公开(公告)号：CN118910058A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411320227.4

申请日：2024-09-23

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 景洋 ,  牟芳 ,  邢晓旭 ,  王宁 ,  李辉 ,  徐海冬

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/55 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种用于靶向敲除鸡PPARγ基因的sgRNA及其载体和应用，属于生物领域。本发明的sgRNA核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；并且本发明还提供了一种重组载体包含所述的sgRNA；另一方面，本发明还提供一种含有红色荧光标记的鸡PPARγ基因突变细胞株的构建方法，利用CRISPR/Cas9系统将红色荧光蛋白基因mCherry靶向敲入PPARγ基因，红色荧光蛋白基因为后续PPARγ基因编辑细胞的快速鉴定和高效筛选提供保证。本发明的gRNA靶向PPARγ基因的第二外显子，并基因编辑区插入了红色荧光素蛋白报告基因，基因编辑效率为75.4％，既可以使鸡PPARγ基因失活，又可以高效筛选出编辑细胞。