公开(公告)号：CN118910058A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411320227.4

申请日：2024-09-23

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 景洋 ,  牟芳 ,  邢晓旭 ,  王宁 ,  李辉 ,  徐海冬

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/55 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种用于靶向敲除鸡PPARγ基因的sgRNA及其载体和应用，属于生物领域。本发明的sgRNA核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；并且本发明还提供了一种重组载体包含所述的sgRNA；另一方面，本发明还提供一种含有红色荧光标记的鸡PPARγ基因突变细胞株的构建方法，利用CRISPR/Cas9系统将红色荧光蛋白基因mCherry靶向敲入PPARγ基因，红色荧光蛋白基因为后续PPARγ基因编辑细胞的快速鉴定和高效筛选提供保证。本发明的gRNA靶向PPARγ基因的第二外显子，并基因编辑区插入了红色荧光素蛋白报告基因，基因编辑效率为75.4％，既可以使鸡PPARγ基因失活，又可以高效筛选出编辑细胞。

公开(公告)号：CN118726481A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410928161.0

申请日：2024-07-11

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 牟芳 ,  娄明 ,  王宁 ,  李辉

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明提出了一种鸡胰岛素信号通路报告基因载体、构建方法及其应用，属于基因工程领域。通过RNA‑seq、qRT‑PCR方法筛选并验证了FASN为鸡胰岛素信号通路反应基因。然后通过生物信息学分析确定FASN核心启动子区的胰岛素反应区域并构建一种胰岛素信号通路报告基因载体pGL3‑cFASN，该报告基因载体包含了FASN核心启动子区的胰岛素反应区域，应用于制备检测鸡胰岛素信号通路活性试剂。解决了鸡与其他哺乳动物的胰岛素信号通路不同，现有胰岛素信号通路报告基因载体不能通用的问题。构建用于检测鸡胰岛素信号通路的报告基因载体对于解析鸡胰岛素信号通路在鸡生长发育以及相关性状形成中的作用和机制具有重要意义。

公开(公告)号：CN115873969A

公开(公告)日：2023-03-31

申请号：CN202210824827.9

申请日：2022-07-14

Applicant: 福建圣泽生物科技发展有限公司 ,  东北农业大学

Inventor： 肖凡 ,  李辉 ,  王守志 ,  刘鑫 ,  孙宇航 ,  陈冲

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种同时预示肉鸡腹脂含量和腿部骨骼强壮度的分子标记及其应用，属于动物分子遗传学技术领域。为了更准确方便地鉴定低脂肉鸡，加速肉鸡的育种过程，本发明提供一种同时预示肉鸡腹脂含量和腿部骨骼强壮度的分子标记，所述分子标记为SEQ IDNO.3或SEQ ID NO.4所示，具有SEQ ID NO.3所示的核酸序列的样本为II基因型，具有SEQID NO.4所示的核苷酸序列的样本为DD基因型，具有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列的样本为ID基因型。可以加快鸡的育种进程，培育适合市场需求的腹脂含量低且腿部骨骼强壮的肉鸡，从而获得较好的经济效益。

公开(公告)号：CN114621953A

公开(公告)日：2022-06-14

申请号：CN202210171709.2

申请日：2022-02-24

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张慧 ,  申林用 ,  周佳美 ,  李辉 ,  汪舒萍 ,  宋岩 ,  肖凡 ,  高海河

IPC: C12N15/113 ,  A61K31/715 ,  A23K20/153

Abstract: 本发明提供一种特异性抑制鸡CTGF基因表达的siRNA及其应用。本发明的siRNA的正义链和反义链序列分别如SEQ ID NO.1和2所示。该siRNA干扰的CTGF靶序列如SEQ ID NO.3所示。该siRNA分子的反义链可特异性地与抑制鸡CTGF基因的mRNA结合，降解mRNA，从而干扰转录后翻译过程，促进鸡前脂肪细胞分化。利用本发明提供的siRNA干扰鸡CTGF基因，转录水平上的干扰效率高、特异性好，与基因敲除技术相比灵敏度高、操作简便、实验周期短、价格低廉，为研究禽类CTGF基因的功能和调控机制提供直接有效的实验工具。

公开(公告)号：CN113813984A

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN202111227211.5

申请日：2021-10-21

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张颖 ,  江群 ,  张家兴 ,  李辉 ,  李锐真

IPC: B01J27/24 ,  C02F1/72 ,  C02F101/30

Abstract: 一种N/Fe共掺杂类纳米管催化材料的制备方法及其应用，涉及水处理技术领域。本发明的目的是要解决传统铁基材料稳定性差，以及铁基均相体系中铁离子游离出来容易导致催化剂失活，同时Fe3+很难快速转化为Fe2+而抑制铁基催化剂的活性等问题。方法：将三聚氰胺与铁氧化物混合均匀后，在惰性气体的环境下加热至700℃～1100℃，并在700℃～1100℃的温度条件下热解1h～4h，热解结束后，冷却至室温，得到N/Fe共掺杂类纳米管催化材料，三聚氰胺占三聚氰胺和铁氧化物总质量的50％～91％。本发明可获得一种N/Fe共掺杂类纳米管催化材料的制备方法及其应用。

公开(公告)号：CN108841932B

公开(公告)日：2021-03-12

申请号：CN201810768924.4

申请日：2018-07-13

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张慧 ,  李辉 ,  杨莉莉

IPC: C12Q1/6858 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法及应用，属于动物分子遗传学技术领域。本发明所提供的方法是根据鸡蛋白前体加工酶1基因SNP位点c.1880C>T上下游190bp序列设计引物，再根据所得引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，之后利用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，再对酶切产物进行电泳分离，最后利用PCR‑RFLP技术分析基因多态性，获得鸡腹脂标记基因型。本发明所提供的方法具有操作简单、费用低、精确度高的特点，可进行自动化检测，是一种有效的分子标记育种手段，可大幅加快鸡的育种进程。

公开(公告)号：CN111560440B

公开(公告)日：2020-12-04

申请号：CN202010461058.1

申请日：2020-05-27

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王守志 ,  李辉 ,  王宁 ,  张影 ,  李玉茂 ,  曹志平 ,  栾鹏

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 一种同时预示肉鸡腹脂性状、腿部骨骼性状和繁殖性能的分子标记方法及应用，属于动物分子遗传学技术领域。为了更准确方便地鉴定低脂肉鸡，加速肉鸡的育种过程，本发明根据鸡SREBP1基因外显子3的SNP位点g.3656C>T上游208bp和下游72bp序列设计引物，获得扩增引物，再根据所得引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，之后利用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，获得鸡标记基因型。本发明操作简单、费用低、精确度高，可进行自动化检测，是一种有效的分子标记育种手段，采用该方法可以加快鸡的育种进程，培育适合市场需求的腿部骨骼健康、繁殖性能好的低脂肉鸡，从而获得较好的经济效益。

公开(公告)号：CN110578008A

公开(公告)日：2019-12-17

申请号：CN201911031119.4

申请日：2019-10-28

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 张慧 ,  于家强 ,  李辉 ,  杨莉莉 ,  曹志平 ,  栾鹏 ,  李玉茂

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本发明公开了一种预示和鉴定鸡腹脂重的分子标记方法，属于分子标记方法技术领域为了解决无法从表型上对鸡腹脂重进行判断，本发明提供了一种预示和鉴定鸡腹脂重的分子标记方法，具体方案是根据鸡TCF21基因SNP位点g.1033G>A上下游394bp序列设计引物，再根据所得引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，之后利用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，再对酶切产物进行电泳分离，获得肉鸡腹脂重的标记基因型。本发明所提供的方法具有操作简单、费用低、精确度高的特点，可进行自动化检测，是一种有效的分子标记育种手段，可大幅度加快鸡的育种进程。

公开(公告)号：CN104513858B

公开(公告)日：2017-04-05

申请号：CN201410834956.1

申请日：2014-12-29

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李辉 ,  张珂 ,  张慧

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法及应用，属于动物分子遗传学技术领域。本发明所提供的方法是根据鸡蛋白前体加工酶1基因SNP位点g.28897G>A和g.29161C>T上下游250bp序列设计引物，再根据所得引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，之后利用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，再对酶切产物进行电泳分离，最后利用PCR‑RFLP技术分析基因多态性，获得鸡腹脂标记基因型。本发明所提供的方法具有操作简单、费用低、精确度高的特点，可进行自动化检测，是一种有效的分子标记育种手段，可大幅加快鸡的育种进程。

公开(公告)号：CN106489824A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610896131.1

申请日：2016-10-14

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李辉 ,  冷丽 ,  张慧 ,  王启贵 ,  顾志刚

IPC: A01K67/02

Abstract: 本发明公开了一种高低腹脂肉鸡品系的选育方法，如下：组建一个白羽肉鸡基础群，在基础群的基础上，针对鸡只的腹脂含量利用闭锁群选育的方法进行选育，低腹脂品系选择腹脂率均值在群体品均值以下的家系个体留种，高腹腹脂品系选择腹脂率均值在群体品均值以上的家系个体留种，经过4个世代的选育，得到腹脂率显著的低于高脂系的低脂系鸡只。本发明培育出的低脂肉鸡品系49日龄的腹脂含量极显著的低于现有商品肉鸡的腹脂含量，为低脂肉鸡配套系的选育提供了优质的素材。