红细胞富集与RT-PCR联合检测禽流感病毒方法

    公开(公告)号:CN1932042A

    公开(公告)日:2007-03-21

    申请号:CN200610041482.0

    申请日:2006-09-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 红细胞富集与RT-PCR联合检测禽流感病毒方法,本发明公开了一种鉴定病毒,特别是鉴定禽流感H5、H9亚型病毒的检测方法。先采用浓度为1%的红细胞凝集、解凝集,得到富集的禽流感病毒,然后用Trizol kit提取样本基因RNA,再进行反转录合成cDNA,然后进行一次性PCR扩增特定的多个基因,最后电泳鉴定。该方法联合多重RT-PCR检测临床样品,提高快速检测方法对禽流感临床样品检出率,进一步完善了RT-PCR方法在禽流感临床检测中的应用。本发明较常规的禽流感病毒富集方法简单、快速,尤其是对少量禽流感病毒的富集。

    断奶仔猪腹泻和猪水肿病的基因工程疫苗

    公开(公告)号:CN1683018A

    公开(公告)日:2005-10-19

    申请号:CN200510038480.1

    申请日:2005-03-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 断奶仔猪腹泻和猪水肿病的基因工程疫苗,属于畜牧兽医技术领域。依据faeG(F4)、fedA(F18)和Stx 2e B亚单位的基因序列,设计含特异酶切位点的引物;以致PWD、ED大肠杆菌的质粒或基因组DNA为模板,采用PCR法扩增出上述保护性抗原基因;将上述基因定向串联于表达性质粒pGEX-6P-1,经转化宿主菌BL21后,进行IPTG诱导表达,并经SDS-PAGE和Western-blot证明目的基因确已表达。再将表达上述3个保护性抗原基因的重组菌,不同途径免疫小鼠和猪,评价其免疫原性及安全性。试验表明,该疫苗可有效预防PWD和ED,安全性和免疫原性可靠,免疫保护率达80%以上。

    带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途

    公开(公告)号:CN114990078B

    公开(公告)日:2024-03-26

    申请号:CN202210754217.6

    申请日:2022-06-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途。基于已建立的基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株反向遗传操作系统,将His标签(6×His)与I4基因组全长转录载体pNDVI4中的HN基因融合,成功构建带有His标签的重组新城疫病毒基因组全长cDNA感染性克隆pNDVI4‑HN‑His。经转染得到重组新城疫病毒rNDVI4‑HN‑His,可通过标签蛋白抗体用于重组病毒HN蛋白的纯化及其与宿主蛋白互作研究。

    重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白及其构建方法与引物

    公开(公告)号:CN109207441B

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN201810912587.1

    申请日:2018-08-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于疫苗制造技术领域。本发明公开了一种重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白。本发明还公开了用于构建重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的引物。本发明又公开了用于重组杆状病毒表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的构建方法,包括以下步骤:1、构建包含PCV3全基因组的pSK‑sPCV3;2、转移载体的构建;3、穿梭质粒的构建;4、重组杆状病毒的获得;将阳性穿梭质粒Bacmid‑Cap转染Sf9细胞,获得表达猪圆环病毒3型Cap基因的重组杆状病毒rBac‑Cap。本发明表达的Cap蛋白具有良好的生物学活性,免疫小鼠发现具有良好的免疫原性。

    具有广谱性识别A型流感病毒NP蛋白的单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN113024666B

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN202110331083.2

    申请日:2021-03-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了2株具有广谱性识别A型流感病毒NP蛋白的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体分别命名为3D4(CCTCCNO:C202177)、4B9(CCTCCNO:C202176),3D4的重链及轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.3所示,4B9重链及轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.3所示。本发明公开的2株单克隆抗体分别针对NP蛋白的不同抗原表位,除了均能够与H1~H11等不同HA亚型的禽流感病毒发生反应,还均能够结合H1和H3亚型的猪流感与人流感病毒,在识别不同亚型、不同宿主来源的A型流感病毒中均呈现良好的广谱性。

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