公开(公告)号：CN103589676A

公开(公告)日：2014-02-19

申请号：CN201310564900.4

申请日：2013-11-14

Applicant: 复旦大学

Inventor： 王洪海 ,  徐颖 ,  杨恩卓 ,  李光华 ,  宋娜

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明属于基因工程和卡介苗技术领域，具体为一种结核杆菌的重组卡介苗。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明的重组卡介苗，是将结核杆菌rv3425基因重组表达于卡介苗BCG中而构建获得，记为rBCG::Rv3425。这种新的重组卡介苗免疫小鼠后，小鼠外周血中CD4+，CD8+T淋巴细胞的比例均比BCG组明显增加，CD4+，CD8+T淋巴细胞在抗结核免疫中有重要作用。因此，重组卡介苗rBCG::Rv3425可以用于结核分枝杆菌的预防。

公开(公告)号：CN100457912C

公开(公告)日：2009-02-04

申请号：CN200510027966.5

申请日：2005-07-21

Applicant: 复旦大学

Inventor： 王洪海 ,  祝秉东 ,  郄亚卿 ,  王庆忠 ,  王九玲 ,  徐颖

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/74 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06

Abstract: 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和HIV/AIDS的蔓延，结核病发病率增高，成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因插入大肠杆菌—结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒，并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明，和BCG组相比，该保护性抗原得到了更高效的表达，并且所诱导的脾细胞IFN-γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的体液和细胞免疫水平。

公开(公告)号：CN100395342C

公开(公告)日：2008-06-18

申请号：CN200610028022.4

申请日：2006-06-22

Applicant: 复旦大学

Inventor： 王洪海 ,  王九玲 ,  张红梅 ,  郄亚卿 ,  祝秉东 ,  徐颖 ,  王庆忠

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/33 ,  C12N15/62 ,  A61K39/04 ,  A61P31/06

Abstract: 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和结核分枝杆菌与HIV的共感染，导致结核病发病率增高，成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因和BCG中缺失的结核分枝杆菌基因插入大肠杆菌—结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒，并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明，和BCG疫苗相比，保护性抗原得到了更高效的表达，原来缺失的Rv3425抗原也得到了表达，并且所诱导的小鼠脾细胞IFN-γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的细胞免疫水平。

公开(公告)号：CN1952168A

公开(公告)日：2007-04-25

申请号：CN200610117754.0

申请日：2006-10-30

Applicant: 复旦大学

Inventor： 王洪海 ,  王庆忠 ,  张鹭 ,  乐军 ,  张旻 ,  徐颖 ,  祝秉东 ,  王九龄 ,  郄亚卿

IPC: C12Q1/04 ,  C12Q1/18 ,  G01N27/26 ,  G01N30/72 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明属于分子生物学筛选新型抗结核药靶、疫苗抗原和检测新标志物领域，具体的说，本发明提供了一种筛选结核杆菌耐利福平药物的蛋白的方法：首先，培养耐多药菌株；其次，分别分离耐多药菌株和敏感菌株中的蛋白；再次，将耐多药菌株和敏感菌株中的蛋白进行对比，确定耐多药蛋白；最后，分离鉴定耐多药蛋白。本发明提供的方法可以准确分离鉴定结核杆菌耐多药蛋白，为深入了解结核杆菌的耐多药机理、临床耐多药株的快速检测及疫苗、药靶的开发提供新的途径。