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公开(公告)号：CN101560256A
公开(公告)日：2009-10-21
申请号：CN200910039842.7
申请日：2009-05-27
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及甘蔗宿根矮化病的防治技术领域，提出甘蔗宿根矮化病病菌多克隆抗体的制备方法，其步骤包括：(1)病原菌的分离培养，获取抗原；(2)取抗原与等量的弗氏完全佐剂混合，乳化，免疫家兔；(3)取抗原与等量的弗氏不完全佐剂混合，乳化，再免疫家兔，重复免疫多次，测定效价达到要求后，心脏采血，分离抗血清；(4)抗血清纯化、获得目标多克隆抗体。在本发明中，甘蔗宿根矮化病病菌分离自甘蔗蔗汁，基于此得到的多克隆抗体可特异性识别蔗汁中的甘蔗宿根矮化病病菌。用本发明制备的甘蔗宿根矮化病病菌多克隆抗体，具有特异性高，纯度及效价高，可长期保存的优点，这对今后在甘蔗科研及生产上用免疫学方法检测病原菌进行甘蔗宿根矮化病(RSD)诊断具有重要的现实意义。
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公开(公告)号：CN104313111A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410551558.9
申请日：2014-10-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明涉及甘蔗病害检验技术领域，提出一种用于甘蔗叶部真菌病害菌株致病性评价的感染方法，包括步骤有：菌株的准备、叶片的采集及预处理、感染叶片的准备、感染、培养、菌株的致病性评价，其特征在于：感染叶片的准备步骤是：把叶片剪成4～8cm的长段，用纸巾包住叶片的两端，放入灭过菌的培养皿内，并往叶片两端的纸巾滴加灭过菌的清水；感染步骤是：用扎孔器对培养皿中的叶片沿叶中脉两侧扎孔，用灭过菌的镊子夹菌丝块放到叶片扎有孔的位置上作为试验培养皿；本发明具有以下突出的实质性特点和显著进步：（1）感染需要的甘蔗叶片和菌丝块少；（2）感染后蔗叶可以控温及双重控湿，保证了病原菌发病对高温高湿的要求；（3）感染后有致病性的菌株发病显著、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN103205459A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310088894.X
申请日：2013-03-20
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域，提出一种真空渗透辅助农杆菌介导甘蔗遗传转化的方法，其包括步骤：（1）甘蔗心叶胚性愈伤组织的诱导及增殖；（2）含有目标基因的根癌农杆菌的活化与培养；（3）真空渗透辅助农杆菌侵染甘蔗胚性愈伤组织；（4）抗性材料的筛选与出苗；（5）抗性材料鉴定。本发明采用的真空渗透辅助农杆菌介导甘蔗遗传转化方法，在真空的情况下可促使农杆菌通过愈伤组织细胞间的空隙进入到深层的细胞，而且会在细胞的表面引起小伤口，致使植物分泌一些酚类物质以激活Ti质粒中T-DNA的剪切和转移，本发明完善了农杆菌介导的甘蔗遗传转化体系。与普通农杆菌介导法相比，本发明显著提高了甘蔗的遗传转化率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102329858B
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201110218585.0
申请日：2011-08-02
Abstract: 本发明涉及甘蔗病原菌检测领域，提出甘蔗黑穗病菌巢式PCR快速检测方法，包括基因组DNA提取、第一轮PCR扩增、第二轮PCR扩增、PCR扩增产物检测步骤，其中第一轮PCR扩增中采用真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS4和ITS5，第二轮PCR扩增中采用甘蔗黑粉菌核糖体基因转录间隔区ITS的特异引物Smut-L1和Smut-R2，本发明的实质性特点有：1、检测灵敏度极高，即使在甘蔗无黑穗病症状或者感染黑粉菌量极少时也能准确检测出黑穗病菌。2、特异性强，受其他菌类干扰小，准确率高。3、具有耗时短、检测速度快的特点，适用于甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病抗性鉴定早期无症状叶片检测等。
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公开(公告)号：CN102618648A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210094927.7
申请日：2012-04-01
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明公开了一种转BT基因甘蔗的检测引物组、检测试剂盒和利用根尖快速鉴定转Bt基因甘蔗的方法。该方法以甘蔗根尖为材料，操作简便，不用提取基因组DNA即可直接进行PCR检测，3小时可以得到检测结果，特异性与灵敏度高，省时省力，而且材料用量极少，不会伤害、影响被取材植株的生长。
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公开(公告)号：CN101603082B
公开(公告)日：2012-06-06
申请号：CN200910038727.8
申请日：2009-04-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产技术领域，提出一种甘蔗宿根矮化病菌的PCR快速检测方法，包括取甘蔗汁、蔗汁预处理、改良优化CTAB法提取RSD的基因组DNA、PCR扩增、电泳检测等步骤，其中电泳检测是将PCR扩增步骤的PCR产物经过5％聚丙烯酰胺凝胶电泳后于0.1％的硝酸银液中染色10分钟，用双蒸水清洗1-2次，然后再于显色液(1.5％NaOH，0.15％甲醛，)显色，后观测结果。本发明有如下突出特点和显著进步：1.检测快速、结果稳定，从大田取蔗汁起到得出检测结果只需8小时，且检测结果稳定。2.可以大批量检测，本发明仅需1～2mL甘蔗蔗汁，蔗汁采集方便不需要特殊设备，操作简单，可以进行批量化检测，一个熟练的技术人员每天可以检测800个以上样品。3.检测结果准确、灵敏度高，本发明在蔗汁前处理中能有效去除甘蔗蔗汁中蔗蜡等次生物质对RSD的DNA影响，获取DNA纯度高，PCR过程干扰较小，RSD的电泳结果准确可靠、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN101361459B
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN200810198634.7
申请日：2008-09-19
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产，提供一种去除甘蔗宿根矮化病菌、快速繁殖健康甘蔗种苗的方法，包括如下步骤：热水处理少量原种并生产、以其再生植株经斑点酶标免疫试验(DB-EIA)检测为阴性的茎尖为外植体，经诱导培养、继代增殖培养、促根培养、假植及二级或三级苗圃扩繁生产健康种苗，并在苗圃扩繁中注意砍种工具(蔗刀)的消毒，在种苗出圃用于大田生产用种前，抽样取蔗茎汁用DB-EIA检测RSD病菌，确保提供合格种苗。本发明的优点是：能彻底去除甘蔗种苗宿根矮病病原菌，年繁殖系数高达1万倍以上，且种苗无变异，具有快速、高效、安全的优点，适合工厂化、规模化、标准化生产甘蔗健康种苗。
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公开(公告)号：CN102204465A
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN201110099531.7
申请日：2011-04-20
Abstract: 本发明涉及植物抗病性鉴定技术领域，提出一种甘蔗黑穗病抗性鉴定方法，首先用微量新鲜甘蔗黑粉菌冬孢子分离培养出甘蔗黑粉菌异型交配型（+、-）单倍体担孢子，然后经过菌株扩大培养、接种、发病率调查、抗性评价等步骤，本发明具有以下突出的实质性特点和显著的进步：1、只需极少量甘蔗黑粉菌冬孢子经分离培养，即可满足接种需要，工作量小；2、异型交配型菌株能够超低温保存，经活化、扩大培养后可作接种源，无需每次鉴定都重新采取菌种并分离培养；3、本发明抗性鉴定历期短、灵敏性高；4、还可利用本发明的方法，鉴别出参试品种所抗感的黑穗病生理小种类型，有效指导甘蔗抗黑穗病育种及蔗区品种合理配置。
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