公开(公告)号：CN118546994B

公开(公告)日：2025-01-28

申请号：CN202410782253.2

申请日：2024-06-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 祝钦泷 ,  刘耀光 ,  刘涛利 ,  郑芷晔 ,  吴洋 ,  杭佳萱

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/29 ,  A01H6/46 ,  A01H5/10

Abstract: 本发明公开了一种在种子胚乳生产藏红花素的转基因育种方法。本发明根据水稻密码子偏好性，对玉米黄素前体合成相关基因CrtI、PSY、BHY、ORH、DXS、藏红花来源的CsCCD2L、CsUGT74AD1、CsUGT91P3、CsALDH3I1基因及栀子来源的GjCCD4a、GjUGT94E13、GjUGT74F8、GjALDH2C3基因进行优化，将优化所得玉米黄素前体合成相关基因分别与藏红花来源基因或栀子来源基因组合构建植物转化载体并转化水稻，获得能在水稻种子胚乳产藏红花素的转基因水稻，实现了藏红花素在水稻种子胚乳中的合成，其产品既可直接食用，也可作为藏红花素生产原料，有利于藏红花素的生产。

公开(公告)号：CN117659210A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311635845.3

申请日：2023-11-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 祝钦泷 ,  刘耀光 ,  郑芷晔 ,  刘涛利 ,  曾栋昌 ,  吴洋 ,  谭健韬

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/82 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明公开了一种用作植物双碱基编辑器的重组融合蛋白及其应用，所述重组融合蛋白包含从N端到C端依次连接的1个胞嘧啶脱氨酶、1个腺嘌呤脱氨酶、1个单链DNA结合结构域、1个SpCas9变体和2个尿嘧啶糖基化酶抑制蛋白。本发明克服了目前单碱基编辑器的碱基替换类型单一以及双碱基编辑器的编辑成功率低的技术缺陷，提供了一种高效的植物双碱基编辑器，同时编辑双碱基的效率高，具有无靶序列偏好性、编辑窗口窄且脱靶率低的优势，能够广靶向识别NG‑PAM并进行多靶点编辑，在植物的基因功能的研究和遗传改良方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN115925969A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202210810655.X

申请日：2022-07-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 祝钦泷 ,  刘耀光 ,  曾栋昌 ,  郑芷晔

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明公开了一种可实现DNA小片段精准删除的腺嘌呤碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含融合蛋白ABE8e‑EndoV，所述融合蛋白从N端到C端，依次包含腺嘌呤脱氨酶、Cas核酸酶的缺刻酶变体及肌苷I碱基删除修复核酸内切酶。本发明所述DNA小片段精准删除腺嘌呤碱基编辑器除了具有高效A‑G的碱基替换外，还具有可以产生从被脱氨的A碱基到Cas核酸酶蛋白切割位点区间的9‑13bp的小片段删除的特点。所述腺嘌呤碱基编辑器特别适用于动植物基因组中顺式作用元件的挖掘和研究，同时在目标基因的单碱基替换与饱和突变筛选等方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN119752979A

公开(公告)日：2025-04-04

申请号：CN202411552320.8

申请日：2024-11-01

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 祝钦泷 ,  刘耀光 ,  郑芷晔 ,  刘涛利 ,  吴洋 ,  黄迎韵

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明公开了一种植物超多重基因编辑方法及其应用。本发明利用内含肽对筛选标记基因进行分段表达，构建得到了用于超多重基因编辑的载体组合。基于所述载体组合，本发明提供了一种植物超多重基因编辑方法，利用所述载体组合联合Golden gate克隆等即可实现超多重sgRNA表达盒的组装，进行基因的超多重编辑。本发明克服了目前多重编辑载体构建难度大及组装与转化过程中多个sgRNA表达盒不稳定，导致超多重编辑效率低的技术缺陷，具有构建过程简便、阳性率高、多重复sgRNA表达盒稳定等优势，且转化材料中多靶点同时编辑的频率高，能够快速获得丰富的突变体，在植物的基因功能的研究和作物分子育种方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN118546994A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410782253.2

申请日：2024-06-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 祝钦泷 ,  刘耀光 ,  刘涛利 ,  郑芷晔 ,  吴洋 ,  杭佳萱

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/29 ,  A01H6/46 ,  A01H5/10

Abstract: 本发明公开了一种在种子胚乳生产藏红花素的转基因育种方法。本发明根据水稻密码子偏好性，对玉米黄素前体合成相关基因CrtI、PSY、BHY、ORH、DXS、藏红花来源的CsCCD2L、CsUGT74AD1、CsUGT91P3、CsALDH3I1基因及栀子来源的GjCCD4a、GjUGT94E13、GjUGT74F8、GjALDH2C3基因进行优化，将优化所得玉米黄素前体合成相关基因分别与藏红花来源基因或栀子来源基因组合构建植物转化载体并转化水稻，获得能在水稻种子胚乳产藏红花素的转基因水稻，实现了藏红花素在水稻种子胚乳中的合成，其产品既可直接食用，也可作为藏红花素生产原料，有利于藏红花素的生产。