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公开(公告)号:CN114350666A
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN202210096617.2
申请日:2022-01-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/82 , A01H5/04 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用。本发明分离克隆了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi并通过表达分析和组织染色对其启动子活性进行鉴定,进一步利用Pssi控制Cas9核酸酶的表达,开发出CRISPR/Cas9介导同源定向修复的无筛选标记系统。本发明表明,在转基因植物中,Pssi启动子可以驱动Cas9核酸酶在茎、茎尖和小穗高表达,而在愈伤组织、根、叶等器官中低表达或不表达;该系统能在单子叶植物中高效去除筛选标记基因,在T1代中即可获得大量的标记基因纯合删除植株,其筛选标记被完全删除的效率为55.6%,可以在转基因植物的后代中获取大量的无筛选标记基因植株。
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公开(公告)号:CN107177616B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201710384197.7
申请日:2017-05-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种多基因组装载体系统及其多基因组装方法。该系统包括1类接受载体、2类供给载体、以及可选择使用的能发生筛选标记自删除的供给质粒。该系统利用Cre/loxP重组系统和两组突变型loxP的不可逆重组位点,在Cre酶作用下,以野生型loxP位点的重组来实现供给载体整合到接受载体中,然后其一组突变型loxP的不可逆重组自动删除供给载体的骨架,只留下目的基因在接受载体上;重复2类供给载体交替与接受载体的组装,就能实现多基因的快速组装。本发明是目前最简单高效的多基因载体系统。因此本发明对重要的、复杂生物合成途径和重要农艺性状的多基因遗传工程操作提供了可操作的技术平台,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN107142276B
公开(公告)日:2020-11-13
申请号:CN201710368951.8
申请日:2017-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳合成花青素的转基因育种方法。本发明通过在作物中转入包含6个表达结构蛋白的基因和2个表达转录因子的基因的基因组合,获得种子胚乳为紫色的、合成花青素的转基因作物;6个结构蛋白为CHS、CHI、F3H、F3’H、DFR和ANS;2个转录因子为转录因子Pl和转录因子Lc。本发明是基于发明人发现2个调节基因和6个结构基因是在胚乳中高水平合成花青素所必需的,得到的研究成果。本发明首次在作物水稻的胚乳中实现了花青素的合成,并获得了无筛选标记的转基因“紫米”产品,可以直接用于食用,也可以作为原材料用于生产花青素的原料。本发明对于新的功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。
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公开(公告)号:CN105907780B
公开(公告)日:2020-02-21
申请号:CN201610283794.6
申请日:2016-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳生产虾青素的转基因育种方法。具体步骤为S1.根据育种作物的密码子偏好性,优化PSY、CrtI、BHY和BKT的4个基因的序列,将序列优化后的4个基因分别与育种作物胚乳表达启动子和质体转运肽融合,分别构建基因表达盒;将S1中的4个基因表达盒构建成植物转化载体,获得含PSY、CrtI、BHY和BKT的植物转化载体;将S2所述植物转化载体转化育种作物,获得种子胚乳为橙红色的合成虾青素的转基因作物。本发明实现虾青素在作物(尤其是水稻)种子胚乳中的合成,其产品即可以直接用于食用,也可以作为生产虾青素的原料,对于新型功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。
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公开(公告)号:CN107365776A
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201710708833.7
申请日:2017-08-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , C12Q1/68
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8205 , C12N15/8261 , C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Q2600/158
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,公开了一种影响水稻愈伤分化发育的EMP基因及其在水稻愈伤分化发育中的应用。所述EMP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;本发明的EMP基因与水稻愈伤分化发育相关,通过检测EMP基因的表达量,可以快速检测鉴定水稻愈伤再生能力;同时,过表达EMP基因,可提高水稻种愈伤分化能力,提高水稻遗传转化效率,进而改进以农杆菌介导的水稻转基因转化效率,对培育新的水稻品种具有重要意义。
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公开(公告)号:CN107365774A
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201710707937.6
申请日:2017-08-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/10 , C12Q1/68
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8218 , C12N15/8267 , C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Q2600/158
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,公开了一种影响水稻种子萌发发育的EMP基因及其在水稻种子萌发发育中的应用。所述EMP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;本发明的EMP基因与水稻种子萌发发育相关,通过检测EMP基因的表达量,可以快速检测鉴定水稻品种种子萌发发育水平;同时,过表达EMP基因,可提高水稻种子萌发发育水平,改良水稻种子萌发能力,培育新的水稻品种;也可减少或沉默水稻中EMP基因的表达,从而减缓其种子萌发能力,适用于种子贮藏,具有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN119752979A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411552320.8
申请日:2024-11-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种植物超多重基因编辑方法及其应用。本发明利用内含肽对筛选标记基因进行分段表达,构建得到了用于超多重基因编辑的载体组合。基于所述载体组合,本发明提供了一种植物超多重基因编辑方法,利用所述载体组合联合Golden gate克隆等即可实现超多重sgRNA表达盒的组装,进行基因的超多重编辑。本发明克服了目前多重编辑载体构建难度大及组装与转化过程中多个sgRNA表达盒不稳定,导致超多重编辑效率低的技术缺陷,具有构建过程简便、阳性率高、多重复sgRNA表达盒稳定等优势,且转化材料中多靶点同时编辑的频率高,能够快速获得丰富的突变体,在植物的基因功能的研究和作物分子育种方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN118546994A
公开(公告)日:2024-08-27
申请号:CN202410782253.2
申请日:2024-06-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在种子胚乳生产藏红花素的转基因育种方法。本发明根据水稻密码子偏好性,对玉米黄素前体合成相关基因CrtI、PSY、BHY、ORH、DXS、藏红花来源的CsCCD2L、CsUGT74AD1、CsUGT91P3、CsALDH3I1基因及栀子来源的GjCCD4a、GjUGT94E13、GjUGT74F8、GjALDH2C3基因进行优化,将优化所得玉米黄素前体合成相关基因分别与藏红花来源基因或栀子来源基因组合构建植物转化载体并转化水稻,获得能在水稻种子胚乳产藏红花素的转基因水稻,实现了藏红花素在水稻种子胚乳中的合成,其产品既可直接食用,也可作为藏红花素生产原料,有利于藏红花素的生产。
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公开(公告)号:CN118531063A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410770554.3
申请日:2024-06-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种能够在种子胚乳中生产人参皂苷CK的转基因水稻的构建方法。所述方法为:分别构建根据水稻密码子偏好性优化后的HMGS、HMGR、FPS、SQS、SQE、DS、CYP716A47、UGT1、DXS基因的表达盒,再基于所得基因的表达盒,将所述九个基因建成植物多基因转化载体后转化水稻,获得能够在种子胚乳生产人参皂苷CK的转基因水稻。本发明首次实现了人参皂苷CK在水稻种子胚乳中的合成,其产品既可以直接食用,也可以作为生产人参皂苷CK的原料,用于人参皂苷CK的提取。本发明不仅有利于人参皂苷CK的生产,也能极大的增加稻米的营养品质和经济价值,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN114524879B
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202111603075.5
申请日:2021-12-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY),从N端到C端,依次核定位信号bpNLS,脱氨酶TadA8e,DNA单链结合域DBD,SpCas9缺刻酶变体SpRYn,以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器,本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。
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