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公开(公告)号：CN107099531A
公开(公告)日：2017-08-29
申请号：CN201710369461.X
申请日：2017-05-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种花药特异表达启动子PV4及其应用。该启动子PV4的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；或是在严格条件下与SEQ ID NO:1限定的DNA序列杂交的DNA分子；或是与SEQ ID NO:1限定的DNA序列具有90％以上相似性，且能调控目的基因在花药中特异表达的DNA分子。本发明还提供了含有该启动子的用于无筛选标记的植物重组表达载体。该载体能在单子叶植物中去除筛选标记基因，培育无筛选标记转基因植物，在基因工程领域具有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN115725596A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202111016957.1
申请日：2021-08-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了S58控制亚非稻种间杂种不育的关键基因及其应用。本发明通过图位克隆、基因预测及表达分析，在亚非稻种间杂种不育遗传座位S58的定位区间中鉴定到了相关的候选基因，并明确了在非洲稻特异且紧密连锁的基因S58A1和S58A3是控制S58座位介导的亚非稻种间杂种不育的关键基因。在此基础上，通过将非洲稻中的S58A1和S58A3同时功能敲除，获得了自身育性正常的纯合突变系，利用此突变系与亚洲稻亲本杂交，可消除S58座位介导的杂种不育效应，获得育性恢复正常的突变型杂种，为实现水稻种间杂种优势利用，提高水稻产量提供了新的分子育种策略，具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN107099531B
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201710369461.X
申请日：2017-05-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种花药特异表达启动子PV4及其应用。该启动子PV4的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；或是在严格条件下与SEQ ID NO:1限定的DNA序列杂交的DNA分子；或是与SEQ ID NO:1限定的DNA序列具有90％以上相似性，且能调控目的基因在花药中特异表达的DNA分子。本发明还提供了含有该启动子的用于无筛选标记的植物重组表达载体。该载体能在单子叶植物中去除筛选标记基因，培育无筛选标记转基因植物，在基因工程领域具有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN114524879B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202111603075.5
申请日：2021-12-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY)，从N端到C端，依次核定位信号bpNLS，脱氨酶TadA8e，DNA单链结合域DBD，SpCas9缺刻酶变体SpRYn，以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器，本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。
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公开(公告)号：CN114990144A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210521633.1
申请日：2022-05-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶介导的DNA组装载体及其应用。本发明所述DNA组装载体包含一个由特异核苷酸序列、具有筛选标记功能的基因表达盒和缺刻酶位点组成的一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶组装元件(UNiE)，可用于长片段DNA克隆和多基因片段的高效组装。本发明同时将UNiE元件与多基因叠加系统(TGSII)相结合，构建了一个组装效率更高的新型多基因叠加系统(TGSII‑UNiE)，实现了对多基因的高效组装，具有效率高、操作简便和成本低的特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114657179A
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202210181702.9
申请日：2022-02-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp，涉及植物生物技术及基因工程领域。本发明成功分离并克隆了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp，克服了现有技术利用组成型启动子驱动标记基因，表达活性不高或特异性较低的不足。本发明还提供了在本启动子Pcsp的应用。该Pcsp启动子可以用来构建植物遗传转化和基因编辑载体，可以驱动标记基因、Cas核酸酶编码基因或特定功能基因在愈伤组织中特异高水平表达，表达水平约为组成型启动子P35S所驱动GUS的4倍；不影响转基因阳性植株正常生长的情况下，在植株组织器官中不表达，具有特异性，更安全，可解决生物安全方面的担忧；在基因编辑实验中周期短、成本低、灵敏度高，在植物遗传转化和基因工程领域具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114524879A
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202111603075.5
申请日：2021-12-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY)，从N端到C端，依次核定位信号bpNLS，脱氨酶TadA8e，DNA单链结合域DBD，SpCas9缺刻酶变体SpRYn，以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器，本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。
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公开(公告)号：CN114350666B
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202210096617.2
申请日：2022-01-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/82 , A01H5/04 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用。本发明分离克隆了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi并通过表达分析和组织染色对其启动子活性进行鉴定，进一步利用Pssi控制Cas9核酸酶的表达，开发出CRISPR/Cas9介导同源定向修复的无筛选标记系统。本发明表明，在转基因植物中，Pssi启动子可以驱动Cas9核酸酶在茎、茎尖和小穗高表达，而在愈伤组织、根、叶等器官中低表达或不表达；该系统能在单子叶植物中高效去除筛选标记基因，在T1代中即可获得大量的标记基因纯合删除植株，其筛选标记被完全删除的效率为55.6％，可以在转基因植物的后代中获取大量的无筛选标记基因植株。
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公开(公告)号：CN114657179B
公开(公告)日：2022-11-15
申请号：CN202210181702.9
申请日：2022-02-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp，涉及植物生物技术及基因工程领域。本发明成功分离并克隆了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp，克服了现有技术利用组成型启动子驱动标记基因，表达活性不高或特异性较低的不足。本发明还提供了在本启动子Pcsp的应用。该Pcsp启动子可以用来构建植物遗传转化和基因编辑载体，可以驱动标记基因、Cas核酸酶编码基因或特定功能基因在愈伤组织中特异高水平表达，表达水平约为组成型启动子P35S所驱动GUS的4倍；不影响转基因阳性植株正常生长的情况下，在植株组织器官中不表达，具有特异性，更安全，可解决生物安全方面的担忧；在基因编辑实验中周期短、成本低、灵敏度高，在植物遗传转化和基因工程领域具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114350666A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202210096617.2
申请日：2022-01-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/82 , A01H5/04 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用。本发明分离克隆了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi并通过表达分析和组织染色对其启动子活性进行鉴定，进一步利用Pssi控制Cas9核酸酶的表达，开发出CRISPR/Cas9介导同源定向修复的无筛选标记系统。本发明表明，在转基因植物中，Pssi启动子可以驱动Cas9核酸酶在茎、茎尖和小穗高表达，而在愈伤组织、根、叶等器官中低表达或不表达；该系统能在单子叶植物中高效去除筛选标记基因，在T1代中即可获得大量的标记基因纯合删除植株，其筛选标记被完全删除的效率为55.6％，可以在转基因植物的后代中获取大量的无筛选标记基因植株。
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