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公开(公告)号：CN115773977B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202211537689.2
申请日：2022-12-01
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC颗粒计数的蛋白质定量方法，包括以下步骤：(1)校准因子的测定；(2)已知校准因子的蛋白样品的定量：按照步骤(1)由蛋白标准物质得到该类蛋白质的校准因子，对该类已知校准因子的蛋白样品进行定量时，将蛋白样品通过ES‑DMA‑CPC进行分析，获得检测到的粒子总数CCPC，根据校准因子，计算得到待测蛋白质样品的浓度；(3)未知校准因子的蛋白质样品的定量方法。本发明方法不会受到免疫反应中蛋白活性和标记效率等因素的影响；采用本发明方法可直接测定溶液中的蛋白含量，无需将其进行酶切等前处理。
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公开(公告)号：CN115773977A
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN202211537689.2
申请日：2022-12-01
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC颗粒计数的蛋白质定量方法，包括以下步骤：(1)校准因子的测定；(2)已知校准因子的蛋白样品的定量：按照步骤(1)由蛋白标准物质得到该类蛋白质的校准因子，对该类已知校准因子的蛋白样品进行定量时，将蛋白样品通过ES‑DMA‑CPC进行分析，获得检测到的粒子总数CCPC，根据校准因子，计算得到待测蛋白质样品的浓度；(3)未知校准因子的蛋白质样品的定量方法。本发明方法不会受到免疫反应中蛋白活性和标记效率等因素的影响；采用本发明方法可直接测定溶液中的蛋白含量，无需将其进行酶切等前处理。
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公开(公告)号：CN111504870A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010414964.6
申请日：2020-05-15
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N15/06
Abstract: 本发明涉及药品中聚集体颗粒浓度检测领域，具体涉及一种检测样品中聚集体颗粒在目标粒径下浓度的非标记方法。该方法包括：在流式细胞仪上分别采用FSC和SSC通道检测所述样品在激发的前向散射光和侧向散射光，其中，目标粒径为0.1-1μm区间，FSC检测电压405-435V，SSC检测电压290-310V，SSC阈值600-1200；目标粒径为1μm以上区间，FSC检测电压175-205V，SSC检测电压120-140V，SSC阈值600-1200。采用本发明的方法能够同时对样品中1微米以下和200纳米以上的可溶性聚集体颗粒以及1微米以上的不溶性聚集体颗粒进行高灵敏度、高分辨率和精准定量地检测。
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公开(公告)号：CN117665182A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311605534.2
申请日：2023-11-28
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种分步还原差异烷基化解析胰岛素三对二硫键的方法。首先进行GluC酶切处理，再进行TCEP部分还原，NEM烷基化，再进行DTT彻底还原，IAM差异烷基化处理，结合高精度、高通量的液质联用检测，得到质谱数据后采用高效的软件分析进行准确快速且稳定可重复的数据分析，可获得胰岛素具体的预期二硫键连接位置与连接比例，以及非预期二硫键连接方式及相对比例，并且通量较大，其定位更加准确，准确性更高，操作相对简单，易于实现。
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公开(公告)号：CN113125599B
公开(公告)日：2021-12-14
申请号：CN202110390063.2
申请日：2021-04-12
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种基于肽段同位素稀释质谱法的IgG抗体定值方法，包括如下步骤：特征肽段选择：根据人源IgG抗体恒定区的氨基酸序列，确定ALPAPIEK，GPSVFPLAPSSK，DSTYSLSSTLTLSK三条人源IgG恒定区肽段为定值的特征肽段；特征肽段纯度的准确测定；特征肽段质谱参数的优化：包括特征肽段质谱分析离子对的确定，定量离子对的各质谱参数的优化；特征肽段线性范围的确定；人源IgG抗体蛋白样本分析前处理，主要步骤有：酶切条件优化、人源IgG抗体蛋白酶切、浓缩样品；样品酶切溶液质谱分析后，根据公式计算人源IgG抗体蛋白样品中特征肽段含量，根据人源IgG抗体蛋白和特征肽段的分子量计算溶液中人源IgG抗体蛋白的浓度作为标准物质的定值结果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110873683A
公开(公告)日：2020-03-10
申请号：CN201911225128.7
申请日：2019-12-04
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法，包括如下步骤：1)准备待测目标蛋白；2)待测蛋白样品用乙酸铵缓冲液稀释；3)配制蔗糖溶液，样品通过进样泵注入电喷雾气溶胶发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率纳米柱；使用蔗糖溶液进行液滴尺寸计算；4)将蛋白样品分别通过进样泵注入电喷雾气溶胶颗粒发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率分析，由粒子计数器获得蛋白样品的粒径分布；5)线性回归拟合获得单体Cp1和二聚体Cp2的绝对数浓度，然后确定三聚体浓度Cp3；求和来确定待测目标蛋白质样品的原始浓度。
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公开(公告)号：CN120043916A
公开(公告)日：2025-05-27
申请号：CN202510226124.X
申请日：2025-02-27
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N15/02 , G01N15/1031
Abstract: 本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC测定蛋白或蛋白复合体分子量的方法，包括以下步骤：(1)采用ES‑DMA‑CPC测定已知分子量蛋白质的粒径信息；(2)根据已知蛋白质的分子量信息与ES‑DMA‑CPC测得的粒径信息进行多项式拟合，建立蛋白质分子量‑粒径拟合的标准曲线；(3)未知蛋白质或蛋白质复合体的分子量测定：将待测蛋白样品通过ES‑DMA‑CPC进行分析，获得待测样品的粒径信息，根据已建立的蛋白质分子量‑粒径标准曲线，计算得到待测蛋白质或蛋白质复合体的分子量。采用本发明方法可对结构复杂的蛋白质进行分子量测定，还可以保持生物复合物结构稳定性，实现对蛋白质复合体分子量的测定。
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公开(公告)号：CN113004398B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202110259059.2
申请日：2021-03-10
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法，该方法包括如下步骤：针对病毒抗原进行噬菌体抗体库筛选，获得达到亲和力阈值需求的IgG原型抗体；对筛选得到的异源抗体进行人源化改造获得人源化IgG单克隆抗体；对筛选得到的人源抗体进行框架优化；需要时后续还可对获得的人源化IgG单克隆抗体进行体外亲和力成熟；表达、纯化以获得人源化IgG单克隆抗体标准物质原料；对人源化IgG单克隆抗体标准物质原料进行纯度表征，蛋白质活性表征和结构表征；在纯度充分表征和结构确证与目标抗体序列一致的基础上，经均匀性、稳定性检验，采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法对单克隆抗体标准物质进行定值。
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公开(公告)号：CN110873683B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201911225128.7
申请日：2019-12-04
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法，包括如下步骤：1)准备待测目标蛋白；2)待测蛋白样品用乙酸铵缓冲液稀释；3)配制蔗糖溶液，样品通过进样泵注入电喷雾气溶胶发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率纳米柱；使用蔗糖溶液进行液滴尺寸计算；4)将蛋白样品分别通过进样泵注入电喷雾气溶胶颗粒发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率分析，由粒子计数器获得蛋白样品的粒径分布；5)线性回归拟合获得单体Cp1和二聚体Cp2的绝对数浓度，然后确定三聚体浓度Cp3；求和来确定待测目标蛋白质样品的原始浓度。
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公开(公告)号：CN113004398A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110259059.2
申请日：2021-03-10
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法，该方法包括如下步骤：针对病毒抗原进行噬菌体抗体库筛选，获得达到亲和力阈值需求的IgG原型抗体；对筛选得到的异源抗体进行人源化改造获得人源化IgG单克隆抗体；对筛选得到的人源抗体进行框架优化；需要时后续还可对获得的人源化IgG单克隆抗体进行体外亲和力成熟；表达、纯化以获得人源化IgG单克隆抗体标准物质原料；对人源化IgG单克隆抗体标准物质原料进行纯度表征，蛋白质活性表征和结构表征；在纯度充分表征和结构确证与目标抗体序列一致的基础上，经均匀性、稳定性检验，采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法对单克隆抗体标准物质进行定值。
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