一种基于ES-DMA-CPC测定蛋白或蛋白复合体分子量的方法

    公开(公告)号:CN120043916A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510226124.X

    申请日:2025-02-27

    Abstract: 本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC测定蛋白或蛋白复合体分子量的方法,包括以下步骤:(1)采用ES‑DMA‑CPC测定已知分子量蛋白质的粒径信息;(2)根据已知蛋白质的分子量信息与ES‑DMA‑CPC测得的粒径信息进行多项式拟合,建立蛋白质分子量‑粒径拟合的标准曲线;(3)未知蛋白质或蛋白质复合体的分子量测定:将待测蛋白样品通过ES‑DMA‑CPC进行分析,获得待测样品的粒径信息,根据已建立的蛋白质分子量‑粒径标准曲线,计算得到待测蛋白质或蛋白质复合体的分子量。采用本发明方法可对结构复杂的蛋白质进行分子量测定,还可以保持生物复合物结构稳定性,实现对蛋白质复合体分子量的测定。

    用于富集外泌体的DNA四面体复合磁性纳米材料及制备

    公开(公告)号:CN114459877A

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN202111554661.5

    申请日:2021-12-17

    Abstract: 本发明涉及复合磁性纳米材料及外泌体富集技术领域,提供了一种用于富集外泌体的DNA四面体复合磁性纳米材料及制备,在制备四氧化三铁磁核的表面,通过沉淀聚合法修饰带有活性反应基团的聚合物;然后通过共价键将DNA四面体稳定地固载在磁球表面,最后利用DNA四面体的磷酸基团的螯合作用固载金属离子。该材料可通过金属离子与外泌体磷脂双分子层的特异性相互作用,实现对外泌体的分离富集。本发明首次以DNA四面体中的磷酸基团为作用位点固载金属离子,利用DNA四面体特殊的刚性骨架及空间特性,可以有效地提高对外泌体的富集效率。使用该材料富集外泌体的操作过程便捷、快速,并且避免了离心操作造成的样品损失。

    人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法

    公开(公告)号:CN113004398B

    公开(公告)日:2022-03-22

    申请号:CN202110259059.2

    申请日:2021-03-10

    Abstract: 本发明公开了一种人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法,该方法包括如下步骤:针对病毒抗原进行噬菌体抗体库筛选,获得达到亲和力阈值需求的IgG原型抗体;对筛选得到的异源抗体进行人源化改造获得人源化IgG单克隆抗体;对筛选得到的人源抗体进行框架优化;需要时后续还可对获得的人源化IgG单克隆抗体进行体外亲和力成熟;表达、纯化以获得人源化IgG单克隆抗体标准物质原料;对人源化IgG单克隆抗体标准物质原料进行纯度表征,蛋白质活性表征和结构表征;在纯度充分表征和结构确证与目标抗体序列一致的基础上,经均匀性、稳定性检验,采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法对单克隆抗体标准物质进行定值。

    基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法

    公开(公告)号:CN110873683B

    公开(公告)日:2021-08-03

    申请号:CN201911225128.7

    申请日:2019-12-04

    Abstract: 本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法,包括如下步骤:1)准备待测目标蛋白;2)待测蛋白样品用乙酸铵缓冲液稀释;3)配制蔗糖溶液,样品通过进样泵注入电喷雾气溶胶发生器中,通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴,液滴蒸发干燥后,带电粒子通过差分电迁移率纳米柱;使用蔗糖溶液进行液滴尺寸计算;4)将蛋白样品分别通过进样泵注入电喷雾气溶胶颗粒发生器中,通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴,液滴蒸发干燥后,带电粒子通过差分电迁移率分析,由粒子计数器获得蛋白样品的粒径分布;5)线性回归拟合获得单体Cp1和二聚体Cp2的绝对数浓度,然后确定三聚体浓度Cp3;求和来确定待测目标蛋白质样品的原始浓度。

    人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法

    公开(公告)号:CN113004398A

    公开(公告)日:2021-06-22

    申请号:CN202110259059.2

    申请日:2021-03-10

    Abstract: 本发明公开了一种人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法,该方法包括如下步骤:针对病毒抗原进行噬菌体抗体库筛选,获得达到亲和力阈值需求的IgG原型抗体;对筛选得到的异源抗体进行人源化改造获得人源化IgG单克隆抗体;对筛选得到的人源抗体进行框架优化;需要时后续还可对获得的人源化IgG单克隆抗体进行体外亲和力成熟;表达、纯化以获得人源化IgG单克隆抗体标准物质原料;对人源化IgG单克隆抗体标准物质原料进行纯度表征,蛋白质活性表征和结构表征;在纯度充分表征和结构确证与目标抗体序列一致的基础上,经均匀性、稳定性检验,采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法对单克隆抗体标准物质进行定值。

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