一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法

    公开(公告)号:CN106349348A

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201610937104.4

    申请日:2016-11-01

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C07K14/005 C12N15/70 C12N2750/10022 C12N2800/101

    Abstract: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应,直接重组克隆技术;并转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达;其中,用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效,获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白,可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。

    一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN104833801A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510113989.1

    申请日:2015-03-16

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: G01N33/56983

    Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用,本发明属于生物技术检测领域,本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。

    禽白血病病毒J亚群诊断试剂盒

    公开(公告)号:CN1437023A

    公开(公告)日:2003-08-20

    申请号:CN03113002.X

    申请日:2003-03-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于禽病毒检测诊断技术领域。J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是90年代鉴定出的一个新的禽白血病病毒亚群,是肉鸡髓细胞瘤(ML)的病原。本发明用PCR方法扩增出ALV-J囊膜蛋白env基因,并进行克隆,然后用昆虫杆状病毒表达系统表达ALV-J env基因产物,以此重组基因产物作为免疫源免疫BALB/C小鼠,研制出特异性单克隆抗体。再以单克隆抗体研制出了独特酶联免疫试验检测试剂盒,以其检测感染鸡血清、脏器及羽囊中抗原抗体复合物,判定是否感染ALV-J。

    一种识别传染性法氏囊病毒新型变异毒株VP2蛋白第221位氨基酸的单克隆抗体制备

    公开(公告)号:CN118638218A

    公开(公告)日:2024-09-13

    申请号:CN202410651611.6

    申请日:2024-05-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种识别传染性法氏囊病毒新型变异毒株VP2蛋白第221位氨基酸的单克隆抗体制备,本发明提供了一种仅特异性识别IBDV新型变异株VP2蛋白的单克隆抗体VP2‑5B5,经鉴定重链亚型为IgG2b,其识别的构象抗原表位的关键氨基酸位于VP2第221位氨基酸K。与现有技术相比,本发明的有益技术效果在于:1)本发明以IBDV新型变异株VP2的高变区蛋白作为免疫原,该段序列抗原性和亲水性良好,制备的重组蛋白rVP2‑HVR以可溶性形式表达于上清中。2)本发明制备的单克隆抗体VP2‑5B5特异性良好,仅特异性识别IBDV新型变异株VP2蛋白,可用于IBDV新型变异株的鉴别诊断。3)本发明制备的单克隆抗体VP2‑5B5所识别的抗原表位为构象表位,其所识别的关键氨基酸位于VP2第221位氨基酸K。

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