公开(公告)号：CN118726481B

公开(公告)日：2025-05-16

申请号：CN202410928161.0

申请日：2024-07-11

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 牟芳 ,  娄明 ,  王宁 ,  李辉

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明提出了一种鸡胰岛素信号通路报告基因载体、构建方法及其应用，属于基因工程领域。通过RNA‑seq、qRT‑PCR方法筛选并验证了FASN为鸡胰岛素信号通路反应基因。然后通过生物信息学分析确定FASN核心启动子区的胰岛素反应区域并构建一种胰岛素信号通路报告基因载体pGL3‑cFASN，该报告基因载体包含了FASN核心启动子区的胰岛素反应区域，应用于制备检测鸡胰岛素信号通路活性试剂。解决了鸡与其他哺乳动物的胰岛素信号通路不同，现有胰岛素信号通路报告基因载体不能通用的问题。构建用于检测鸡胰岛素信号通路的报告基因载体对于解析鸡胰岛素信号通路在鸡生长发育以及相关性状形成中的作用和机制具有重要意义。

公开(公告)号：CN119464302A

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202411783773.1

申请日：2024-12-06

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 牟芳 ,  黄佳新 ,  王宁 ,  李辉

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一组鸡PGC‑1α基因启动子及其构建方法与应用，属于基因工程领域。所述的鸡PGC‑1α基因启动子为核苷酸序列如SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：5所示的A1‑A5序列中的任意一条。启动子的应用包括：应用于启动萤火虫荧光素酶在鸡前脂肪细胞中的表达、应用于所述鸡PGC‑1α基因启动子受特定转录因子PPARγ的调控。这5种PGC‑1α基因启动子在鸡前脂肪细胞中都具有启动子活性，都能直接调控鸡PGC‑1α基因转录表达。本发明公开的鸡PGC‑1α启动子可以在体外细胞水平预示PGC‑1α的转录活性，因此，这对于揭示鸡PGC‑1α的转录调控机制、培育低腹脂肉鸡、以及揭示多种人类疾病发生背后的分子机制和开发靶向PGC‑1α表达的药物具有潜在应用价值。

公开(公告)号：CN119372201A

公开(公告)日：2025-01-28

申请号：CN202411488733.4

申请日：2024-10-24

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 牟芳 ,  罗昊玉 ,  王宁 ,  李辉

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/53 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种鸡NRG4基因近端启动子和双向启动子及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。鸡NRG4基因近端启动子为核苷酸序列如SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：4所示的A1‑A4序列中的任意一条。本发明以鸡全血中提取DNA作为模板，利用引物进行PCR扩增和限制性酶切的方法获取了4种鸡NRG4基因近端启动子。其中，A1启动子具有很强的双向启动子活性。本发明还公开了NRG4基因近端启动子受到特定转录因子C/EBPα的调控，这对于揭示鸡NRG4的转录调控机制、培育低腹脂肉鸡、以及揭示多种人类疾病发生背后的分子机制和开发靶向NRG4表达的药物具有潜在应用价值。

公开(公告)号：CN118910058A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411320227.4

申请日：2024-09-23

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 景洋 ,  牟芳 ,  邢晓旭 ,  王宁 ,  李辉 ,  徐海冬

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/55 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种用于靶向敲除鸡PPARγ基因的sgRNA及其载体和应用，属于生物领域。本发明的sgRNA核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；并且本发明还提供了一种重组载体包含所述的sgRNA；另一方面，本发明还提供一种含有红色荧光标记的鸡PPARγ基因突变细胞株的构建方法，利用CRISPR/Cas9系统将红色荧光蛋白基因mCherry靶向敲入PPARγ基因，红色荧光蛋白基因为后续PPARγ基因编辑细胞的快速鉴定和高效筛选提供保证。本发明的gRNA靶向PPARγ基因的第二外显子，并基因编辑区插入了红色荧光素蛋白报告基因，基因编辑效率为75.4％，既可以使鸡PPARγ基因失活，又可以高效筛选出编辑细胞。

公开(公告)号：CN118726481A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410928161.0

申请日：2024-07-11

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 牟芳 ,  娄明 ,  王宁 ,  李辉

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明提出了一种鸡胰岛素信号通路报告基因载体、构建方法及其应用，属于基因工程领域。通过RNA‑seq、qRT‑PCR方法筛选并验证了FASN为鸡胰岛素信号通路反应基因。然后通过生物信息学分析确定FASN核心启动子区的胰岛素反应区域并构建一种胰岛素信号通路报告基因载体pGL3‑cFASN，该报告基因载体包含了FASN核心启动子区的胰岛素反应区域，应用于制备检测鸡胰岛素信号通路活性试剂。解决了鸡与其他哺乳动物的胰岛素信号通路不同，现有胰岛素信号通路报告基因载体不能通用的问题。构建用于检测鸡胰岛素信号通路的报告基因载体对于解析鸡胰岛素信号通路在鸡生长发育以及相关性状形成中的作用和机制具有重要意义。