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公开(公告)号:CN114350633B
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202111661755.2
申请日:2021-12-31
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C07K16/40 , G01N33/573
Abstract: 本发明具体涉及一种DNA甲基转移酶1的抗原肽及其多克隆抗体,属于分子克隆技术领域。本发明根据NCBI公布的预测的猪DNMT1序列,通过RT‑PCR扩增得到了猪的DNMT1基因,利用真核表达系统构建了pFlag14‑DNMT1(cloned)重组质粒,从猪DNMT1蛋白序列开始分析,构建能够得到符合后续检测要求的猪DNMT1蛋白合成肽多克隆抗体。本发明公开多克隆抗体检测灵敏度高、特异性强,适用于人、猪、猴、牛、犬源DNMT1蛋白的快速检测和相关研究。
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公开(公告)号:CN117860880A
公开(公告)日:2024-04-12
申请号:CN202410034558.5
申请日:2024-01-10
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种依赖于RdRp的非洲猪瘟taRNA疫苗及其构建方法和应用,属于生物医药技术领域。本发明提供的taRNA疫苗的构建方法包括如下步骤:构建表达JEV RdRp的复制型mRNA质粒pJEV‑T7‑NS5;构建表达非洲猪瘟病毒p30、p54和B602L蛋白的核苷酸序列P2A‑p30‑T2A、P2A‑p54‑T2A和P2A‑B602L‑T2A;用上述序列替代所述pJEV‑T7‑NS5中的NS5序列,得到相应质粒;体外转录上述质粒制备相应的线性mRNA;将所述线性mRNA添加疫苗佐剂制备成非洲猪瘟taRNA疫苗。该疫苗能够有效的刺激小鼠产生相应的体液免疫和细胞免疫应答。
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公开(公告)号:CN116622740A
公开(公告)日:2023-08-22
申请号:CN202310202220.1
申请日:2023-03-04
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/31 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K14/315
Abstract: 本发明涉及一种编码猪链球菌保护性抗原的基因序列、蛋白及其应用。本发明通过人工合成SEQ.No:1所示的核苷酸序列;使用带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物对对核苷酸序列进行扩增,得到目的基因PCR产物和pET‑28a阳性质粒使用EcoRⅠ和XhoⅠ酶进行双酶切处理后连接后,诱导重组蛋白aa‑ABC的表达,得到保护性抗原aa‑ABC,其可以显著提高小鼠的抗体水平,并可对2型、7型和9型猪链球菌感染提供较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN113981151A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202111478453.1
申请日:2021-12-06
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的方法及其试剂盒,属于病毒分子检测领域。为克服临床上缺少对基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒鉴别的方法,本发明提供一种基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的鉴别方法以及引物和探针,所涉及引物和TaqMan探针是依据乙脑病毒的prM/M基因保守区和盖他病毒的E2基因保守区进行设计,其可以有效鉴别乙脑病毒和盖他病毒,具有较高特异性和灵敏度的优点,可以为乙脑病毒和盖他病毒基因型的快速检测、临床诊断以及流行病学调查提供更好的方法支持。
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公开(公告)号:CN110468107A
公开(公告)日:2019-11-19
申请号:CN201910735386.3
申请日:2019-08-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系,该细胞系通过慢病毒颗粒感染原代猪扁桃体细胞系,并在添加嘌呤霉素的含血清的DMEM/F12培养液中进行细胞筛选,再将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养获得的;该慢病毒颗粒是通过以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体,以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体,共同转染进入293T细胞中获得的。本发明的细胞系具有无限传代的功能,对JEV敏感,可以用于相关研究。
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公开(公告)号:CN118127078A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410123235.3
申请日:2024-01-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用,属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架,在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基因,成功构建了能够高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白的pJEV‑CMV‑p54复制子质粒,pJEV‑CMV‑p54具有自我复制能力,并能高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白,为ASFV疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号:CN116179572A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310208576.6
申请日:2023-03-04
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/31 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K14/315
Abstract: 本发明涉及猪链球菌保护性抗原ESPss的基因序列、表达方法及其应用,属于动物免疫技术领域。本发明通过人工合成的ESPss蛋白的核苷酸序列;使用带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物对对核苷酸序列进行扩增,得到目的基因PCR产物和pET‑28a阳性质粒使用EcoRⅠ和XhoⅠ酶进行双酶切处理后连接后,诱导重组ESPss蛋白的表达,得到保护性抗原ESPss,其可以显著提高小鼠的抗体水平,可以显著提升宿主动物血清及脏器细胞因子IL‑4和IFN‑γ的表达水平,并为2型、7型和9型猪链球菌感染提供较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN113981151B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202111478453.1
申请日:2021-12-06
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的方法及其试剂盒,属于病毒分子检测领域。为克服临床上缺少对基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒鉴别的方法,本发明提供一种基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的鉴别方法以及引物和探针,所涉及引物和TaqMan探针是依据乙脑病毒的prM/M基因保守区和盖他病毒的E2基因保守区进行设计,其可以有效鉴别乙脑病毒和盖他病毒,具有较高特异性和灵敏度的优点,可以为乙脑病毒和盖他病毒基因型的快速检测、临床诊断以及流行病学调查提供更好的方法支持。
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公开(公告)号:CN119899916A
公开(公告)日:2025-04-29
申请号:CN202510034384.7
申请日:2025-01-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒检测领域,具体涉及一种同时检测PRRSV、PCV2、SIV的多重荧光定量PCR试剂盒及其检测方法。PRRSV、PCV2和SIV均可以猪作为宿主,且部分感染症状相似,现有技术中虽然存在单独的检测手段,但存在检测效率低、检测时间长且难以区分的缺陷,为了克服上述技术的不足,本发明提供一种同时检测PRRSV、PCV2、SIV的多种荧光定量PCR试剂盒及其检测方法,所述的试剂盒包括反应液A、反应液B、阴性对照和阳性对照,其通过特定的引物探针组对病毒的特定序列进行多重荧光定量PCR,通过检测荧光信号确定宿主是否感染特定病毒,具有检测时间短、灵敏度高的优点,解决临床上混合感染后难以区分的难题。
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公开(公告)号:CN119799838A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510091779.0
申请日:2025-01-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) , 新疆农业大学
Abstract: 本发明涉及一种猪临床病料中胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定培养基及其制备方法,属于微生物培养领域。现有技术中用于猪临床呼吸道感染病料中胸膜肺炎放线杆菌分离的培养基多为常规的普通TSA或改良TSA培养基,其难以将胸膜肺炎放线杆菌与其他呼吸道感染细菌进行区分,并不适用于临床上胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定。为了克服上述现有技术的不足,本发明提供一种猪临床病料中胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定显色培养基及其制备方法,该培养基包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨等组分,将其用于临床猪呼吸道病料的病原菌分离时,可以通过菌落特异性显色及生长状态对胸膜肺炎放线杆菌进行分离鉴定,显著降低其他杂菌的影响,适宜在猪发生呼吸道感染后的病料样本处理过程中进行推广应用。
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