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公开(公告)号:CN109776661B
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN201910187085.1
申请日:2019-03-13
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供一种鸡尾酒抗原,用作牛结核病γ干扰素ELISA试验第一步的刺激抗原。该鸡尾酒刺激抗原可以替代现有的牛型、禽型PPD刺激抗原,简化检测的步骤,而且还可以用于区分待检测的牛是否经过疫苗免疫或发生了自然感染。本发明所提供的鸡尾酒抗原,包含有ESAT6抗原、CFP10抗原、FixB抗原和Rv3615c抗原,其中ESAT6抗原、CFP10抗原、FixB抗原和Rv3615c抗原的质量比为2:2:1:1。本发明的鸡尾酒抗原用于制备牛结核病γ干扰素ELISA检测用的刺激抗原。本发明制备的鸡尾酒抗原无需同时使用牛型PPD和禽型PPD就可以排除非特异性分枝杆菌感染。使用本发明组合抗原的刺激上清中就会产生大量的γ‑干扰素,从而对疫苗免疫和野毒株自然感染进行鉴别诊断。
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公开(公告)号:CN114790490A
公开(公告)日:2022-07-26
申请号:CN202210221474.3
申请日:2022-03-09
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供了一种可区分牛种和羊种布鲁氏菌的分子标记和检测方法,其中可识别所有种布鲁氏菌的特异性核苷酸片段的序列为SEQ ID NO:1;用于检测牛种布鲁氏菌的特异性分子标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:5;用于检测羊种布鲁氏菌的特异性分子标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:9。本发明还通过用于检测上述特异性核算片段的引物对和探针。本发明制备的BSCP引物和探针具有通用性,可检测所有种的布鲁氏菌,引物探针不但可以独立使用,也可以制备成三重实时荧光定量PCR方法,用于布鲁氏菌种的鉴定。检测的样品可以是分离的菌株,也可以是临床收集的流产物、奶、拭子、组织等样品,而且具有高敏感性、高特异性等特点。
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公开(公告)号:CN114134240A
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202111489999.7
申请日:2021-12-08
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Inventor: 樊晓旭 , 孙明军 , 刘婷婷 , 田莉莉 , 张皓博 , 孙翔翔 , 刘蒙达 , 孙世雄 , 亓菲 , 焉鑫 , 张志 , 迟庆安 , 冯淑芳 , 仵国政 , 付树芳 , 魏润宇 , 张培培 , 王毓秀 , 邵卫星 , 孙淑芳 , 范伟兴
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种通用快速检测动物布鲁氏菌病的引物、探针及检测方法,其中引物和探针适用于RAA荧光法检测,可实现在33℃条件下20分钟内完成动物布鲁氏菌核酸的检测;与猪链球菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、牛分枝杆菌核酸样本无交叉反应,特异性达100%;检测方法快速、容易实现高通量,同时降低了检测时间和检测成本,本发明提供的基于RAA荧光法通用快速检测动物布鲁氏菌病病原的方法,灵敏度高,反应检测灵敏度在35%的概率下达到56copies/反应。
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公开(公告)号:CN109813576B
公开(公告)日:2021-04-02
申请号:CN201910225723.4
申请日:2019-03-25
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: G01N1/14 , G01N33/531
Abstract: 本发明首先提供一种牛结核病刺激上清制备用采血器,包含有内筒以及采血器常用的其它组件,且在采血器的内筒内放入有肝素和鸡尾酒抗原的混合物,所述的鸡尾酒抗原包括ESAT6、CFP10、FixB和Rv3615c蛋白。本发明通过对传统方法的简化,仅需采血、孵育后即可直接进行检测。整个试验流程在普通实验室即可进行,每人进行50头牛的刺激上清检测即可节约4小时。使得原本纷繁复杂的牛结核病的γ‑干扰素试验,变得极易普及。同时,本采血器内使用的鸡尾酒抗原可以排除疫苗免疫造成的假阳性反应。
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公开(公告)号:CN109813576A
公开(公告)日:2019-05-28
申请号:CN201910225723.4
申请日:2019-03-25
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: G01N1/14 , G01N33/531
Abstract: 本发明首先提供一种牛结核病刺激上清制备用采血器,包含有内筒以及采血器常用的其它组件,且在采血器的内筒内放入有肝素和鸡尾酒抗原的混合物,所述的鸡尾酒抗原包括ESAT6、CFP10、FixB和Rv3615c蛋白。本发明通过对传统方法的简化,仅需采血、孵育后即可直接进行检测。整个试验流程在普通实验室即可进行,每人进行50头牛的刺激上清检测即可节约4小时。使得原本纷繁复杂的牛结核病的γ-干扰素试验,变得极易普及。同时,本采血器内使用的鸡尾酒抗原可以排除疫苗免疫造成的假阳性反应。
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公开(公告)号:CN109776661A
公开(公告)日:2019-05-21
申请号:CN201910187085.1
申请日:2019-03-13
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供一种鸡尾酒抗原,用作牛结核病γ干扰素ELISA试验第一步的刺激抗原。该鸡尾酒刺激抗原可以替代现有的牛型、禽型PPD刺激抗原,简化检测的步骤,而且还可以用于区分待检测的牛是否经过疫苗免疫或发生了自然感染。本发明所提供的鸡尾酒抗原,包含有ESAT6抗原、CFP10抗原、FixB抗原和Rv3615c抗原,其中ESAT6抗原、CFP10抗原、FixB抗原和Rv3615c抗原的质量比为2:2:1:1。本发明的鸡尾酒抗原用于制备牛结核病γ干扰素ELISA检测用的刺激抗原。本发明制备的鸡尾酒抗原无需同时使用牛型PPD和禽型PPD就可以排除非特异性分枝杆菌感染。使用本发明组合抗原的刺激上清中就会产生大量的γ-干扰素,从而对疫苗免疫和野毒株自然感染进行鉴别诊断。
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