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公开(公告)号:CN107607717A
公开(公告)日:2018-01-19
申请号:CN201710669646.2
申请日:2017-08-08
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , C07K14/075 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种基于F2蛋白的检测血清4型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒,包括包被有纤突蛋白基因F2表达产物的ELISA酶标板,阳性阴性对照,HRP标记的兔抗鸡二抗,样品稀释液、显色液以及洗涤液。本发明建立的FAdV-4抗体的间接ELISA试剂盒能特异性的检测出FAdV-4抗体,而与抗流感病毒血清(AIV)、抗马立克病毒血清(MDV)、抗新城疫病毒血清(NDV)、抗禽网状内皮组织增生症病毒血清(REV)以及SPF鸡血清不反应(图6)。因此,该试剂盒具有良好FAdV-4的特异性,能用于FAdV-4感染及免疫状况流行病学调查。
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公开(公告)号:CN106995487A
公开(公告)日:2017-08-01
申请号:CN201710248386.1
申请日:2017-04-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01
Abstract: 本发明涉及一种源于鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)VP1‑aa 23‑43多肽作为高效细胞穿膜肽的应用。所述VP1‑aa 23‑43多肽序列如SEQ ID NO.2所示。该多肽可以携带FITC在30min内进入293T细胞、HCT‑116细胞、3T3细胞、MDCK细胞、MSB1细胞,而且穿膜效率与穿膜肽浓度呈正相关性,关键特点其可高效进入悬浮培养细胞。结合激光共聚焦显微镜和流式细胞术结果显示,鸡传染性贫血病毒VP1‑aa 23‑43多肽在10μM时具有比TAT短肽的穿膜效率高2倍多。
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公开(公告)号:CN106349348A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610937104.4
申请日:2016-11-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2750/10022 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应,直接重组克隆技术;并转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达;其中,用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效,获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白,可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号:CN106018780A
公开(公告)日:2016-10-12
申请号:CN201610327488.8
申请日:2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N33/5302 , G01N21/6486
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F1蛋白的293T细胞,FITC标记的羊抗鸡抗体,样品稀释液,洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性;该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查,而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平,用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号:CN105973854A
公开(公告)日:2016-09-28
申请号:CN201610327763.6
申请日:2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N21/6486 , G01N33/5302
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种基于F2蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F2蛋白的293T细胞,FITC标记的羊抗鸡抗体,样品稀释液和洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性。该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查,而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平,用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号:CN105037504A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510359309.4
申请日:2015-06-25
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/01 , C07K2319/23 , C12N2750/10011
Abstract: 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物,利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆VP2,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白,可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原;作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体;为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂,填补国内外空白;并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号:CN104833801A
公开(公告)日:2015-08-12
申请号:CN201510113989.1
申请日:2015-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用,本发明属于生物技术检测领域,本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。
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公开(公告)号:CN1437023A
公开(公告)日:2003-08-20
申请号:CN03113002.X
申请日:2003-03-20
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/535 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于禽病毒检测诊断技术领域。J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是90年代鉴定出的一个新的禽白血病病毒亚群,是肉鸡髓细胞瘤(ML)的病原。本发明用PCR方法扩增出ALV-J囊膜蛋白env基因,并进行克隆,然后用昆虫杆状病毒表达系统表达ALV-J env基因产物,以此重组基因产物作为免疫源免疫BALB/C小鼠,研制出特异性单克隆抗体。再以单克隆抗体研制出了独特酶联免疫试验检测试剂盒,以其检测感染鸡血清、脏器及羽囊中抗原抗体复合物,判定是否感染ALV-J。
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公开(公告)号:CN118638218A
公开(公告)日:2024-09-13
申请号:CN202410651611.6
申请日:2024-05-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种识别传染性法氏囊病毒新型变异毒株VP2蛋白第221位氨基酸的单克隆抗体制备,本发明提供了一种仅特异性识别IBDV新型变异株VP2蛋白的单克隆抗体VP2‑5B5,经鉴定重链亚型为IgG2b,其识别的构象抗原表位的关键氨基酸位于VP2第221位氨基酸K。与现有技术相比,本发明的有益技术效果在于:1)本发明以IBDV新型变异株VP2的高变区蛋白作为免疫原,该段序列抗原性和亲水性良好,制备的重组蛋白rVP2‑HVR以可溶性形式表达于上清中。2)本发明制备的单克隆抗体VP2‑5B5特异性良好,仅特异性识别IBDV新型变异株VP2蛋白,可用于IBDV新型变异株的鉴别诊断。3)本发明制备的单克隆抗体VP2‑5B5所识别的抗原表位为构象表位,其所识别的关键氨基酸位于VP2第221位氨基酸K。
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公开(公告)号:CN118497134A
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410694499.4
申请日:2024-05-31
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , C07K14/08 , C12N15/70 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种识别传染性法氏囊病毒VP2蛋白第343‑348位氨基酸的单克隆抗体制备,本发明提供了一种广谱的识别IBDV VP2高变区蛋白的单克隆抗体5G10,经鉴定重链亚型为IgG1,其识别的线性抗原表位位于343PGALRP348。与现有技术相比,本发明的有益技术效果在于:1)本发明以IBDV新型变异株VP2的高变区蛋白作为免疫原,该段序列抗原性和亲水性良好,制备的重组蛋白rVP2‑HVR以可溶性形式表达于上清中。2)本发明制备的单克隆抗体5G10与不同毒力IBDV毒株的VP2蛋白均有良好的反应性,可用于IBDV的检测。3)本发明制备的单克隆抗体5G10所识别的抗原表位为线性表位,其所识别的关键氨基酸位于VP2 343PGALRP348。
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