一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法

    公开(公告)号:CN106755602A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710182795.6

    申请日:2017-03-24

    Abstract: 本发明涉及一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法,属于植物保护领域;通过分别设计合成SPVG、SPLV和SPMMV的正向引物、反向引物和探针,建立同时检测三种病毒的实时荧光多重RT‑PCR方法,检测植物细胞色素氧化酶基因(COX)的引物和探针被作为内参纳入实时荧光多重RT‑PCR的体系构建,避免因模板核酸质量差导致的假阴性结果。本发明对SPVG的检测灵敏度达到10‑6核酸模板稀释倍数,对SPLV、SPMMV和COX的检测灵敏度分别达到10‑7核酸模板稀释倍数,具有直观、快速、高效、特异性强、灵敏度高等优点,可确保SPVG、SPLV和SPMMV在植物检疫和甘薯无毒种苗筛选等大量样品检测时的质量和效率,具有广阔的应用前景。

    利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法

    公开(公告)号:CN104267186B

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201410544959.1

    申请日:2014-10-16

    Abstract: 本发明提供一种利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法,属于植物保护领域。该发明通过对灰飞虱的采集和研磨后,利用水稻条纹病毒单克隆抗体,建立检测单头介体灰飞虱携带水稻条纹病毒的dot-ELISA体系。该检测方法灵敏度高、特异性强,适用于大批量的单头灰飞虱样品检测,且不需要特殊仪器设备,具有结果判定简单易行、检测结果便于长期保存等特点,可对田间灰飞虱携带水稻条纹病毒的带毒率进行大规模调查和检测,为田间水稻条纹叶枯病的爆发流行进行预测预报并采取相应的防控措施提供技术支撑。

    同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法

    公开(公告)号:CN102952901B

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201210492173.0

    申请日:2012-11-28

    Abstract: 本发明涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法,属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物,CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA,采用一步法四重RT-PCR,达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强,能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA,既能保证所提RNA的质量,也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成,极大地节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点,能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测,具有广阔的应用前景。

    同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法

    公开(公告)号:CN102952901A

    公开(公告)日:2013-03-06

    申请号:CN201210492173.0

    申请日:2012-11-28

    Abstract: 本发明涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法,属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物,CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA,采用一步法四重RT-PCR,达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强,能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA,既能保证所提RNA的质量,也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成,极大地节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点,能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测,具有广阔的应用前景。

    基于PEMV-1和PEMV-2侵染性克隆高效筛选抗病毒种质资源的方法

    公开(公告)号:CN115927757A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202211567418.1

    申请日:2022-12-07

    Abstract: 本发明涉及一种基于PEMV‑1和PEMV‑2侵染性克隆高效筛选抗病毒种质资源的方法;包括:农杆菌浸根步骤。本发明具有以下优点:1、本发明方法操作简便,具有比人工摩擦接种更省时、更方便的优点;2、本发明方法可以通过调节侵染性克隆的浓度来控制病毒的接种量,同一批次的不同植株之间接种量误差小;3、本发明方法中一种侵染性克隆只具有一种病毒的侵染活性,解决了毒源不纯的问题,满足了要求特定病原接种的实验条件;4、本发明方法接种效果好,对植株的侵染率高;5、本发明方法使植株获毒时间早,病毒在植株体内积累的时间长;6、本发明方法成本相对较低,接种操作时间短。

    一种同步检测ZYMV、PRSV和ZTMV的方法

    公开(公告)号:CN111455109B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202010294114.7

    申请日:2020-04-15

    Abstract: 本发明涉及一种同步检测ZYMV、PRSV和ZTMV的方法,属于植物保护领域,本发明通过设计ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒的特异性检测引物,并采用CTAB法提取感病样品总核酸作为模板,利用一步法多重RT‑PCR技术实现同时检测ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒。通过反应体系与反应条件的优化,该方法可以高效、准确实现对ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒的特异性检测,较传统RT‑PCR检测过程中只能检测单一病毒具有更高的效率,降低了检测成本,又可以保证检测结果的准确性,在上述3种病毒病检测中具有广阔的应用前景。

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