛋白,其免疫佐剂为SEPPIC佐剂;其中所述的HA蛋白的核酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明疫苗免疫鸡后,能诱导较高的抗体滴度、提供针对H7N9亚型高致病性禽流感病毒的完全临床保护、有效抑制排毒。该疫苗安全性高,克服了传统的鸡胚生产疫苗具有鸡胚供应不稳定、外源病毒污染、废弃物产量大等缺陷,在H7N9亚型禽流感的防控上具有较好的应用前景,且符合兽用疫苗利用悬浮细胞培养技术进行大规模生产的趋势。

    一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112079904A

    公开(公告)日:2020-12-15

    申请号:CN202011000015.X

    申请日:2020-09-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种重组的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用,基于重组杆状病毒昆虫细胞培养系统,分别构建了表达H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白、NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒。将三株重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞,可收获到在细胞内自行组装的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。经超滤管与不同梯度浓度蔗糖浓缩纯化后,与佐剂混和乳化制备疫苗。制备的疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体,具有免疫原性强、安全性好、遗传稳定性高等优点。以致死剂量的H7N9亚型高致病性禽流感病毒攻击后,能够提供完全的临床保护且显著抑制鸡的排毒。本发明为预防H7N9亚型禽流感病毒感染提供了一种新的方法,也为流感病毒新型疫苗的开发奠定了基础。

    用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型的荧光定量RT-PCR引物、探针及试剂盒

    公开(公告)号:CN111850175A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010806504.8

    申请日:2020-08-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型的双重荧光定量RT-PCR的引物、探针及试剂盒。所述引物和探针包括:(1)序列如SEQ ID NO.1-3所示的检测H1亚型猪流感病毒的引物和探针;(2)序列如SEQ ID NO.4-6所示的检测H3亚型猪流感病毒的引物和探针。本发明还提供了包括上述引物和探针的试剂盒。本发明用于H1和H3亚型猪流感病毒检测与分型,具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,不仅可以在临床流行病学调查中对猪的鼻腔拭子和肺脏、气管等组织样品以及鸡胚尿囊液进行检测,而且也适用于病毒体内感染性实验的定量测定。

    稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系

    公开(公告)号:CN106479983B

    公开(公告)日:2019-05-07

    申请号:CN201610994452.5

    申请日:2016-11-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体地涉及稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系。该细胞系是稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系TG‑418‑E5,其含有TIGAR编码基因序列,它的保藏号是CGMCC NO:12983。通过在MDCK细胞中稳定表达TIGAR基因,提高了细胞的抗凋亡能力,延长了重组细胞的存活时间。该方法不仅为研究MDCK的无血清全悬浮培养用于大规模生产细胞培养疫苗的应用奠定了基础,同时提高禽流感疫苗株的繁殖滴度节约了生产工艺成本。此外,TG‑418‑E5细胞系在抗禽流感病毒药物筛选、疫苗株筛选以及细胞培养疫苗的生产方面都展示出较好的应用前景。

    新城疫病毒株rLX/H9HA及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN103146751A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201310042470.X

    申请日:2013-02-04

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明表达H9亚型禽流感病毒(AvianInfluenzaVirus)血凝素蛋白的重组新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus)rLX/H9HA,保藏号为CGMCCNo:6652。本发明是利用已建立的NDV弱毒LX株的反向遗传操作平台,将H9N2亚型AIV流行株 A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012的HA基因插入LX株基因组全长转录载体pLX中,得到含有H9N2亚型AIVHA基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pLX-H9HA。经转染获得的重组病毒rLX/H9HA在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,连续传多代仍能稳定表达HA蛋白,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。

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