公开(公告)号：CN118530350A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410947999.4

申请日：2024-07-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡娇 ,  胡增垒 ,  刘秀梵 ,  王宇飞 ,  胡顺林 ,  李建梅 ,  徐思怡 ,  顾敏 ,  王晓泉 ,  刘晓文

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种能够识别新型鸭呼肠孤病毒NDRV σC蛋白的单克隆抗体、制备方法及其应用，所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区包括如SEQ ID NO：3、4、5所示氨基酸序列的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述轻链可变区包括如SEQ ID NO：6、7、8所示氨基酸序列的VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3。本发明还公布了单克隆抗体的制备方法，及基于该抗体和σC兔多克隆抗体建立的双抗夹心ELISA方法。该方法可用于NDRV亚单位疫苗抗原的定量与动物免疫剂量的确定。该ELISA方法相较于文献报道的方法，操作更简单、实际应用潜力大。本发明为NDRV免疫效力评价与疫苗质量控制提供了新方法，可保障NDRV疫苗的升级换代。

公开(公告)号：CN118424050A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202310046795.9

申请日：2023-01-31

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡顺林 ,  刘秀梵 ,  郭丽丽 ,  王晓泉 ,  刘晓文 ,  陈玉

IPC: F42B15/01 ,  C04B35/645 ,  C04B35/581 ,  F42B15/34 ,  F42B10/66 ,  F02K9/80 ,  F02K9/97

Abstract: 本发明公开了新城疫病毒F蛋白标记疫苗株的构建方法及用途。利用新城疫病毒反向遗传操作平台，以2型副黏病毒的F蛋白胞外区及与之互作的HN蛋白杆状区替换NDV基因组的对应部分，拯救得到重组嵌合病毒rAI4‑TF。将其制成疫苗免疫SPF鸡3周后，用NDV强毒株JS‑5‑05进行感染，免疫鸡能够抵抗致死剂量NDV强毒的攻击，且在感染后的第7天通过血清学方法能区分出感染动物与免疫动物。该重组病毒可用于NDV标记疫苗的研发。

公开(公告)号：CN108524930A

公开(公告)日：2018-09-14

申请号：CN201810753407.X

申请日：2018-07-10

Applicant: 扬州优邦生物药品有限公司 ,  扬州大学

Inventor： 宋庆庆 ,  丁国伟 ,  刘晓文 ,  傅元华 ,  魏荣荣 ,  王晓泉 ,  李甜甜

IPC: A61K39/295 ,  A61K39/23 ,  A61K39/17 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  C12N7/00 ,  C12N7/06

CPC classification number: A61K39/12 ,  A61K2039/5252 ,  A61K2039/552 ,  A61K2039/70 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  C12N7/00 ,  C12N2750/14334 ,  C12N2750/14351 ,  C12N2750/14363 ,  C12N2760/18134

Abstract: 本发明提供了一种小鹅瘟—重组新城疫二联灭活疫苗及其制备方法。所述制备方法包括：1)健康易感染鹅、鸡胚的筛选；2)生产用毒液的制备；3)两种毒液效价的测定、浓缩、灭活、配比、制苗及分装。本发明制备的小鹅瘟—新城疫二联灭活疫苗通过免疫种鹅，使种鹅在产蛋期内血清、种蛋卵黄小鹅瘟、新城疫特异性抗体均处于较高水平，所孵化雏鹅出雏后能通过吸收卵黄产生良好的被动免疫保护效果。本疫苗具有安全性高、免疫效果好、副作用小等优点。

公开(公告)号：CN107435041A

公开(公告)日：2017-12-05

申请号：CN201710780006.9

申请日：2017-09-01

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘秀梵 ,  刘晶晶 ,  胡顺林 ,  刘晓文 ,  王晓泉

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12N7/00 ,  C12N15/85 ,  C12N2760/18021 ,  C12N2800/107

Abstract: 本发明涉及克服雏鸡新城疫母源抗体影响的嵌合新城疫病毒载体H9活疫苗候选株及其构建方法，所述新城疫疫苗株，它的保藏号CGMCC No.13797。其构建方法是利用已建立的在新城疫抗体存在时能够高效复制的嵌合病毒AI4-T4FHN的反向遗传操作平台，将禽流感H9N2毒株的HA序列插入AI4-T4FHN株基因组全长转录载体pNDV/rAI4-T4FHN中，得到重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆。经转染获得的重组病毒AI4-T4FHN-H9在鸡胚上具有较高的繁殖滴度，连续传代仍能稳定表达HA蛋白，同时能在新城疫高母源抗体水平的鸡体内有效复制，适合于疫苗的大规模生产，可用于制造疫苗。

公开(公告)号：CN106479983A

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201610994452.5

申请日：2016-11-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘秀梵 ,  孙中涛 ,  刘晓文 ,  许靖 ,  李群辉 ,  王晓泉 ,  胡娇 ,  顾敏 ,  胡顺林

IPC: C12N5/10 ,  C12N5/02 ,  C12Q1/02 ,  C12N7/00

CPC classification number: C12N5/0686 ,  C12N7/00 ,  C12N2503/02 ,  C12N2510/00 ,  C12N2760/16151 ,  G01N33/5044 ,  G01N2500/10

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体地涉及稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系。该细胞系是稳定表达人源TIGAR基因的MDCK细胞系TG-418-E5，其含有TIGAR编码基因序列，它的保藏号是CGMCC NO：12983。通过在MDCK细胞中稳定表达TIGAR基因，提高了细胞的抗凋亡能力，延长了重组细胞的存活时间。该方法不仅为研究MDCK的无血清全悬浮培养用于大规模生产细胞培养疫苗的应用奠定了基础，同时提高禽流感疫苗株的繁殖滴度节约了生产工艺成本。此外，TG-418-E5细胞系在抗禽流感病毒药物筛选、疫苗株筛选以及细胞培养疫苗的生产方面都展示出较好的应用前景。

公开(公告)号：CN118530351A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410948000.8

申请日：2024-07-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡娇 ,  刘秀梵 ,  胡增垒 ,  刘晓文 ,  王宇飞 ,  李建梅 ,  徐思怡 ,  顾敏 ,  王晓泉 ,  胡顺林

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种能够识别新型鸭呼肠孤病毒NDRV σB蛋白的单克隆抗体、制备方法及其应用。所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；重链可变区包括如SEQ ID NO：11、12、13所示氨基酸序列的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，轻链可变区包括如SEQ ID NO：14、15、16所示氨基酸序列的VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3；基于σB 6B9鼠单克隆抗体和σB兔多克隆抗体建立了用于σB蛋白定量的双抗夹心ELISA方法。该方法具有灵敏度高、线性范围广、成本低、操作方便、时间短等优势。该发明为NDRV亚单位疫苗的质量控制与免疫效力评价提供了新方法，也为NDRV疫苗的升级换代奠定基础。

公开(公告)号：CN117431343A

公开(公告)日：2024-01-23

申请号：CN202311653639.5

申请日：2023-12-05

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘晓文 ,  蔡淼 ,  刘秀梵 ,  王晓泉 ,  刘开拓 ,  胡顺林 ,  顾敏 ,  胡娇

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种检测鹅星状病毒、小鹅瘟病毒、H5亚型禽流感病毒的引物和探针组合及其应用。所述检测鹅星状病毒、小鹅瘟病毒、H5亚型禽流感病毒的引物和探针组合包括特异性检测鹅星状病毒的上游引物SEQ ID NO.1、下游引物SEQ ID NO.2、探针SEQ ID NO.3；特异性检测小鹅瘟病毒的上游引物SEQ ID NO.4、下游引物SEQ ID NO.5、探针SEQ ID NO.6；特异性检测H5亚型禽流感病毒的上游引物SEQ ID NO.7、下游引物SEQ ID NO.8、探针SEQ ID NO.9。本发明的引物和探针组合可用于同步检测鹅星状病毒、小鹅瘟病毒、H5亚型禽流感病毒，结合荧光定量PCR技术，检测结果特异性好、灵敏度高、病毒载量检测结果准确。只需提取一次核酸即可检测3种鹅的常见感染病毒，使整个检测过程更加快速、高效。

公开(公告)号：CN114574452B

公开(公告)日：2023-07-21

申请号：CN202111649942.9

申请日：2021-12-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 胡顺林 ,  刘秀梵 ,  朱珊珊 ,  王晓泉 ,  刘晓文 ,  陈玉

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/45 ,  C12N15/56 ,  C12N15/86 ,  A61K39/17 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开一种HN基因易位构建重组新城疫疫苗候选株VII‑HNF的方法及用途，利用已建立的基因VII型新城疫病毒致弱株AI4的反向遗传操作平台，将AI4基因组全长转录载体pNDV/AI4中的HN基因易位至F基因之前，得到F和HN基因易位编辑的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pNDV/rAI4‑HNF。经转染获得的重组病毒VII‑HNF在鸡胚上具有较高的繁殖滴度且毒力弱，可用于制造疫苗。

公开(公告)号：CN112326963A

公开(公告)日：2021-02-05

申请号：CN202011236849.0

申请日：2020-11-09

Applicant: 扬州大学

Inventor： 顾敏 ,  刘娇 ,  刘秀梵 ,  王晓泉 ,  胡娇 ,  胡顺林 ,  刘晓文

IPC: G01N33/569 ,  C07K14/11 ,  C07K1/22 ,  C12N15/44 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及A型流感病毒PB2cap蛋白的真核表达及其应用。本发明公开了真核表达的A型流感病毒PB2cap蛋白在检测A型流感病毒RNA帽结合活性中的应用。本发明构建了基于真核表达载体pCAGGS的真核表达质粒pCAGGS‑PB2cap(aa:318‑483)，并经瞬时转染将PB2cap进行真核表达，通过该表达蛋白与m7GTP在体外的结合能力来评估流感病毒的RNA帽结合活性，可为A型流感病毒PB2蛋白功能的差异研究提供新的检测指标。

公开(公告)号：CN106498092B

公开(公告)日：2019-05-07

申请号：CN201610960388.9

申请日：2016-10-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘秀梵 ,  张竹君 ,  吴其文 ,  刘东 ,  孙文强 ,  胡娇 ,  顾敏 ,  刘晓文 ,  胡顺林 ,  王晓泉 ,  刘慧谋

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生命科学与生物技术领域，涉及一种联合检测H5亚型禽流感病毒与新城疫强毒的一步法实时荧光定量PCR的试剂盒。该试剂盒包括引物、探针、及PCR试剂，所述引物及探针包括：(1)序列如SEQ ID NO：1‑3所示的检测H5亚型禽流感病毒的引物及探针：(2)序列如SEQ ID NO：4‑6所示的检测新城疫强毒的引物及探针。本发明所太守的试剂盒适用于H5亚型禽流感病毒和新城疫强毒的定量检测和流行病学实时监测。