公开(公告)号：CN110684777A

公开(公告)日：2020-01-14

申请号：CN201911104496.6

申请日：2019-11-13

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 高泽霞 ,  万世明 ,  聂春红 ,  陈宇龙

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了一段分离的核苷酸序列在肌间刺减少的斑马鱼构建中的应用，所述的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，利用本领域的常规方法，以SEQ ID NO.1为靶基因进行基因突变操作，筛选出发生突变的F0，对F0与野生型杂交产生的F1进行基因分型，筛选出突变体F1并自交，即可获得肌间刺数目显著减少70%以上且稳定遗传的斑马鱼少肌间刺品系。本发明利用一段分离的核苷酸序列首次获得了肌间刺减少的鱼类品系，且具有性状改良效果显著、育种时间短、遗传稳定、成本低等优点，具有科学研究的基础价值和应用价值，不仅能用于鱼类肌间刺发育机制研究，而且为获得多种鱼类少肌间刺的稳定遗传品系提供了方法。

公开(公告)号：CN104328119B

公开(公告)日：2017-10-10

申请号：CN201410654344.4

申请日：2014-11-17

Applicant: 华中农业大学 ,  湖北百容水产良种有限公司

Inventor： 高泽霞 ,  王卫民 ,  陈柏湘 ,  刘肖莲 ,  赵鸿昊 ,  万世明 ,  罗伟

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了团头鲂生长性状相关的微卫星分子标记及应用，本发明采用分群分离法，实现分子标记与性状的关联分析，最终筛选出两个与生长性状显著相关的分子标记，Mam116的引物为F:5’‑CTATTTACAGTTTCATGCTTTCCTC‑3’，R:5’‑ATCCCGTCCGCCGCTTACT‑3’；Mam166的引物为F:5’‑GGTACTGTTTGTGCTGGGC‑3’，R:5’‑CTGCTCACTCAACTTATTGTAGGTC‑3’。本发明对这两个标记进行不同基因型性状的多重比较，以确定劣势和优势等位基因，在团头鲂性状相关育种中选择含有正效基因型的个体作为选育亲本，避开含有负效基因型的个体，可减小实验工作量，加快育种效率。

公开(公告)号：CN103642797B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201310673534.6

申请日：2013-12-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 高泽霞 ,  万世明 ,  易少奎 ,  钟嘉 ,  王卫民

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种提取团头鲂肌间骨总RNA的方法，其步骤：1）以团头鲂为材料：取其肌间骨置于灭菌预冷的研钵中，研磨，至肌间骨研磨至粉末状后转入离心管中，加Trizol摇匀，室温放置；2）4℃，离心，取上清液，加入1/5体积的氯仿，摇晃，充分乳化为无分层的均匀白色乳液，室温放置；3）4℃，离心，取上清液用氯仿重复抽提；4）取上清液，加入等体积的异丙醇、柠檬酸钠、氯化钠混匀，-20℃静置；5）静置后，4℃，离心，弃上清液留沉淀，加DEPC水配置的乙醇，震荡，重复洗涤沉淀；6）4℃，离心，弃上清液留沉淀，自然晾干，加DEPC水溶解RNA，得总RNA溶液。过程简单，成本低，获得总RNA浓度高、纯度高、完整性好，满足进一步分子生物学研究。

公开(公告)号：CN103789441B

公开(公告)日：2015-06-03

申请号：CN201410056237.1

申请日：2014-02-19

Applicant: 华中农业大学 ,  中国科学院南海海洋研究所

Inventor： 万世明 ,  高泽霞 ,  罗伟 ,  赵鸿昊 ,  林强 ,  张艳红 ,  张辉贤

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于鉴别两个海马种群的SSR分子标记方法，利用日本海马和三斑海马的EST序列，共设计了六对SSR分子标记引物，分别为Hmo48、Hmo421、Hmo242、Hmo244、Htr6和Htr8，其中Hmo242和Hmo244属于日本海马与三斑海马共有引物；Hmo48和Hmo421属于日本海马特有引物，Htr6和Htr8属于三斑海马特有引物。提取海马DNA，利用以上引物对其进行PCR扩增。本发明公开的引物在两个海马种群间特异性极高，稳定性极强，因此将PCR产物进行常规的琼脂糖凝胶电泳检测，可快速判断海马种群，为海马遗传多样性的保护与良种的引进提供了参考。

公开(公告)号：CN103642797A

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201310673534.6

申请日：2013-12-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 高泽霞 ,  万世明 ,  易少奎 ,  钟嘉 ,  王卫民

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种提取团头鲂肌间骨总RNA的方法，其步骤：1）以团头鲂为材料：取其肌间骨置于灭菌预冷的研钵中，研磨，至肌间骨研磨至粉末状后转入离心管中，加Trizol摇匀，室温放置；2）4℃，离心，取上清液，加入1/5体积的氯仿，摇晃，充分乳化为无分层的均匀白色乳液，室温放置；3）4℃，离心，取上清液用氯仿重复抽提；4）取上清液，加入等体积的异丙醇、柠檬酸钠、氯化钠混匀，-20℃静置；5）静置后，4℃，离心，弃上清液留沉淀，加DEPC水配置的乙醇，震荡，重复洗涤沉淀；6）4℃，离心，弃上清液留沉淀，自然晾干，加DEPC水溶解RNA，得总RNA溶液。过程简单，成本低，获得总RNA浓度高、纯度高、完整性好，满足进一步分子生物学研究。