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公开(公告)号:CN1932042A
公开(公告)日:2007-03-21
申请号:CN200610041482.0
申请日:2006-09-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70
Abstract: 红细胞富集与RT-PCR联合检测禽流感病毒方法,本发明公开了一种鉴定病毒,特别是鉴定禽流感H5、H9亚型病毒的检测方法。先采用浓度为1%的红细胞凝集、解凝集,得到富集的禽流感病毒,然后用Trizol kit提取样本基因RNA,再进行反转录合成cDNA,然后进行一次性PCR扩增特定的多个基因,最后电泳鉴定。该方法联合多重RT-PCR检测临床样品,提高快速检测方法对禽流感临床样品检出率,进一步完善了RT-PCR方法在禽流感临床检测中的应用。本发明较常规的禽流感病毒富集方法简单、快速,尤其是对少量禽流感病毒的富集。
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公开(公告)号:CN1683018A
公开(公告)日:2005-10-19
申请号:CN200510038480.1
申请日:2005-03-15
Applicant: 扬州大学
Abstract: 断奶仔猪腹泻和猪水肿病的基因工程疫苗,属于畜牧兽医技术领域。依据faeG(F4)、fedA(F18)和Stx 2e B亚单位的基因序列,设计含特异酶切位点的引物;以致PWD、ED大肠杆菌的质粒或基因组DNA为模板,采用PCR法扩增出上述保护性抗原基因;将上述基因定向串联于表达性质粒pGEX-6P-1,经转化宿主菌BL21后,进行IPTG诱导表达,并经SDS-PAGE和Western-blot证明目的基因确已表达。再将表达上述3个保护性抗原基因的重组菌,不同途径免疫小鼠和猪,评价其免疫原性及安全性。试验表明,该疫苗可有效预防PWD和ED,安全性和免疫原性可靠,免疫保护率达80%以上。
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公开(公告)号:CN114990078B
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202210754217.6
申请日:2022-06-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途。基于已建立的基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株反向遗传操作系统,将His标签(6×His)与I4基因组全长转录载体pNDVI4中的HN基因融合,成功构建带有His标签的重组新城疫病毒基因组全长cDNA感染性克隆pNDVI4‑HN‑His。经转染得到重组新城疫病毒rNDVI4‑HN‑His,可通过标签蛋白抗体用于重组病毒HN蛋白的纯化及其与宿主蛋白互作研究。
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公开(公告)号:CN112326963B
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN202011236849.0
申请日:2020-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , C07K14/11 , C07K1/22 , C12N15/44 , C12N15/85
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及A型流感病毒PB2cap蛋白的真核表达及其应用。本发明公开了真核表达的A型流感病毒PB2cap蛋白在检测A型流感病毒RNA帽结合活性中的应用。本发明构建了基于真核表达载体pCAGGS的真核表达质粒pCAGGS‑PB2cap(aa:318‑483),并经瞬时转染将PB2cap进行真核表达,通过该表达蛋白与m7GTP在体外的结合能力来评估流感病毒的RNA帽结合活性,可为A型流感病毒PB2蛋白功能的差异研究提供新的检测指标。
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公开(公告)号:CN116041496B
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202211644833.2
申请日:2022-12-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , A61K39/42 , A61P31/16 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种H7N9亚型禽流感病毒中和性单克隆抗体及应用,其中单克隆抗体为IgG1、κ型,单克隆抗体包括重链可变区氨基酸及轻链可变区氨基酸,重链可变区氨基酸序列包括SEQ ID No.5所示的HCDR1、SEQ ID No.6所示的HCDR2、SEQ ID No.7所示的HCDR3;轻链可变区氨基酸序列包括SEQ ID No.8所示的LCDR1、SEQ ID No.9所示的LCDR2、SEQ ID No.10所示的LCDR3。
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公开(公告)号:CN116355904A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310147990.0
申请日:2023-02-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , A61K9/127 , A61K47/28 , A61K47/24 , A61K31/7105 , A61P31/16 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种广谱抗流感病毒的长链非编码RNA(LncRNA#61)及其应用。LncRNA#61显著抑制各亚型流感病毒的复制,包括人源H1N1病毒以及各种高致病性和低致病性的禽流感病毒。本发明构建了基于脂质纳米颗粒体内递送LncRNA#61的lncRNA脂质纳米颗粒,基于该lncRNA脂质纳米颗粒递送的LncRNA#61发挥了良好的体内抗病毒效果。此外,解析了LncRNA#61的抗病毒机制,鉴定了其抗病毒关键功能区,发现其通过降低病毒聚合酶活性和抑制聚合酶蛋白核聚集发挥抗病毒作用。
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公开(公告)号:CN116286884A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310147988.3
申请日:2023-02-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/44 , C12N15/866 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了HA蛋白糖基化修饰模式改变的重组禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用。构建了三种表达不同糖基化修饰模式的H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白,然后基于前期构建的表达NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒,将分别表达HA、NA和M1蛋白的重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞,收获在细胞内自行组装的HA蛋白上包含不同修饰模式的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。制备的病毒样颗粒疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体。其中,当VLP疫苗HA蛋白的第38、133和158位同时发生糖基化修饰时效果最佳:显著增加抗原产量、显著提升VLP疫苗诱导的体液免疫、显著减轻SPF鸡的排毒和肺损伤。
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公开(公告)号:CN109207441B
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN201810912587.1
申请日:2018-08-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/11 , C12N15/866 , C12N15/34 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于疫苗制造技术领域。本发明公开了一种重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白。本发明还公开了用于构建重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的引物。本发明又公开了用于重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的构建方法,包括以下步骤:1、构建包含PCV3全基因组的pSK‑sPCV3;2、转移载体的构建;3、穿梭质粒的构建;4、重组杆状病毒的获得;将阳性穿梭质粒Bacmid‑Cap转染Sf9细胞,获得表达猪圆环病毒3型Cap基因的重组杆状病毒rBac‑Cap。本发明表达的Cap蛋白具有良好的生物学活性,免疫小鼠发现具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号:CN113024666B
公开(公告)日:2022-05-10
申请号:CN202110331083.2
申请日:2021-03-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了2株具有广谱性识别A型流感病毒NP蛋白的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体分别命名为3D4(CCTCCNO:C202177)、4B9(CCTCCNO:C202176),3D4的重链及轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.3所示,4B9重链及轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.3所示。本发明公开的2株单克隆抗体分别针对NP蛋白的不同抗原表位,除了均能够与H1~H11等不同HA亚型的禽流感病毒发生反应,还均能够结合H1和H3亚型的猪流感与人流感病毒,在识别不同亚型、不同宿主来源的A型流感病毒中均呈现良好的广谱性。
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公开(公告)号:CN106834241B
公开(公告)日:2021-01-19
申请号:CN201710120656.0
申请日:2017-03-02
Applicant: 扬州大学
Abstract: 嵌合型猪圆环病毒活疫苗C1‑402株及其构建方法,属于疫苗研究生产技术领域,包括PCV1、PCV2毒株的筛选、表达猪圆环病毒2d型ORF2基因的重组猪圆环病毒1型活载体疫苗株的构建、重组病毒核酸、氨基酸序列的组成特征与生物学特性。最终获得可用于工业化生产的表达猪圆环病毒2d型ORF2基因的重组猪圆环病毒1型活载体疫苗株(C1‑402株)。
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