公开(公告)号：CN115011599A

公开(公告)日：2022-09-06

申请号：CN202210596549.6

申请日：2022-05-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  李泳光 ,  李加琪 ,  方明 ,  吕嫒媛 ,  张哲 ,  张豪

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N9/64 ,  C12N15/57

Abstract: 本发明公开一种DNA甲基化调控MMP2基因转录的方法，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以MMP2基因启动子区DNA甲基化以及MMP2基因为研究对象，通过分析MMP2基因在卵泡发育过程中的表达与甲基化水平的关联，然后利用5‑Aza‑CdR或DNMT1‑siRNA、DNMT3A‑siRNA和DNMT3B‑siRNA验证MMP2基因启动子低甲基化促进其表达。本发明通过探究DNA甲基化调控MMP2基因转录表达机制的应用，对研究MMP2基因启动子区的DNA甲基化影响卵巢卵泡发育以及母猪初情启动等的分子机制具有一定的应用价值。

公开(公告)号：CN114934051A

公开(公告)日：2022-08-23

申请号：CN202210582494.3

申请日：2022-05-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  云冰 ,  李加琪 ,  吕媛媛 ,  周尹祺 ,  曾李清 ,  张豪 ,  袁晓龙 ,  陈赞谋

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  A61K31/7088 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明公开了LncRNA TAB2‑AS及其在猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明以lncRNA TAB2‑AS为研究对象，通过DNA甲基转移酶抑制剂5‑Aza‑CdR处理细胞，检测DNA甲基化对其转录的影响；通过核质分离实验和构建lncRNA的EGFP融合蛋白载体检测其亚细胞定位及其编码能力；通过构建lncRNA的过表达载体和合成其反义寡核苷酸，检测其对猪卵巢颗粒细胞功能的影响。本发明验证了DNA甲基化能抑制lncRNA TAB2‑AS的转录；阐明了其对猪卵巢颗粒细胞的影响：其能促进猪卵巢颗粒细胞增殖，抑制猪卵巢颗粒细胞凋亡。这对于研究卵巢卵泡发育、闭锁的机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN113388614A

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN202110476520.X

申请日：2021-04-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  周小枫 ,  李加琪 ,  潘向春 ,  何颖婷 ,  袁晓龙 ,  张豪

IPC: C12N15/113 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开一种RSPO2基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以RSPO2为研究对象，通过构建RSPO2超表达载体和合成小干扰RNA(RSPO2‑siRNA)，分别将RSPO2超表达载体或RSPO2‑siRNA转染到卵巢颗粒细胞，然后检测与卵巢颗粒细胞凋亡、增殖以及E2分泌相关的信号通路基因mRNA以及蛋白水平的变化，最后再检测卵巢颗粒细胞的表型变化。结果表明，RSPO2可抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和促进增殖以及E2分泌。本发明通过探究RSPO2在卵巢颗粒细胞中的应用，对于研究卵巢卵泡闭锁机制以及初情启动等具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN110384800B

公开(公告)日：2021-06-08

申请号：CN201910656119.7

申请日：2019-07-19

Applicant: 广东省实验动物监测所 ,  华南农业大学

Inventor： 王希龙 ,  张豪 ,  潘金春 ,  袁晓龙 ,  龚宝勇 ,  唐龙龙 ,  高洪彬 ,  李加琪 ,  谭伟江 ,  张哲 ,  梁十

IPC: A61K45/00 ,  A61K31/7088 ,  A61P9/10

Abstract: 本发明公开了lncRNA XLOC_075168在制备促进血管新生的药物中的应用。通过超表达和沉默lncRNA XLOC_075168证实其能够影响ATG7基因和蛋白在人脐静脉内皮细胞中的表达，同时还证实其参与促进人脐静脉内皮细胞增殖、抑制人脐静脉内皮细胞凋亡、促进人脐静脉内皮细胞小管形成，进一步说明lncRNA XLOC_075168可能参与促进心肌梗死后的血管新生。因此，lncRNA XLOC_075168或促进其表达的试剂可用于制备促进血管新生的药物，特别是可用于制备促进心肌梗死后血管新生的药物。

公开(公告)号：CN111789966B

公开(公告)日：2021-05-28

申请号：CN202010602776.6

申请日：2020-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  何颖婷 ,  张哲 ,  李加琪 ,  张豪 ,  陈赞谋

IPC: A61K49/00 ,  A61K31/428 ,  A61K31/445 ,  A61P15/08 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开了组蛋白甲基化H3K4me3在小鼠卵巢发育中的应用。本发明从活体水平及蛋白水平研究了H3K4me3对小鼠卵巢卵泡发育的影响，证实了H3K4me3程度提高能够促进小鼠卵巢卵泡发育、抑制小鼠卵泡凋亡、增加小鼠的窝产仔数和产仔窝重；小鼠性成熟前降低H3K4me3程度，能够抑制小鼠血液中GnRH和促性腺激素释放激素LH和FSH的分泌。本发明将为进一步在分子层面探究H3K4me3靶向调控小鼠卵巢卵泡发育关键基因的机制，进而调控卵巢卵泡发育的机制奠定基础。

公开(公告)号：CN108715848B

公开(公告)日：2021-03-16

申请号：CN201810386672.9

申请日：2018-07-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 辛晓萍 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  张哲 ,  何颖婷

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种转录因子CEBPα作为Kiss1启动子区的转录因子的应用，属于基因工程和细胞工程技术领域。本发明以转录因子CEBPα为研究对象，采用了生物信息学预测Kiss1启动子区潜在结合的转录因子CEBPα，研究该转录因子CEBPα在卵巢颗粒细胞中对Kiss1启动子区活性的影响，来达到该基因在卵巢颗粒细胞中的表达调控研究。本发明首次证实通过在猪卵巢颗粒细胞中转录因子CEBPα对Kiss1基因的表达调控和在卵巢颗粒细胞中的功能进行研究。本研究实验内容丰富，结果齐全、准确。

公开(公告)号：CN111979242A

公开(公告)日：2020-11-24

申请号：CN202010800561.5

申请日：2020-08-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 钟玉宜 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  张哲 ,  李念

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/071 ,  C12N15/87 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了H3K27me3调控Ssc-miR-143-3p转录在猪卵巢颗粒细胞中的应用。发明人预测Ssc-miR-143-3p基因启动子区存在H3K27me3修饰，Ssc-miR-143-3p是诱导颗粒细胞凋亡并参与卵泡发育、闭锁和成熟的重要表观遗传因子。发明人通过检测Ssc-miR-143-3p在猪窦状卵泡中的表达模式，并在超表达和干扰Ssc-miR-143-3p基因后检测了类固醇激素的合成水平和细胞凋亡情况，发现Ssc-miR-143-3p基因促进类固醇激素的合成，同时发现Ssc-miR-143-3p启动子区的H3K27me3修饰抑制Ssc-miR-143-3p的转录表达。

公开(公告)号：CN111789966A

公开(公告)日：2020-10-20

申请号：CN202010602776.6

申请日：2020-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  何颖婷 ,  张哲 ,  李加琪 ,  张豪 ,  陈赞谋

IPC: A61K49/00 ,  A61K31/428 ,  A61K31/445 ,  A61P15/08 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开了组蛋白甲基化H3K4me3在小鼠卵巢发育中的应用。本发明从活体水平及蛋白水平研究了H3K4me3对小鼠卵巢卵泡发育的影响，证实了H3K4me3程度提高能够促进小鼠卵巢卵泡发育、抑制小鼠卵泡凋亡、增加小鼠的窝产仔数和产仔窝重；小鼠性成熟前降低H3K4me3程度，能够抑制小鼠血液中GnRH和促性腺激素释放激素LH和FSH的分泌。本发明将为进一步在分子层面探究H3K4me3靶向调控小鼠卵巢卵泡发育关键基因的机制，进而调控卵巢卵泡发育的机制奠定基础。

公开(公告)号：CN111748559A

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN202010602465.X

申请日：2020-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  李加琪 ,  李丽莹 ,  袁晓龙 ,  张豪

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/87 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开CTNNB1基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明检测了猪不同时期卵巢组织、不同大小卵泡及其颗粒细胞中CTNNB1mRNA的相对表达量，以及超表达和抑制CTNNB1后颗粒细胞的增殖、凋亡及类固醇激素的分泌情况。结果显示，CTNNB1基因参与促进颗粒细胞的增殖和雌二醇的分泌，抑制颗粒细胞的凋亡和睾酮、孕酮的分泌，说明CTNNB1基因参与母猪卵巢卵泡的发育和成熟。本发明为母猪卵巢卵泡发育过程中的分子机制研究积累了材料。

公开(公告)号：CN110305870B

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN201910524967.2

申请日：2019-06-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  李加琪 ,  李忠慧 ,  张哲 ,  孔亚茹

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了p65基因在卵巢颗粒细胞中调控FGFR1基因的应用。本发明通过预测FGFR1基因启动子区p65潜在结合位点，以及通过启动子活性分析初步判定了p65基因对FGFR1基因启动子活性的调控作用，并在超表达和干扰p65基因后检测了FGFR1基因mRNA表达变化和FGFR1启动子活性，发现p65基因能够促进FGFR1基因mRNA的表达，且能增强FGFR1基因启动子活性，这为p65基因和FGFR1基因在卵巢颗粒细胞中的表达调控机制研究积累材料；同时，本发明的结果显示p65靶向结合于FGFR1启动子区促进FGFR1的转录表达。